磺胺-5-甲氧嘧啶酶联免疫分析试剂盒的研制与应用

[目的]建立动物食品中残留磺胺-5-甲嘧啶的检测方法.[方法]用戊二醛法将磺胺-5-甲嘧啶(SMD)与牛血清白蛋白(BSA)或卵清蛋白OVA)偶联.用紫外分光光度计进行扫描鉴定.以制备的SMD-BSA人工抗原免疫BALB/C小鼠,取脾细胞与骨髓细胞(SP2/0-Ag14)融合,制备腹水,获得高效价的抗体.[结果]建立了间接竞争ELISA的测定方法,检测限为1.766ng/mL,定量限为11.274ng/mL.用SD、SMM、SQ等8种药物作为竞争抗原,做ELISA实验,结果显示抗体与这8种磺胺药没有交叉反应.制备了检测试剂盒,在肌肉、肝脏的样本中加入50ng/mL,100ng/mL做添加回收实验,回收率为87.45%～97.6%,变异系数为3.35%.[结论]本方法的检测限能够满足动物源性食品中SMD残留检测的要求,试剂盒灵敏度高,稳定性好,使用方便,适于基层大规模筛选.     

金黄色葡萄球菌蛋白A在大肠杆菌中的自诱导表达以及单克隆抗体的制备

利用大肠杆菌表达金黄色葡萄球菌蛋白A,根据大肠杆菌密码子偏好性对金黄色葡萄球菌蛋白(SPA)基因进行密码子优化。SPA基因插入p ET28a表达载体中,利用自诱导培养基诱导SPA表达,表达量达8.2 mg/L。通过Ni亲和层析纯化SPA蛋白,纯度达到95%。纯化的SPA蛋白免疫小鼠制备单克隆抗体,间接ELISA法检测抗体效价,抗体效价可达1∶40000,采用Protein G亲和层析纯化SPA单抗,纯度达98%。纯化后的SPA单抗检测与食品中常见的致病菌无交叉反应。结果显示,SPA单抗特异性良好,与其他致病菌无交叉反应。     

百泰生物:全球抗体生产的领先企业

<正>百泰生物药业有限公司(百泰生物)在单克隆抗体和疫苗研发、生产方面,已有较强的核心竞争力,生产技术水平领先国际知名生物制药业同行。用药难、用药贵,令老百姓谈医色变。研发出患者用得起的药,让病人付出尽可能低的看病成本,摆脱病魔的威胁,是百泰生物10年风雨兼程在抗癌道路上的不竭动力。百泰生物以研发和生产治疗恶性肿瘤单克     

国际生物医药产业的特点及新增长点

国际生物医药产业发展的主要特点第一,用于生物制药的研究开发费用迅速增加,每5年翻一番,是世界上用于R&D费用最多的产业。目前处于临床研究阶段的生物药品有1000多     

双特异性抗体

在旧金山南部的基因技术公司Genentech总部,资深科学家杰曼&;#183;冯（Germaine Fuh）已经运用基因技术重新设计了该公司两种最赚钱的抗癌药物。一献是赫赛普啶（Herceptin）,它是一种可以抑制HER2基因的单克隆抗体,HER2在20％的乳腺肿瘤中存在,     

鲤春病快速诊断技术的临床应用

本文在建立的鲤春病病毒荧光RT-PCR快速检测技术基础上,对国内外收集的19株SVCV病毒悬液进行了验证试验,验证结果良好.另外,还通过人工动物感染试验,将感染SVC病毒的鲤鱼组织样品在同经典的细胞培养分离病毒方法对比研究后,认为应用该方法检测SVCV的组织研磨样品悬液时,最多能将3尾鱼的组织器官混合后制备待检样品.本文还用本实验室制备的SVCV单抗.运用间接免疫荧光抗体技术(IFAT)对SVCV欧洲株和亚洲株感染的鲤鱼上皮瘤细胞进行检测,结果表明,该抗体可特异性检出接毒后感染细胞中的SVCV欧洲株和亚洲株,表明应用该单抗可以检测出SVCV的欧洲株或亚洲株,不会造成漏检现象.     

自制麻痹性贝毒GTX2，3单克隆抗体在直接竞争酶免疫学检测方法中的初步应用

【目的】建立麻痹性贝类毒素GTX2,3直接竞争酶免疫学检测方法（de-ELISA）。【方法】通过过氧化反应将GTX2,3与辣根过氧化物酶HRP偶联,利用适当稀释的兔抗小鼠IgG多抗作为包被抗体,利用GTX2,3作为竞争剂与GTX2,3-HRP竞争结合自制GTX2,3的单克隆抗体,初步建立检测麻痹性贝类毒素GTK2,3的de-ELISA,并用直接竞争ELISA检测该方法与C2毒素之间的交叉反应。【结果】直接ELISA结果显示GTX2,3与HRP发生过氧化反应,de-ELISA检测麻痹性贝类毒素时,该方法的灵敏度为1μg／mL,工作范围为1-40μg／mL,该方法与C2毒素无交叉反应。【结论】初步建立的dc-ELISA适用于麻痹性贝类毒素的快速检测,为其酶免疫学快速检测试剂盒的研制奠定了基础。     

盐酸克仑特罗检测试剂盒的研制

本研究通过将盐酸克仑特罗分别与自制血清白蛋白、牛血清白蛋白和卵清蛋白相偶联后,制成免疫原和包被抗原,利用单克隆抗体制备技术,制备了能够分泌抗盐酸克仑特罗的单克隆抗体细胞株.以自制血清白蛋白效价最好,且该株细胞分泌的抗体特异性强,与其它克仑特罗类药物无交叉反应.在筛选出盐酸克仑特罗单克隆抗体的基础上,首次研制出利用单克隆抗体对动物组织中残留的盐酸克仑特罗进行检测的试剂盒.本试剂盒的最低检测限为0.1ng/mL,检测范围为0.1-10ng/mL,通过对24份阳性样品检测并与德国r-biopharm公司和英国的RANDOX公司同类试剂盒作对比试验,阳性符合率95.8%.     

稻谷中吡虫啉残留的免疫分析技术研究

研究比较了稻谷中吡虫啉残留的2种免疫检测方法:一种是以噬菌体展示技术为基础的酶联免疫分析方法(ELISA),其抑制中浓度(IC50)为96.6 ng/m L,检测线性范围(IC20-IC80)为8~875 ng/m L,最低检测限(LOD)为1.8 ng/m L;另一种是以单克隆抗体为基础的ELISA方法,其抑制中浓度为5.1 ng/m L,检测线性范围为0.6~43.4 ng/m L,最低检测限为0.2 ng/m L。将2种方法用于稻谷中吡虫啉的检测,结果显示抗体ELISA方法检测灵敏度和添加回收率要优于噬菌体ELISA方法,回收率分别为81.6%~85.4%和50.2%~58.6%。添加500 ng/g的吡虫啉到稻谷中进行模拟储存实验,用抗体ELISA方法检测吡虫啉含量变化。结果显示,稻谷中吡虫啉含量随时间变化呈递减趋势,吡虫啉浓度在储存3周后降到了初始浓度的50%以下,储存10周后含量低于分析方法的最低检测限,结果表明免疫分析方法适用于稻谷中吡虫啉的快速筛查。     

五康生物核心技术平台与产业化项目

一、重组蛋白质药物技术平台五康生物的重组蛋白质药物技术平台承担蛋白质药物设计、蛋白质药物制备和药效验证等蛋白质药物研发的前期工作,该平台具有独特的技术特点,在蛋白质药物设计和改造方面具有巨大优势。新颖的蛋白疫苗设计技术如何打破人体的免疫耐受是治疗性疫苗设计核心的问题。五康生物的蛋白疫苗技术独辟蹊径设计了一类能够诱导人体产生特异性免疫反应的新型蛋白类疫苗设计技术,具有完全自主知识产权。接种这类疫苗后,人体自身会产