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目的 系统建立小鼠脑皮质神经干细胞(NSCs)体外培养的技术平台,并探索一组micmRNA对NSCs分化能力的影响.方法 胎鼠(E14)脑皮质分离NSCs进行体外培养;免疫荧光法检测NSCs向神经元和星型胶质细胞的自然分化;Real-time定量PCR筛选一组分化前后表达水平有显著性差异的microRNA;应用新一代脂质体高效转染NSCs,将该组microRNA或其抑制物导人NSCs;Western blot检测导入的RNA序列对NSCs分化能力的影响.结果 基于小鼠NSCs体外培养模型,筛选出一组NSCs分化前后表达水平存在显著性差异的mieroRNA(miR-124,137,128).Western blot结果显示miR-124的反义链能够明显下调β-tubulin Ⅲ的表达(P<0.01),过表达miR-137和miR-128后β-tubulinⅢ的表达量有所升高.结论 脂质体转染技术能够将miRNAs高效导入NSCs中;microRNA-124,137,128能够影响NSCs的分化. 相似文献
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