白鲜皮饮片标准汤剂质量评价体系构建

为了提高白鲜皮配方颗粒的质量标准,采用15批白鲜皮饮片标准汤剂,建立了质量评价体系。第1次加入10倍的水、浸泡30 min、煎煮20 min,第2次加入8倍的水、煎煮15 min,以标准化工艺制备标准汤剂,采用HPLC法测定黄柏酮和梣酮的含量及指纹图谱。结果显示:15批白鲜皮标准汤剂中黄柏酮的转移率为25.08%~44.08%,平均转移率为34.79%,标准偏差为5.37%;梣酮转移率为22.63%~32.86%,平均转移率为27.94%,标准偏差为3.56%;出膏率为20.56%~34.42%,平均出膏率为29.05%,标准偏差为3.33%。采用中药指纹图谱相似度评价系统进行指纹图谱测定,得到共有峰10个,指认出白鲜碱、黄柏酮、梣酮3个峰。由此可知,白鲜皮饮片标准汤剂的制备工艺规范,样品质量稳定,指纹图谱相似度大于0.92,可用于白鲜皮配方颗粒的质量控制,并为白鲜皮饮片标准汤剂的应用和其他根茎类饮片的研究提供参考。     

金银花饮片—标准汤剂量质传递研究

为了阐明金银花饮片—标准汤剂量质变化及其分布规律,采用UPLC建立金银花饮片—标准汤剂特征图谱方法,并根据质谱分析进行化合物推断;利用新公式-K值分析化合物传递过程中的规律。结果表明,UPLC特征图谱方法重复性、精密度、稳定性良好;对11个特征峰进行结构推断,确定了9个特征峰：新绿原酸（峰1）、绿原酸（峰2）、断氧化马钱苷酸（峰3）、隐绿原酸（峰4）、獐牙菜苷（峰5）、断氧化马钱子苷（峰6）、异绿原酸B（峰8）、异绿原酸A（峰9）、异绿原酸C（峰11）;由K值分析可知,15批金银花饮片—标准汤剂过程各峰都进行了传递,新绿原酸和隐绿原酸K值大于1,绿原酸K值小于1,与绿原酸异构化生成新绿原酸和隐绿原酸有关;异绿原酸B和异绿原酸C的K值大于1,异绿原酸A的K值小于1,与异绿原酸A异构化生成异绿原酸B和异绿原酸C有关。由此,通过K值可分析金银花标准汤剂中量质传递规律,且符合有机酸类化学成分特性。建立的特征图谱方法准确、稳定、可靠,金银花饮片—标准汤剂新公式-K值能够辅助分析饮片—标准汤剂的量质传递规律,可为后续以标准汤剂为基准的配方颗粒或经典方制剂质量控制提供依据。     

基于巴戟天配方颗粒的标准汤剂特征图谱

为了使巴戟天配方颗粒的质量标准更加科学规范,通过对15批产自不同地区的巴戟天饮片进行标准汤剂的制备,以及对标准汤剂干膏粉进行研究,确定了巴戟天标准汤剂的出膏率范围;采用高效液相色谱法对主含成分耐斯糖进行了含量测定,研究了巴戟天配方颗粒的HPLC特征图谱分析方法,并对特征谱图中的水晶兰苷进行了指认。结果表明,在以流动相作为提取溶剂、甲醇-水(二者体积比为3∶97)为流动相的条件下,耐斯糖含量的转移率范围为73.21%～94.49%,标准汤剂出膏率范围为49.05%～55.87%。基于巴戟天配方颗粒的标准汤剂特征图谱研究方法严谨、可行,更加科学地阐明了配方颗粒与标准汤剂研究的一致性。     

葛根水煎剂和配方颗粒HPLC指纹图谱相关性研究

为了能全面准确地反映葛根配方颗粒和水煎剂成分的一致性和葛根配方颗粒替代传统饮片的可行性,对葛根配方颗粒和水煎剂的特征图谱进行了相关性研究。采用华谱XAqua C18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,以甲醇-0.1%冰醋酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,检测波长为250nm,流速为1.0mL/min,柱温为25℃,采集时间为41min,分别建立10批葛根水煎剂和10批葛根配方颗粒的特征图谱。结果表明,10批葛根配方颗粒HPLC特征图谱的8个特征峰均可在水煎剂中得到追踪,相似度均大于0.99,并从8个共有峰中指认出葛根素。葛根水煎剂和配方颗粒的主要化学成分基本相同,且共有成分含量比例相近,为中药配方颗粒替代传统饮片的可行性以及临床研究提供了重要依据。     

基于UPLC指纹图谱的西洋参饮片、标准汤剂、配方颗粒的质量相关性研究

为了实现西洋参配方颗粒全生产过程的质量控制,采用超高效液相色谱法(UPLC)对其饮片、标准汤剂和配方颗粒的指纹图谱和量质传递进行了相关性研究。采用UPLC法测定18批西洋参饮片、标准汤剂、3批配方颗粒的指纹图谱、人参皂苷Rg₁,Re, Rb₁总量,以K值和各已知成分的转移率作为量值传递的评价指标,结合相似度评价法研究三者的相关性。结果表明：西洋参饮片、标准汤剂、配方颗粒指纹图谱均呈现8个共有特征峰,并指认出5个成分,三者的指纹图谱与相应对照指纹图谱及三者对照指纹图谱的相似度均大于0.95,人参皂苷Rg₁,Re, Rb₁的转移率及K值趋势一致,量值传递稳定。西洋参饮片、标准汤剂、配方颗粒的化学成分基本一致,三者具有良好的相关性。研究所得可对西洋参配方颗粒的质量标准研究提供实验及理论支持,并为后续以标准汤剂为基准的配方颗粒或经典方制剂质量控制提供了参考依据。     

双参饮片—标准汤剂—成品量值传递研究

为将少数民族用药双参开发成配方颗粒,建立双参饮片、标准汤剂与配方颗粒的高效液相色谱马钱苷酸含量测定方法及薄层色谱鉴别方法,并同时考察双参饮片—标准汤剂—配方颗粒的量值传递关系。采用安捷伦1260Ⅱ液相色谱仪与Waters Symmetry C₁₈柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）,以乙腈-0.1％磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱,检测波长为240 nm,流速为1 mL/min,柱温为30 ℃,建立马钱苷酸含量测定方法;以乙酸乙酯-甲醇-水（10∶2∶1）为展开剂,置紫外光灯（254 nm）下检视,建立薄层鉴别方法;以出膏率、马钱苷酸含量、薄层鉴别图谱为主要评价指标,分析量值传递规律。结果表明：马钱苷酸含量测定、鉴别方法具有较高的稳定性、重复性及可信度;3批双参配方颗粒出膏率均值为18.7%,马钱苷酸含量均值为41.1 mg/g,马钱苷酸含量转移率均值为43.1%,均在15批标准汤剂均值±3SD范围内。马钱苷酸含量测定和薄层色谱鉴别方法可用于双参配方颗粒质量评价,为进一步开展双参配方颗粒研究提供数据基础,并促进少数民族用药现代化。     

知母饮片、水煎剂和配方颗粒HPLC指纹图谱相关性研究

为了考察知母饮片、水煎剂和配方颗粒之间化学成分的差异,采用HPLC法对三者的指纹图谱进行了相关性研究。选用Inertsil ODS-3柱(250mm×4.6mm,5μm),以乙腈为流动相A,1%醋酸为流动相B进行梯度洗脱,流速为1mL/min,柱温为30℃,检测波长为265nm,采集时间为100min,分别建立10批知母饮片、10批知母水煎剂与10批知母配方颗粒的指纹图谱。结果显示,10批知母配方颗粒HPLC指纹图谱的9个指纹峰均可在饮片中得到追踪,相似度均大于0.95,从9个共有峰中指认出芒果苷,知母饮片、水煎剂和配方颗粒的主要化学成分基本相同。本研究所建立的指纹图谱方法重复性、稳定性好,可用于饮片、配方颗粒生产过程中的质量控制。     

基于相关性的麻黄配方颗粒HPLC特征图谱研究

为更好地评价麻黄配方颗粒、饮片和水煎剂的一致性,分别建立麻黄配方颗粒、饮片和水煎剂的HPLC特征图谱,使用Wondasil C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸为流动相梯度洗脱,柱温为30℃,流速为1.0 mL/min,检测波长为210 nm,分别得到10批麻黄配方颗粒、饮片和水煎剂的特征图谱,并进行关联性分析。结果表明,麻黄配方颗粒HPLC特征图谱中的13个共有峰均能在水煎剂中得到追踪,11个共有峰可在饮片中得到追踪。经方法学考察认为,所建立的麻黄配方颗粒HPLC特征图谱方法稳定,具有较高的重复性、稳定性及可信度,可用于麻黄配方颗粒、饮片和水煎剂的一致性评价,也可为麻黄配方颗粒的质量控制提供参考。     

桑叶配方颗粒物质基准研究

桑叶配方颗粒迄今尚没有统一的质量标准。为提升桑叶配方颗粒的内在质量,对其物质基准评价方法进行了研究。选取具有代表性产地的15批桑叶制备物质基准,采用高效液相色谱法,以芦丁、异槲皮苷、紫云英苷作为评价指标,确定桑叶物质基准的出膏率范围、标志性成分含量及转移率范围,采用超高效液相色谱法,建立物质基准UPLC特征图谱,并对其主要成分进行指认。结果表明:15批物质基准中,芦丁转移率为19.94%～34.05%,异槲皮苷转移率为11.67%～43.58%,紫云英苷转移率为10.73%～43.05%;物质基准特征图谱中,标定了14个共有峰,指认出7个色谱峰,分别为新绿原酸、绿原酸、咖啡酸、芦丁、异槲皮苷、槲皮素-3-O-(6″-O-丙二酰基)-β-D-葡萄糖苷、紫云英苷。所建立的基准评价方法为桑叶配方颗粒质量标准的制定及其后续大规模生产提供了数据基础。     

枳实标准汤剂质量研究

为更好地评价不同产地的枳实标准汤剂,建立了枳实标准汤剂中辛弗林含量及特征图谱的测定方法。采用高效液相色谱仪与InertSustain AQ-C_(18)(4.6 mm×250 mm, 5.0μm)色谱柱,以甲醇-磷酸二氢钾溶液为流动相,柱温为28℃,流速为1.0 mL/min,检测波长为225 nm,对枳实标准汤剂中辛弗林含量、特征图谱进行了测定。结果显示,15批枳实标准汤剂出膏率均值为15.14%,范围为10.50%～19.91%,RSD为19.31%;辛弗林含量(质量分数)均值为9.07 mg/g,范围为5.92～15.21 mg/g,RSD为33.05%;辛弗林含量转移率均值为22.65%,范围为10.24%～47.70%,RSD为45.92%;15批枳实标准汤剂共确定7个共有峰,各峰相对保留时间均在±5%内,相对峰面积RSD均大于100%,相似度为0.655～0.936。这表明,不同产地的枳实出膏率、辛弗林含量及含量转移率较稳定;不同产地的枳实标准汤剂各成分间差异较大。经方法学考察认为,枳实标准汤剂中辛弗林含量及特征图谱的测定方法稳定,具有较高的重复性、稳定性及可信度,可用于枳实标准汤剂的质量评价,可为进一步深入研究枳实配方颗粒提供参考。     

牛蒡子标准汤剂质量评价体系的建立

为了提高牛蒡子标准汤剂的质量标准,制备了15批牛蒡子标准汤剂,通过对牛蒡苷含量及指纹图谱的研究,建立了牛蒡子标准汤剂的质量评价体系。第一煎加入8倍水,浸泡30min,煎煮20min;第二煎加入6倍水,煎煮15min,经浓缩、干燥后制得标准汤剂,应用HPLC法测定牛蒡子标准汤剂中牛蒡苷的含量及指纹图谱。结果显示:15批牛蒡子标准汤剂中牛蒡苷的转移率为21.3%～33.3%,平均转移率为27.3%,出膏率为7.1%～11.3%,平均出膏率为9.4%;通过中药指纹图谱相似度评价系统,确定了11个共有峰,通过对照品指认出了5个色谱峰,分别为绿原酸、咖啡酸、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸、牛蒡苷、牛蒡苷元。所建立的评价体系,牛蒡子标准汤剂制备规范,样品质量稳定,指纹图谱相似度大于0.94,对提高牛蒡子配方颗粒的质量标准具有一定的参考价值。     

基于UPLC特征图谱与主成分分析的白芷配方颗粒质量评价

为了评价不同厂家白芷配方颗粒的产品质量,建立了白芷配方颗粒的特征图谱与主成分分析方法。采用Waters Uplc Class H超高效液相色谱仪与Agilent Zorbax Eclipse Plus C18(2.1mm×100mm,1.7μm)色谱柱,以乙腈-水为流动相,柱温为25℃,流速为0.2mL/min,检测波长为254nm,利用指纹图谱相似度评价软件提取白芷配方颗粒特征图谱中的特征成分,使用参照物标定5个特征峰的成分;采用SPSS 19.0软件进行主成分分析,给出了不同厂家白芷配方颗粒在2个主成分上的分布图,并对不同厂家白芷配方颗粒进行了综合评分。结果表明:10批白芷配方颗粒特征图谱确定的13个特征峰中,指认出了花椒毒酚、水合氧化前胡素、欧前胡素、蛇床子素、异欧前胡素5种成分;以回归得到的3个主成分的矩阵回归系数与方差贡献值的乘积之和作为10批样品的综合评分,排名第一的综合评分为1.77。基于UPLC特征图谱与主成分分析法能够快速、有效地检测和评价白芷配方颗粒。     

山楂标准汤剂的HPLC特征图谱研究

为了进一步研究山楂配方颗粒的质量控制方法,以山楂标准汤剂为研究对象,采用高效液相色谱仪与GL science C_(18)(4.6 mm×250 mm,5.0μm)色谱柱,以乙腈-0.4%磷酸为流动相,柱温为30℃,流速为1.0 mL/min,检测波长为254 nm,应用特征图谱技术以及中药指纹图谱相似度评价软件提取山楂标准汤剂特征图谱中的特征成分。研究表明,15批山楂标准汤剂中共确定了7个特征峰,分离度较好,且峰面积较大,易于识别,使用参照物标定了3个特征峰成分,各共有峰相对保留时间的RSD值小于2.5%。所建立的山楂标准汤剂HPLC特征图谱方法可靠、稳定,为山楂配方颗粒质量控制提供了一定的参考。     

佛手标准汤剂中两种成分的测定方法研究

为提高佛手配方颗粒的质量评价标准,利用佛手标准汤剂控制佛手配方颗粒的内在质量。以15批不同产地的佛手饮片为原料,制备佛手标准汤剂,建立含量测定方法,以柚皮苷、橙皮苷为指标成分,测定了15批佛手标准汤剂的相关含量。结果表明:柚皮苷、橙皮苷分别在0.025 1～0.125 5,0.160 5～0.802 3μg范围内线性关系良好(r=0.999 9),平均加样回收率分别为102.27%和101.48%,重复性考察RSD值分别为0.78%和0.89%,12 h稳定性考察RSD值分别为0.59%和1.46%。所提出的方法能同时测定柚皮苷和橙波苷两种成分,节约了分析时间,提高了佛手产品的质量标准。     

瓜蒌配方颗粒指纹图谱研究

为了全面反映瓜蒌配方颗粒所含多种组分,明确瓜蒌配方颗粒HPLC指纹图谱的测定方法,对10批瓜蒌配方颗粒进行了HPLC指纹图谱测定及相似度评价。采用HPLC方法,色谱柱为GL Sciences公司InertSustain AQ-C_(18)柱(4.6 nm×250 nm,5μm),以甲醇-0.1%甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,检测波长为260 nm,流速为0.8 mL/min,柱温为25℃,对瓜蒌配方颗粒指纹图谱测定结果进行了相似度评价。结果表明,10批瓜蒌配方颗粒指纹图谱中呈现16个共有峰,相似度均大于0.960,表明瓜蒌配方颗粒具有良好的一致性;此外,在16个共有峰中指认出腺嘌呤、尿苷2个化学成分。瓜蒌配方颗粒指纹图谱反映了瓜蒌配方颗粒的多组分面貌,可为瓜蒌配方颗粒的多组分质量控制提供参考依据。     

基于全程质量控制理念的杜仲颗粒特征图谱研究

为明确杜仲颗粒生产过程中水溶性成分的转移情况,提供更为全面的质量控制方法,采用HPLC法对杜仲饮片、杜仲叶饮片、标准煎液与杜仲颗粒的特征图谱进行了相关性评价。使用Phenomenex(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱,检测波长为227 nm,柱温为30℃,流速为1.0 mL/min,考察提取方式、提取溶剂及时间的影响。结果表明,选用超声提取方式,以甲醇作为提取溶剂,反应时间为20 min时获得的效果较好;在此优化条件下建立特征图谱分析方法,能够使得杜仲颗粒的药效物质基础与药材保持一致,样品质量稳定,制备工艺规范,几个特征峰可全部在饮片中得到追溯,各共有峰的相对保留时间小于0.5%。所建立的特征图谱专属性强,重复性好,可有效鉴别和评价杜仲颗粒的质量,为制定系列品种的全面质量控制方法提供参考。     

青风藤配方颗粒的制备及与传统汤剂的比较

为了研究青风藤配方颗粒制备工艺以及对青风藤配方颗粒与传统汤剂进行定性定量比较,运用正交试验方法,采用干法制粒,以出膏率、青藤碱含量为指标,优选青风藤配方颗粒制备工艺;采用薄层色谱法进行定性比较;以青藤碱为对照品,采用高效液相色谱法进行定量比较。青风藤配方颗粒最佳制备工艺如下:提取2次,加水量18倍(第1次加水量为10倍,第2次加水量为8倍),各煎煮1.0h。TLC结果显示,配方颗粒与传统汤剂化学成分的类型无明显差异。5批青风藤配方颗粒青藤碱含量分别为1.56%,1.58%,1.31%,1.20%和1.78%;5批青风藤传统汤剂青藤碱含量分别为0.94%,0.96%,0.85%,0.82%和1.02%。青风藤配方颗粒与传统汤剂中化学成分的类型基本相同,但青藤碱含量差异较大。     

浮小麦配方颗粒特征图谱及4种核苷类成分定量研究

为了实现浮小麦配方颗粒的质量控制和评价,采用高效液相色谱法,以Waters XSelect^? HSS T3(4.6 mm×250 mm, 5μm)为色谱柱,在甲醇-水为流动相、梯度洗脱、柱温为30℃、流速为1.0 mL/min、检测波长为260 nm的条件下,建立了浮小麦配方颗粒的特征图谱及4种核苷类成分的含量测定方法。共确定了13批浮小麦配方颗粒特征图谱中的8个共有峰,并全部获得指认,分别为尿嘧啶、胞苷、次黄嘌呤、尿苷、腺嘌呤、鸟苷、色氨酸、腺苷,各共有峰相对保留时间的RSD均小于2.0%。尿嘧啶、尿苷、鸟苷、腺苷分别在0.001 9～0.047 3 mg/mL、0.003 9～0.098 2 mg/mL、0.002 8～0.070 1 mg/mL、0.002 9～0.073 0 mg/mL范围内线性关系良好(r=1.000 0),平均加样回收率分别为99.0%、100.7%、101.2%、101.8%。所建立的核苷类成分含量测定方法准确、高效、重复性好,可用于浮小麦配方颗粒的质量控制。     

苍耳子标准汤剂质量研究

为了更好地评价不同产地苍耳子标准汤剂的出膏率、绿原酸含量及含量转移率,对苍耳子标准汤剂的质量进行了研究。采用日本Shimadzu LC-20A型高效液相色谱仪,Agilent Zorbax Eclipse C_(18)色谱柱(2.1 mm×250 mm,5.0μm),以乙腈-磷酸为流动相,柱温为28℃,流速为1 mL/min,检测波长为327 nm,建立了苍耳子标准汤剂中绿原酸含量的测定方法。结果表明:15批苍耳子标准汤剂出膏率的均值为4.30%,均值±3SD为3.28%～5.32%;绿原酸含量均值为3.44 mg/g,均值±3SD为0～7.16 mg/g;绿原酸含量转移率均值为36.54%,均值±3SD为0.66～72.42%;不同产地苍耳子的出膏率较为稳定,但绿原酸含量及含量转移率差异较大。经方法学考察,苍耳子标准汤剂中绿原酸含量测定方法稳定,具有较高的重复性、稳定性及可信度,可用于苍耳子标准汤剂的质量评价,为苍耳子配方颗粒后续研究及大规模生产提供数据支持。     

近红外光谱法快速检测赤芍配方颗粒 芍药苷和浸出物含量

为了直接、快速地测定赤芍配方颗粒中芍药苷和浸出物的含量,解决回流烘干法测定耗时长、操作繁琐等问题,利用近红外漫反射技术,结合偏最小二乘法(PLS),建立了测定芍药苷和浸出物含量的近红外光谱测定方法。选用积分球系统测定样品的近红外光谱,定量模型的预处理方法采用多元散射校正和一阶导数进行处理,光谱范围分别为5 492～5 103cm-1,7 428～7 201cm-1,6 942～5 322cm-1。结果表明,定量模型中芍药苷含量和浸出物含量的最佳主因子数分别为7和6,内部交叉验证均方差分别为0.082 6和0.226 0,决定系数(R2)分别为0.981 7和0.982 4,系统精密度RSD值分别为1.1%和0.9%,方法精密度RSD值分别为2.1%和1.6%,外部验证预测均方差分别为0.363和0.282。采用建立的近红外预测模型对赤芍配方颗粒进行快速测定,方法可行,分析快速、简便,结果准确,为赤芍配方颗粒的测定提供了高效方法。