荷兰进口百合斑驳病毒的分子检测

荷兰进口百合种球,经过隔离试种,采用RT-PCR方法对怀疑感染有百合斑驳病毒的百合植株进行病毒检测,通过对RT-PCR检测扩增到的产物进行克隆测序,分析其序列,并与其他6个已知斑驳毒株进行比较,其同源性达到99%,通过汁液摩擦接种健康植株,3～7天后表现出斑驳症状,确认荷兰进口百合种球携带有百合斑驳病毒(Lily Mottle Virus(LMoV)).     

北京地区百合切花生产的可能性研究

作者对北京目前百合栽植情况及气候条件等方面进行研究,确定了在北京西部和北部山区的部分地区具备百合种球规模化生产的自然环境条件,并筛选出11个适宜区域.百合切花的生长发育对生态条件要求不是太严.在北京地区需要在日光温室内栽培,因此可将生产基地设在远郊区县管理方便,交通方便的平原地区.     

荷兰切花百合的箱式栽培

使用塑料箱和人工基质栽培百合切花,在荷兰越来越普及。箱式栽培易于实行机械化,能够调节基质的营养成分和pH值,上地不需进行轮作,在现代化温室里可     

食品中诺沃克样病毒和甲肝病毒检测方法研究进展

近年来，国际上有关食源性病毒性疾病的报道日益增多。其中，最重要的病原体是诺沃克样病毒（NLV）和甲肝病毒（HAV）。但由于缺乏快速灵敏的检测方法，无法有效地监控高危食物。即使在此类研究世界领先的美国，由于缺乏有效的检测方法，人们认为美国疾病与预防控制中心（CDD）目前所报道的发病人数也可能只是冰山一角。我国尚无此类流行病学统计资料，开展此类研究意义重大。     

利用RT-PCR和Dig-cDNA探针检测百合无症病毒

根据百合无症病毒(LSV)的核苷酸序列设计一对特异性引物,利用RT-PCR技术扩增得到了一条与目的片段大小一致的条带;进一步克隆测序表明,该序列与已知的LSV序列有96%的同源性.用随机引物法合成地高辛标记的cDNA探针,建立了核酸斑点杂交检测体系.本研究分别建立了用于LSV的特异性的高灵敏度RT-PCR检测体系(其检测灵敏度为1.4ng/叶片)和适合大通量检测的Dig-cDNA(地高辛标记)核酸斑点杂交检测体系(其检测灵敏度为20μg/叶片).     

长白山野生百合开发利用的探讨

本文重点介绍了百合属植物的用途、价值,国内外野生百合开发利用的状况,长白山野生百合的资源状况和开发利用的发展思路.     

无硫可膨胀石墨制备方法研究

本文研究了一种以重铬酸钾为氧化剂,在发烟硝酸的作用下,与天然鳞片石墨反应,制备无硫可膨胀石墨的新方法,最佳反应条件为:石墨(g):浓硝酸(ml):重铬酸钾(g)=1:20:0.14,室温条件下反应45min,膨胀容积达350ml/g,经检验产品不含硫.     

基于excel的无定向导线计算方法

地质勘探工程中,常常遇到多年地质工程资料或多家单位共同施工.为使用以往资料或同盟单位提供的相关信息,就需要对其工程实测确保资料准确可靠.地勘工程工作环境限制,特别是在大面积林区作业,控制点少且分布不理想,通视差,控制点易遭破坏,加之国家严禁滥砍林木.无定向导线测量方法在联测工程点时具有快速、准确、可操作性强的优势,采用计算机编程进行数据处理,计算精度高.     

兰州百合的“围城”之困

位于兰州市七里河区瓜州路东口的“百合源”精品土特产是一家靠卖兰州百合等土特产为主的经营店,之于整个市场对百合的需求,它如同其他的百合售卖单位一样,既具有独立性又具有普遍存在性,如果追问这些特产（百合）的来源,最终,你会把源头追溯到百合种植所在地兰州市七里河区南部背阴的二阴山坡地区。     

检测猪传染性胃肠炎病毒RT—PCR方法的建立

[目的]建立对猪传染性胃肠炎病毒的RT-PCR检测方法,为该病的诊断和流行病学调查提供可靠的和敏感的手段.[方法]根据Genbank收录的TGEV-Miller毒株S蛋白的基因序列,设计合成一对引物,在优化RT-PCR反应条件的基础上,建立了检测TGEV的RT-PCR方法.[结果]两条引物扩增目的片段长度为1262bp.经测序分析,与Miller毒株的同源性为99.1%.[结论]该RT-PCR方法灵敏,可靠,具有很强的临床检测意义,可用于TGEV的快速诊断和流行病学调查.     

GI型札幌病毒的检测方法研究

札幌病毒（Sapovims,SV）属于杯状病毒科,是急性胃肠炎的主要病原体之一。本文使用多对引物和探针对SV进行了普通RT—PCT和实时荧光RT—PCR检测,筛选出了比较理想的引物和探针,进而建立了贝类产品中SV的RNA提取方法、普通RT—PCR和实时荧光RT—PCR方法。     

SYBR-GreenⅠ实时荧光PCR检测传染性鲑鱼贫血病

[目的]利用SYBR-GreenⅠ实时荧光PCR检测传染性鲑鱼贫血病.[方法]根据传染性鲑鱼贫血病毒(ISAV)Y10404的序列合成部分基因片段,将其插入到T载体中,构建阳性质控品;并设计合成一对特异性引物.利用阳性质控品建立SYBR-Green Ⅰ实时荧光PCR方法,对反应体系进行优化,进行特异性和敏感性分析,并制作标准曲线.[结果]最佳引物终浓度为0.51μmol/L.所建立的SYBR-GreenⅠ实时荧光PCR方法能够特异地检出ISAV;最低检出浓度为9.5× 10-8 μg/μL,其灵敏度比传统PCR高1000倍;能够从阳性样品中检出ISAV,Tm值为82.5℃.建立了标准曲线,其r2＞0.99.     

牛传染性鼻气管炎PCR检测方法的建立

[目的]建立牛传染性鼻气管炎的PCR检测方法.[方法]根据牛传染性鼻气管炎病毒的gB基因序列设计一对引物,进行PCR检测,并对反应条件及反应体系进行优化.[结果]得到与预期大小(362bp)一致的特异性片段.最佳退火温度为58～64℃,Mg2+最佳浓度为1.6mM,dNTPs为0.36mM,引物为0.2 pmol/μL,聚合酶0.8U/100μL.用这对引物扩增IBRV、HCV、PRRSV、PRV,只有IBRV扩增出特异性条带.[结论]该PCR方法的检测灵敏度为2.4ng/100μL,较其他方法敏感.     

贝类产品中诺沃克病毒RT-PCR检测方法

本文建立了贝类产品中诺沃克病毒检测的普通RT-PCR方法.用8对引物对诺沃克病毒进行检测研究,发现GII-SKF/GII-SKR引物检测GII型病毒特异性强且灵敏度高.用引物GI-SKF/GI-SKR和GII-SKF/GII-SKR分别对系列稀释度的质粒进行检测,检测灵敏度均能达到102拷贝.将诺沃克病毒添加于牡蛎肠胃组织中并提取RNA,并用引物GI-SKF/GI-SKR 和GII-SKF/GII-SKR对其进行扩增,检出GII型诺沃克病毒.     

果汁鉴伪技术及其研究进展

果汁鉴伪技术是目前食品安全领域和现代果汁业的关注热点之一.针对目前市场上出现的果汁掺假问题,介绍了果汁和果汁饮料中的掺假现象和手段,综述了国际上果汁鉴伪技术及研究进展,包括常规检测方法、新型理化分析法和现代分子生物学方法.     

婴儿食品中阪崎肠杆菌检测方法的改进

目前常用的阪崎肠杆菌的分离鉴定方法存在许多不足。通过改进目前常用方法,使得选择性大大提高,可疑菌落易于识别,检测周期缩短,可检测出仅含1个阪崎肠杆菌的接种样品。改进方法与原标准方法的定性验证实验结果一致,定量重复实验结果良好。用改进方法开展市场上婴幼儿奶粉、婴幼儿补充食品中的阪崎肠杆菌污染情况调查,婴幼儿奶粉中阪崎肠杆菌检出率为7．3％,婴幼儿补充食品中阪崎肠杆菌检出率为25％。     

检测单增李斯特氏菌的几种选择性固体培养基的效果比较

[目的]选择更加适合单增李斯特氏菌检测的固体选择性培养基.[方法]参见ISO/TS11133-2中的培养基验证方法并有所改进,对国际上常用的3种选择性固体培养基进行比较选择.[结果]OXA和李斯特氏;显色培养基的增菌效果相近,且单增李斯特氏菌和绵羊李斯特氏菌在李斯特氏菌显色培养基上具有特征性菌落形态,易于与其他李斯特氏菌相区别.[结论]OXA和李斯特氏菌显色培养基效果较好,比较适合单增李斯特氏菌的检测,两种培养基联合使用可以提高单增李斯特氏菌的检出率.     

多重PCR检测食品中转基因成分研究

[目的]建立检测转基因食品的多重PCR-聚丙烯酰胺凝胶电泳快速检测体系.[方法]针对转基因大豆、玉米、油菜的多个相对稳定的转基因元件,包括35S、NOS、EPSPS、Cry1A、NPTⅡ等基因,同时选定植物本身固有的大豆Lectin、玉米IVR、油菜Napin基因作为内源参照指示基因,设计、筛选出9对引物分别组成多重PCR,结合高灵敏度的聚丙烯酰胺凝胶电泳组成快速检测体系,对转基因食品进行检测,1～2天能完成整个检测过程.对珠海地区市售的大豆、玉米、油菜及其加工产品共185个样品中的转基因成分进行了初步调查.[结果]建立的多重PCR检测体系稳定可靠、特异性好,灵敏度高.调查的185份可疑食品样品中,转基因阳性率达27.6%.[结论]该检测体系快速可靠、灵敏准确、特异性好,且操作简便、成本低廉,是一种进行转基因食品检测的良好的技术模式.对珠海地区的转基因食品状况有了一定了解.