金黄色葡萄球菌胶体金免疫层析试纸条开发及性能评估

开发了一种检测金黄色葡萄球菌的胶体金免疫层析试纸条。采用柠檬酸钠还原法制备胶体金,用胶体金标记金黄色葡萄球菌SPA蛋白的单克隆抗体,另一株SPA蛋白单克隆抗体包被于硝酸纤维素膜,制备成双抗夹心法胶体金免疫层析试纸条。该试纸条检测灵敏度为1×106 CFU/m L,能够识别金黄色葡萄球菌的不同菌株,与肠炎沙门氏菌、大肠杆菌、单核细胞增生李斯特菌及空肠弯曲杆菌等无交叉反应。通过样品加标检测,在25 g牛奶、肉、糕点和蔬菜等样品中加入2.5 CFU和25 CFU细菌,增菌后检测,并与国标法对比,检测结果与国标法一致。     

粮食中重金属镉定量快速检测方法的建立

开发了一种重金属镉的胶体金快速检测方法。利用IEDTA螯合镉离子,并与匙孔血蓝蛋白KLH偶联,合成镉离子抗原。经过免疫小鼠及细胞融合后筛选到镉离子的单克隆抗体细胞株。通过亲和层析的方法制备得到镉单克隆抗体,并建立了粮食样本中竞争法原理的重金属镉胶体金免疫层析定量检测方法。该方法检测灵敏度为50μg/kg,定量检测范围为50~400μg/kg。检测特异性良好,与其他常见的5种重金属离子无交叉反应。利用该检测方法与原子吸收法进行了大米样本检测对比。在20个样本中除1个样本由于检测灵敏度问题结果不符外,其余样本的检测结果均与原子吸收法符合,无显著差异。该研究为粮食中重金属镉检测提供了一个有效的途径。     

金黄色葡萄球菌蛋白A在大肠杆菌中的自诱导表达以及单克隆抗体的制备

利用大肠杆菌表达金黄色葡萄球菌蛋白A,根据大肠杆菌密码子偏好性对金黄色葡萄球菌蛋白(SPA)基因进行密码子优化。SPA基因插入p ET28a表达载体中,利用自诱导培养基诱导SPA表达,表达量达8.2 mg/L。通过Ni亲和层析纯化SPA蛋白,纯度达到95%。纯化的SPA蛋白免疫小鼠制备单克隆抗体,间接ELISA法检测抗体效价,抗体效价可达1∶40000,采用Protein G亲和层析纯化SPA单抗,纯度达98%。纯化后的SPA单抗检测与食品中常见的致病菌无交叉反应。结果显示,SPA单抗特异性良好,与其他致病菌无交叉反应。     

胶体金免疫层析法快速定量检测糙米中重金属离子铅

本研究建立了快速定量检测糙米中重金属离子铅的胶体金免疫层析试纸条分析方法。通过一系列的实验研究了该方法的灵敏度、重复性和特异性。结果表明用免疫胶体金法测定糙米中铅的检出限为0.041mg/kg,定量限为0.097mg/kg,方法重现性较好,使用胶体金免疫层析法和原子吸收光谱法同时检测加标样品,结果一致。因此,该方法适用于糙米中重金属离子铅的快速定量检测。     

胶体金免疫层析法快速检测乳制品中重金属离子铅

本研究建立了快速检测乳制品中重金属离子铅的胶体金免疫层析试纸条分析方法。通过一系列的实验,研究了该方法的灵敏度、重复性和特异性,结果表明用免疫胶体金法测定乳制品中生鲜乳和酸奶的检出限为25μg/kg,成品奶的检出限为30μg/kg,奶粉和奶酪的检出限为300μg/kg,方法重现性较好。使用胶体金免疫层析法和原子吸收光谱法同时检测加标样品,结果一致。该方法适用于乳制品中重金属离子铅的快速检测。     

重金属离子镉快速检测及监测分析系统的评价

本研究建立在快速定量检测大米中,重金属离子镉的胶体金免疫层析试纸条分析方法,通过一系列的实验研究了该方法的准确度和精密度。结果表明该检测方法准确度和精密度较高,并且重金属离子镉快速检测及监测分析,该系统小巧轻便、操作简单、检测结果可以追溯,适用于粮库筛查和监测。     

基因超进化:农作物转基因之外的一条新路径

正以往,人们对转基因作物的争论焦点是,把外源基因转入农作物后,外源基因是否存在安全隐患。那么,能否找到一条仅靠农作物自身基因突变,就获取农作物抗病虫、抗除草剂等优良性状基因的路径?一种旨在实现上述目标的"基因超进化"技术已在四川诞生,并获四川省科技计划项目支持。目前,该项目科研团队已通过自主研发的"基因超进化"技术,在实验室内对水稻自身的EPSPS基因(抗草甘膦除草剂基因)进行高通量筛选、分离,     

我国棉铃虫防治研究取得重大突破

来自中科院上海生命科学研究院植物生理生态研究所的研究人员发明了一种植物介导的RNA干扰技术,可以有效、特异地抑制昆虫基因的表达,从而抑制害虫的生长。RNA干扰是一种新发现的基因调控机制。该研究组以棉花和棉铃虫为研究对象,先分离出棉铃虫参与棉酚解毒的基因——P450,用双链RNA的转基因植物喂食后,棉铃虫P450基因的表达显著降低,对棉酚的耐受性大大减弱。     

为什么渔用“自家疫苗”在我国势在必行?(1)

<正>所谓的自家疫苗(autogenus vaccine),一般是指在从养殖现场发生疾病的动物体内分离鉴定病原生物后,选择具有引起疾病的代表菌、毒株,经大量培养且经过灭活处理,经再度检验对动物具有安全性后,制备成疫苗接种于局部区域内养殖动物疾病的预防。对水产养殖动物的疾病防控有三条途径,即生态防控、药物防控和免疫防控。所谓生态防控就是通过采用各种生态养殖(ecological aquaculture)措施,达到减少     

乳清蛋白ACE抑制肽酶解工艺纯化研究

为充分利用奶酪制作的副产物——乳清蛋白增加乳制品附加值,本研究以浓缩乳清蛋白为试验原料,采用酶解技术制备乳清蛋白ACE(Angiotensin Converting Enzyme)抑制肽。在酶的筛选试验中,以酶解产物ACE抑制率和肽得率为指标选出最佳水解用酶为Alcalase 2.4L碱性蛋白酶,然后采用单因素试验得到了此酶的最佳水解条件并对水解物的稳定性进行了试验。研究结果表明,最适酶解条件为底物浓度7.5%、加酶量6 000U/g、pH值8.5、温度55℃,得到酶解产物ACE抑制率为69.38%、IC_(50)为0.80mg/mL,经模拟肠胃消化处理后,肽的活性并无显著变化,稳定性较好。经葡聚糖凝胶纯化后,抑制率提升至75.33%,其IC_(50)为0.74mg/mL。     

数百斤硬币引出的话题

焦点斯闻 1995年2月15日,中央电视台新闻联播节目播出的一条新闻引起了金融界特别是信用合作系统的广泛瞩目。去年12月19日,安徽省阜阳市王古同信用社与一储户发生纠纷,故意用数百斤硬币支付了该储户4100多元的储蓄本息。 此事经当地信用合作管理部门调查,大致经过是:5年前,阜阳市瓦店信用社代办员周洪亮给该乡农民周玉河贷款1600元,此外,又吸收周玉河定期存款2000元(未报帐)。事后,周洪亮因贪污等问题被除名并被依法起诉后出逃。1992年1月,瓦房信用社与王古同乡信用社合并后多次向周玉河催收贷款,但周拒不还贷,因此,当周玉河到王古同信用社支取存款时也被拒付。 周玉河认为自己的合法权益受到侵犯,遂委托律师起草诉