鹅细小病毒延边株VP3基因原核表达质粒构建 |
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引用本文: | 金东春,杜秋明,鲁承,王暖成.鹅细小病毒延边株VP3基因原核表达质粒构建[J].中国科技财富,2009(24). |
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作者姓名: | 金东春 杜秋明 鲁承 王暖成 |
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作者单位: | 延边大学农学院,动物医学系 |
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基金项目: | 吉林省牧业管理局项目 |
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摘 要: | 本试验根据GenBank已公布的鹅细小病毒B株基因序列,设计了一对扩增VP3基因的特异性引物,对鹅细小病毒延边分离株基因组DNA进行了PCR扩增,得到了约为1500bp的VP3基因片段,将其回收纯化后与pMD-18T simple载体连接,然后进行克隆,经双酶切分析、PCR鉴定及测序,验证了所克隆的基因是鹅细小病毒VP3基因.用EcoR Ⅰ和Xho Ⅰ双酶切该片段并回收该片段,将此基因片段克隆至相同酶切回收后的PGEM-4T-1原核表达载体中,获得重组质粒PGEM-VP3,经PCR鉴定,限制性内切酶双酶切分析,证实了重组质拉的正确性.
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关 键 词: | 鹅细小病毒 VP3基因 原核表达 |
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