单增李斯特菌内化素A单克隆抗体制备及胶体金免疫层析试纸条的研制

将单增李斯特菌的内化素A(InlA)基因片段进行密码子优化后,合成基因并插入到质粒载体pET28a中,构建原核表达重组质粒。经过乳糖自诱导表达后,获得了大小为48 kD的重组蛋白。用Ni亲和层析方法纯化重组表达后的InlA蛋白片段。用该蛋白免疫BALB/C小鼠,筛选高效的InlA单克隆抗体细胞株,并制备单克隆抗体,共筛选出3株亲和力较高的单克隆抗体,筛选得到的InlA单克隆抗体经过Protein G亲和层析纯化。研制双抗夹心法胶体金免疫层析试纸条,并对其敏感性、特异性等指标进行评价。该试纸条灵敏度达到1×10~6CFU/m L,用实际样本加标后,对该胶体金试纸条进行验证,并用国标方法做了对比。结果表明,该试纸条能满足样本中单增李斯特菌的检测要求。     

胶体金免疫层析试纸条在污染物重金属离子铅检测方面的应用与展望

胶体金免疫层析试纸条作为快速检测工具,具有特异性强、使用方便、结果易于判断等优点,被广泛应用于牧场和实验室检测。目前,已研发应用于污染物重金属离子铅检测的胶体金试纸条。文章从胶体金免疫层析试纸条的技术原理、研究发展以及发展方向等方面进行简要的综述。     

呕吐毒素胶体金三线定量检测条性能研究

为验证呕吐毒素胶体金三线定量检测条的性能,采用胶体金三线定量检测条和HPLC法对多种谷物样品进行检测,并对检测结果进行分析研究。结果表明,该方法检出限为118μg/kg,定量限为316μg/kg,检测结果与HPLC法无显著差异且相关性非常好。为了验证该方法的重复性,6个参与测试人员在相同实验室,按照同一方法,采用不同设备,检测相同样品,变异系数为4.7%~19.6%,平均变异系数为11.8%。为了验证该方法的特异性,选择DON结构类似物和其他5种生物毒素的标准品在阴性玉米中进行添加,添加浓度为1 000μg/kg,结果表明,呕吐毒素胶体金检测条对伏马毒素、赭曲霉毒素、黄曲霉毒素、玉米赤霉烯酮无交叉反应。因此,呕吐毒素胶体金三线定量检测条能满足粮食中呕吐毒素测定的要求,易于推广应用。     

两种β2-受体激动剂荧光免疫快速检测试纸条的制备及评价

目的:探索一种同时对莱克多巴胺(RAC)、沙丁胺醇(SAL)两种常见瘦肉精进行快速检测的荧光免疫试纸条的制备方法并评估其性能.方法:用荧光染料直接标记抗体,制备检测猪尿中RAC和SAL的试纸条,对试纸条的检出限、重复性进行评估.结果:RAC和SAL的检测限均可达到1 ng·mL-1;RAC和SAL重复性检测中变异系数(...     

玉米赤霉烯酮胶体金检测试纸的研制及定量检测的应用

目的:合成玉米赤霉烯酮(ZEN)人工抗原,制备抗玉米赤霉烯酮单克隆抗体(mAb),并以此为基础建立胶体金免疫层析检测试纸,于胶体金读数仪配合使用,用于玉米和小麦样品中ZEN的快速定量检测.结果:检测玉米和小麦样品,玉米赤霉烯酮的检测限为4.7 μg/kg,定量限13.9 μg/kg,线性范围14.5～500 μg/kg,相关系数r=0.9964.以GB/T 23504-2009免疫亲和柱-高效液相色谱法检测样品的结果为认定值,胶体金法检测样品的准确度在80.1％～149.7％,变异系数范围7.3％～19.6％.采用配对t-检验分析,2种方法无显著性差异.     

面向可持续发展的城市地下空间开发外部性价值 评估及应用

研究目的：分析并量化地下空间对城市可持续发展的外部性价值,为城市地下空间规划和土地管理提供外部性价值数据分析和决策支持。研究方法：服务重置成本法、归纳演绎法、空间计量分析法。研究结果：（1）以SDGs为可持续发展评价标准,提出了“城市地下空间资产”和“城市地下空间服务”的概念及外部性价值指标体系,并建立了服务重置成本法的货币化评估方法框架;（2）提出了基于外部性价值评估的地下空间规划决策及使用权价格评估方法;（3）青岛市市南区的实证分析结果表明,城市地下空间开发产生的正外部价值（外部效益）大于负外部性价值（外部成本）,有利于城市可持续发展。研究结论：兼顾正外部性和负外部性的城市地下空间开发外部性价值评估是城市地下空间规划决策和土地管理的关键因素,本文提出的理论框架和评估方法为城市地下空间可持续利用及城市可持续发展提供了一条全面、合理、可行的分析路径。