| 牛朊病毒正常蛋白特异性片段的克隆表达和纯化 |
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| 引用本文： | 李炎鑫,马贵平,尹少满,田波.牛朊病毒正常蛋白特异性片段的克隆表达和纯化[J].检验检疫科学,2005,15(3):3-6. |
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| 作者姓名： | 李炎鑫 马贵平 尹少满 田波 |
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| 作者单位： | 1. 北京出入境检验检疫局,北京,100026
2. 中国科学院微生物研究所,北京,100080 |
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| 基金项目： | 本研究为国家"十五"攻关项目"食品安全关键技术研究"的子课题"疯牛病、禽流感病原检测技术研究"的内容,项目编号为2001BA804A12;也是863课题"出入境重大疫原快速检测技术的研究和预警体系的建立"的子课题,项目编号为2002AA215013. |
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| 摘 要： | 目的] 表达重组牛朊病毒正常蛋白特异性片段.方法] 用所设计引物以聚合酶链式反应扩增出牛朊病毒正常蛋白特异性片段基因,利用DNA重组技术,将牛朊病毒正常蛋白特异性片段基因插入表达载体pET30a,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,将表达产物(包涵体)用8mol/L尿素溶解,在变性条件下用Cu2+氧化复性纯化.结果] 重组表达质粒在大肠杆菌中得到了高效表达,目的蛋白分子量约为15KD,Western blotting分析表明,目的蛋白具有朊病毒蛋白的抗原特性,变性条件下用Cu2+氧化复性纯化得到电泳纯的重组蛋白.结论] 这一工作为下一步制备抗体和进行结构、功能的研究打下扎实基础.
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| 关 键 词： | 朊病毒 牛朊病毒蛋白特异性片段 原核表达 纯化 |
EXPRESSION AND PURIFICATION OF BOVINE CELLULAR PRION PROTEIN SPECIFIC FRAGMENT |
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| Li YanXin,Ma GuiPing,Yin Shaoman,TianBo.EXPRESSION AND PURIFICATION OF BOVINE CELLULAR PRION PROTEIN SPECIFIC FRAGMENT[J].Inspection and Quarantine Science,2005,15(3):3-6. |
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| Authors: | Li YanXin Ma GuiPing Yin Shaoman TianBo |
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