灵芝酸G诱导Vβ3~+CD8~+T细胞抗肿瘤活性的研究

为探讨SEA(Staphylococcus Enterotoxin A,SEA)存在下的灵芝酸G(Licochalcone-G,LG)对小鼠CD8+细胞活化及杀伤肿瘤细胞的作用,采用流式细胞技术分别检测CD8+细胞表面分子表达及活化后细胞内的颗粒酶B(Granzyme B,Gr B)和穿孔素(Perforin,Pf)的水平、Caspase-3酶的活性分析肿瘤细胞凋亡。结果为:SEA组和SEA+LG组经过3 d刺激能激活小鼠CD8+细胞Vβ3和Vβ11分别为7.4±0.45,11.5±0.72。体外实验显示,SEA组和SEA+LG组的Vβ3+CD8+T细胞内Gr B%的水平分别为70.2±8.04,91.6±8.16;Pf%的水平分别为67.3±6.86,86.4±7.17,与对照组相比有显著性差异(t=5.24,t=6.43;t=4.31,t=5.47,P0.01);SEA组和SEA+LG组的HL-60肿瘤细胞内Caspase-3酶的活性分别为37.6±4.81,68.8±6.82,与对照组相比有显著性差异(t=3.18,t=5.27,P0.01);SEA组和SEA+LG组的A20肿瘤细胞内Caspase-3酶的活性分别为23.7±3.58,54.1±5.71,与对照组相比有显著性差异(t=4.23,t=4.88,P0.01)。SEA依赖的LG能促使小鼠CD8+T细胞Vβ3和Vβ11分子活化,活化的Vβ3+CD8+T细胞内分泌大量的Gr B和Pf,并通过Caspase-3的信号途径诱导肿瘤细胞凋亡。     

LPS烟雾干预下的大鼠COPD膈肌细胞凋亡模型研究

使用雄性SPF级Wistar大鼠45只,随机分为A、B、C3组,每组各15只,各组再各分为造模前、造模2周、造模4周3个亚组,每亚组5只．A组正常喂养,B组采用低氧法,C组采用气管注入LPS联合烟雾法造模．采用TUNEL及免疫组织化学法,检测各组膈肌细胞凋亡率及Caspase-3的表达,4周后,经肺HE切片光镜下分析,造模组均符合典型COPD大鼠肺部表现．并计算平均肺泡数（MAN）、肺泡腔与肺总面积比（PAA）,A、B、C组膈肌细胞凋亡率及Caspase-3的表达：A组随时间推移,各亚组间无显著差异;B、C组随时间推移,造模2周、4周亚组细胞阳性率显著高于A组,同期亚组（P〈0．01）,B、c组内各2周、4周亚组间差异显著（P〈0．05）;B、C造模组间各2周、4周亚组间无统计学差异（P〉0．05）。结果是低氧、烟雾、LPS3种因素都能使大鼠膈肌细胞凋亡,LPS联合烟雾造模组,形成了具有鲜明的COPD大鼠模型特征,更符合COPD大鼠发病机制,为大鼠膈肌细胞凋亡的造模提供了一个选择。     

[Co(NTB)Cl]_2[CoCl_4]·4CH_3OH的合成、晶体结构和超氧化物歧化酶模拟活性

合成和表征了一种超氧化物歧化酶(SOD)模型化合物[Co(NTB)Cl]2[CoCl4]·4CH3OH(NTB=三-(苯并咪唑-2-甲基)胺),并用NBT光照还原法对它进行了SOD模拟活性测试。结果表明,配合物中Co2+的配位构型有2种:一种是在[CoCl4]2-中,它与4个Cl-形成正四面体构型;另一种是在[Co(NTB)Cl]+中形成变形三角双锥结构。配合物具有一定的SOD模拟活性,它催化O·-2歧化分解的速度随着其浓度增加而增加,其IC50为0.884μmol·L-1。     

[Co（NTB）Cl]2[CoCl4]·4CH3OH的合成、晶体结构和超氧化物歧化酶模拟活性

合成和表征了一种超氧化物歧化酶(SOD)模型化合物[Co(NTB)Cl]2[CoCl4]·4CH3OH(NTB=三-(苯并咪唑-2-甲基)胺),并用NBT光照还原法对它进行了SOD模拟活性测试。结果表明,配合物中Co2+的配位构型有2种:一种是在[CoCl4]2-中,它与4个Cl-形成正四面体构型;另一种是在[Co(NTB)Cl]+中形成变形三角双锥结构。配合物具有一定的SOD模拟活性,它催化O·-2歧化分解的速度随着其浓度增加而增加,其IC50为0.884μmol·L-1。     

CH_3X(X=F,Cl,Br,I)和nH_2O(n=1,2)反应的ab initio研究

应用Gaussian 09程序,在MP2/6-311+G(2d,2p)理论水平下,对CH3F和H2O反应体系的反应机理进行研究,发现2个反应通道,通道1是CH3F和H2O首先形成复合物CH3F·H2O,然后经过过渡态TS(CH3…F…HOH)直接生成产物CH3OH和HF;通道2是CH3F先经过过渡态TS'(H2C…HF+H2O)形成中间产物P1(H2C·OH2+HF),然后经过过渡态TS'(H2C…OH2+HF)生成产物CH3OH和HF。TS、TS'、TS'分别为68.120,88.422,85.215 kcal/mol,TS比TS'约低20 kcal/mol,即通道1为主要反应途径。研究CH3X(X=F,Cl,Br,I)和nH2O(n=1,2)的反应规律性,对Br、I使用Lan12mb赝势基组。结果表明:CH3X与1H2O反应时,CH3F、CH3Cl、CH3Br、CH3I的反应能垒TS分别为66.635,63.384,61.774,56.254 kcal/mol,随着卤原子序数增加,反应能垒降低约3 kcal/mol。CH3X和2H2O反应时,CH3F、CH3Cl、CH3Br、CH3I的反应能垒TS1分别为57.264,54.084,51.389,39.816 kcal/mol;CH3F、CH3Cl、CH3Br的TS1比TS低10 kcal/mol左右,而CH3I的TS1比TS低16.4kcal/mol。CH3F水解的活化能TS1为57 kcal/mol,与实验值吻合较好。     

丹参酮ⅡA对心肌缺血再灌注BCL-2和Caspase-3表达的影响

为探讨丹参酮ⅡA(TanⅡA)对心肌缺血再灌注损伤大鼠Bcl-2及Caspase-3蛋白表达的影响,将大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组、TanⅡA低剂量治疗组和TanⅡA高剂量治疗组。用定量PCR方法观察缺血再灌注大鼠心肌Bcl-2和Caspase-3 mRNA表达,并采用末端脱氧核糖核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL法)检测细胞凋亡。结果为缺血再灌注组Bcl-2和Caspase-3表达增加;与缺血再灌注组比较,TanⅡA高、低剂量治疗组均显著增加Bcl-2表达,减少Caspase-3表达。TanⅡA高、低剂量治疗组心肌梗死体积较缺血再灌注组减小。TanⅡA高、低剂量治疗组心肌细胞凋亡明显轻于缺血再灌注组,TanⅡA高剂量治疗组细胞凋亡亦轻于低剂量治疗组。TanⅡA对缺血再灌注心肌损伤能抑制其细胞凋亡,对心肌具有保护作用,其机制可能与增加Bcl-2蛋白表达同时降低Caspase-3蛋白表达有关。     

分散固相萃取-离子排斥色谱法测定食品馅料中的二氧化硫脲

建立了分散固相萃取-离子排斥色谱快速测定食品馅料中二氧化硫脲的方法。样品采用0.05%乙酸溶液提取,以N-丙基乙二胺(PSA)和C18作为吸附剂的分散固相萃取法(d-SPE)进行净化,以Ion Pac ICE-AS1(250mm×9mm,5μm)离子排阻色谱柱进行色谱分离,以50%乙腈和10mmol/L硫酸溶液为流动相,进行梯度洗脱,在紫外检测器波长269nm下检测,柱温为30℃。在0.4~10μg/m L范围内目标物线性关系良好(R>0.999),检出限(LOD,S/N≥3)和定量下限(LOQ,S/N≥10)分别为1mg/kg和3mg/kg,方法回收率在94%~106%之间,相对标准偏差(RSD)小于5%。该方法简单、快速、准确、重现性好,适用于食品馅料中二氧化硫脲的快速分析。     

灵芝酸对家兔免疫性肝损伤的研究

为研究灵芝酸对异烟肼所致免疫性肝损伤的保护作用,采用180 mg/kg异烟肼灌胃制备家兔免疫性肝损伤模型。罗氏全自动生化仪测定血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬酸氨基转移酶(AST)含量;HE染色法观测家兔肝脏病理学变化;ELISA法检测血液中干扰素(INF-γ)和肿瘤坏死因子(TNF-α)含量变化;分光光度法测定肝组织中丙二醛(MDA)的含量。结果为:异烟肼20 h可诱导家兔免疫性肝损伤血清中ALT和AST的含量分别为136 U/L和248 U/L;灵芝酸干预后ALT和AST分别为67 U/L和126 U/L;HE染色法观察灵芝酸干预后肝脏尚存少量的空泡;INF-γ和TNF-α分别从26.41 pg/m L和21.86 pg/m L下降为22.67 pg/m L和18.82 pg/m L;MDA从3.54μmol/L下降为1.5μmol/L。灵芝酸对免疫性肝损伤的保护作用可能是通过下调细胞因子分泌、降低肝脏MDA水平、抑制脂质过氧化反应来完成。     

幽门螺杆菌阳性复发性消化性溃疡三联及四联用药的临床疗效分析

为比较四联疗法与三联疗法治疗幽门螺杆菌(HP)阳性复发性消化性溃疡的临床疗效,将169例经14C-尿素呼气试验及胃镜诊断证实HP阳性的复发性消化性溃疡患者随机分为2组。A组89例:兰索拉唑60 mg/d+阿莫西林2.0 g/d+克拉霉素1.0 g/d,共14 d;B组80例:兰索拉唑60 mg/d+阿莫西林2.0 g/d+克拉霉素1.0 g/d+枸盐酸铋钾480 mg/d,共14 d。治疗后复查14C-尿素呼气试验及胃镜检查,检测HP根除率及溃疡愈合情况,并观察症状缓解时间。结果为:四联疗法组与三联疗法组HP根除率分别为92.5%,77.53%,溃疡愈合率分别为98.75%,88.76%,差异有统计学意义(P0.01);且不同类型溃疡的症状缓解时间四联疗法均短于三联疗法,存在统计学差异(P0.05)。四联疗法治疗HP阳性复发性消化性溃疡优于三联疗法。     

PCR-ELISA检测乙型肝炎病毒DNA的临床应用

评价PCR-ELISA(聚合酶链式反应-酶联吸附试验)测定乙型肝炎病毒DNA(HBV DNA)的临床应用价值。采用定量PCR-ELISA和ELISA法分别检测208例乙型肝炎患者血清的HBV DNA和HBV血清标志物(HBVm),34份健康体检者作为阴性对照。结果为:血清HBV DNA含量>4×106拷贝/m l分别是抗HB-cIgM组、HBeAg组、抗HBc组、抗HBe组和三抗体组(抗HBs、抗HBe、抗HBc),其HBV DNA阳性率分别为100%,97.75%,62.30%,41.67%,16.00%。PCR-ELISA法定量检测HBV DNA具有较强的特异性和灵敏度,为临床早期诊断,了解乙型肝炎病毒复制情况,判断有无传染性以及药物疗效观察具有重要的临床意义。     

营养师参与临床服务项目认证对患者饮食医嘱遵从性的影响

为分析营养师参与临床服务项目认证(CCPC)工作对患者饮食医嘱遵从性的影响,选取黄石市中心医院2015年11月至2016年7月纳入CCPC的急性心肌梗死(AMI)、卒中(Stroke)病例70例为观察组,未纳入CCPC的急性心肌梗死(AMI)、卒中(Stroke)病例60例为对照组。对照组常规由主管护士作饮食宣教,观察组按CCPC营养管理流程,由营养师实施营养健康教育,2周后对比分析2组患者饮食营养知识的掌握情况、治疗膳食订餐率、饮食医嘱的遵从率及对饮食营养健康教育的满意度。结果为:观察组患者对低盐低脂饮食营养知识的掌握情况显著好于对照组(P0.05);观察组的治疗膳食订餐率高于对照组(x2=44.376,P0.001);观察组患者低盐饮食遵从率、低脂饮食遵从率、低盐低脂饮食遵从率分别为60.0%,97.1%,54.3%,与对照组相比,两者差异有统计学意义(P0.05);观察组患者对饮食营养健康教育的满意度评分(10.13±1.10)与对照组(4.35±1.44)相比差异有统计学意义(P0.05)。营养师参与临床服务项目认证工作能有效提高患者饮食医嘱的遵从性。     

HPLC测定虫草蝮蛇酒中虫草素含量

文章采用高效液相色谱法测定虫草蝮蛇酒中虫草素的含量,所用色谱柱为C18(250mm×4.6mm,5um),流动相为甲醇-水(18∶82),流速为1mL/min,检测波长为260 nm。结果是:进样量在0.1~1.00μg范围内,虫草素量与峰面积响应值呈良好的线性关系,r=0.9999;平均回收率为100.4%,RSD为0.86%(n=6)。     

血清抑制素B、窦卵泡数预测高龄不育妇女卵巢储备功能的临床研究

目的:探讨血清抑制素B(INHB)、窦卵泡数检测值在预测高龄不育妇女卵巢储备功能方面的临床价值。方法:检测50例年轻健康人群中月经正常的育龄妇女及50例高龄不育妇女血清抑制素值,采用(经阴道和腹部联合)超声检查方式对所有研究对象卵巢的体积、窦卵泡数、卵巢皮质血流情况进行测量,对卵巢储备功能进行监测。结果:血清中抑制素水平检测值正常妇女组为(71.12±29.23)pg/ml,高龄不育组为(13.67±9.23)pg/ml,统计学分析示两组间有显著性差异。正常组窦卵泡数>15,高龄不育组<10,两组比较亦有统计学意义。结论:INHB水平是反映卵巢储备功能的直接指标,较促卵泡成熟激素(FSH)、E2和FSH/LH(促黄体激素)比值更早期、更敏感;对预测卵巢储备功能具有一定的临床价值。窦卵泡计数也是反映卵巢储备能力的一项重要指标。     

血清抑制素B、窦卵泡数预测高龄不育妇女卵巢储备功能的临床研究

目的:探讨血清抑制素B(INHB)、窦卵泡数检测值在预测高龄不育妇女卵巢储备功能方面的临床价值。方法:检测50例年轻健康人群中月经正常的育龄妇女及50例高龄不育妇女血清抑制素值,采用(经阴道和腹部联合)超声检查方式对所有研究对象卵巢的体积、窦卵泡数、卵巢皮质血流情况进行测量,对卵巢储备功能进行监测。结果:血清中抑制素水平检测值正常妇女组为(71.12±29.23)pg/ml,高龄不育组为(13.67±9.23)pg/ml,统计学分析示两组间有显著性差异。正常组窦卵泡数>15,高龄不育组<10,两组比较亦有统计学意义。结论:INHB水平是反映卵巢储备功能的直接指标,较促卵泡成熟激素(FSH)、E2和FSH/LH(促黄体激素)比值更早期、更敏感;对预测卵巢储备功能具有一定的临床价值。窦卵泡计数也是反映卵巢储备能力的一项重要指标。     

肝癌TACE联合射频消融的临床疗效观察

为分析肝动脉化疗栓塞(TACE)联合射频消融(RFA)治疗肝癌的临床效果及影响预后质量的因素,以52例原发性肝癌患者为研究对象(观察组),采用TACE联合RFA治疗,观察患者的1~3年存活率、中位生存期、不良反应和影响疗效的因素。结果为:TACE联合RFA治疗组患者的1~3年存活率分别为90.4%,80.8%,44.2%,中位生存时间为(2.5±0.2)年;临床治愈或明显好转率、好转及稳定率明显高于对照组,恶化率明显低于对照组;不良反应分别为疼痛2例、肝功能损害1例、胃肠道反应2例;多因素分析显示TNM分期是影响生存期的独立危险因素。TACE联合射频消融治疗肝癌的疗效确切、安全性高、患者的生存率高,可作为非切除治疗肝癌方法。患者的TNM分期是术后生存率的独立因素,联合治疗时需要结合患者的治疗指征才能提高治疗效果。