快速检测西尼罗病毒胶体金免疫层析试纸条方法的建立

[目的]建立一种能快速区分、简便诊断西尼罗病毒感染的胶体金免疫层析试纸条方法。[方法]采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记西尼罗病毒NS1蛋白,采用双抗原夹心法制备胶体金免疫层析试纸条,对试纸条进行特异性和敏感性评价。[结果]该试纸条可在15min之内完成检测;在敏感性上,该试纸条对阳性血清的检测较美国Focus公司商品化的ELISA试剂盒检测低1个滴度;对89份阴性血清进行检测,试纸条检出9份阳性,ELISA试剂盒检出3份阳性,两种检测的符合率为86.52%,特异性为89.89%。[结论]初步建立了一种可以用于现场快速检测西尼罗病毒的胶体金免疫层析方法,为进一步大规模应用奠定了基础。     

食品中亚硝酸盐高快速检测试纸法的建立与应用

亚硝酸盐与间苯二胺在强酸性条件下发生重氮化偶联反应,生成橙红色偶联产物。以此原理为基础,通过筛选载体类型,优化显色条件,建立快速检测试纸法。定性中速滤纸为载体,在含有30.0 g/L间苯二胺与2%聚乙烯醇的溶液中浸泡10 min,经60℃真空干燥后检测试纸,检测限为1 mg/kg,检测范围为1~70 mg/kg。该方法简便、快速、准确、经济,无需仪器辅助,可用于肉制品、蔬菜制品中亚硝酸盐残留量的检测。     

驼乳中牛乳和羊乳掺假快速检测试纸条的研制

为了能在乳品检测工作中快速筛查出掺假驼乳,本研究以常见的市售驼乳为研究对象,开发了基于胶体金试纸条的驼乳快速鉴别方法,研制出针对驼乳的快速筛查胶体金试纸条,其特异性高,与磺胺类药物、氟喹诺酮类药物、四环素类药物、黄曲霉毒素M1等无交叉反应;灵敏度强,可检出驼乳中0.030%～0.050%含量的牛乳和0.30%～0.50%含量的羊乳。结果表明,该研究为驼乳快速筛查试剂盒的研制提供了技术参考。     

核酸试纸条法检测结核分枝杆菌的初步研究

本文建立了一种基于重组酶介导恒温扩增(RAA)反应的层析试纸条技术快速检测结核分枝杆菌的方法.根据结核分枝杆菌IS6110基因设计特异性引物及探针,并在引物和探针上进行生物素和FAM标记.试验先采用重组酶介导恒温扩增,扩增产物经稀释后进行试纸条层析,根据试纸条上显现的质控线和检测线读取结果,并分析该方法的灵敏度、重复性...     

化学发光微粒免疫分析法检测TP抗体的性能评价和应用

为检测TP抗体的过程中,分析化学发光微粒免疫分析法的临床应用价值.本文随机选择我院2018年3月～2020年6月在我院接受TP抗体检测的1700例患者为临床观察对象,本次参与研究的所有患者均需要同时接受梅毒螺旋体颗粒凝集试验检测以及化学发光微粒免疫分析法检测,对比两组检测结果在性能指标方面的差异性.2组患者在接受检测之...     

猪细小病毒感染与疫苗免疫猪鉴别诊断的研究

采用大肠杆菌表达的猪细小病毒非结构NS1蛋白为抗原,建立了PPV-NS1-ELISA.通过检测91份健康猪血清确定其阴、阳性界限为0.23,以传统的HI作标准,该方法有高特异性(100%)、高敏感性(88%)、高精确度(90%).批内、批间重复试验的变异系数均低于10%.该方法只与PPV感染猪的血清反应,与PPV灭活苗免疫猪的血清不反应,与猪生殖与呼吸综合症病毒(PRRSV)、伪狂犬病毒(PRV)、口蹄疫病毒(FMDV)、弓形虫(Toxoplasma)、衣原体(Chlamydia)、胸膜肺炎(APP)阳性血清无交叉反应.证明PPV-NS1-ELISA检测方法能够区分PPV感染猪和灭活苗免疫猪.     

酶联免疫法检测动物组织中磺胺嘧啶残留方法的建立

为了建立具有我国自主知识产权的快速检测农兽药残留的试剂以及相关的试剂盒,利用已有的科研资源,建立了快速检测磺胺嘧啶残留的酶联免疫检测法和试剂盒,其实验结果为除磺胺嘧啶外,与其他异构嘧啶类的交叉反应率约10%,与克伦特罗、氯霉素、四环素等其他药物无交叉反应,方法的特异性较好;方法的灵敏度为0.3ng/ml,定量直线范围为0.1-8.1ng/ml;样品经预处理,其检测时间约需5h;方法的回收率约60%以上;方法标准工作曲线的重复性试验的相关系数r2=0.92.同时,检测10份农兽药残留监控鸡肝样品,测定结果与理化方法HPLC结果有一定的趋同性.     

猪流行性腹泻病毒套式RT—PCR检测方法的建立及初步应用

[目的] 建立PEDV的新型套式RT-PCR检测方法,为该病的诊断和流行病学研究提供更为敏感和可靠的手段.[方法] 根据Genbank已发表的猪流行性腹泻病毒(PEDV)N蛋白的基因序列,设计合成两对引物,在优化RT-PCR反应条件的基础上,建立了检测PEDV的新型套式RT-PCR方法,并用该方法对PEDV进行了快速诊断和分析.[结果] 外引物扩增目的片段长度为1328bp,内引物扩增目的片段为540bp.[结论] 该套式RT-PCR方法比普通RT-PCR更加灵敏、可靠,可用于PEDV的快速诊断和流行病学调查.     

酶联免疫吸附试验和电化学发光免疫法检测孕妇乙型肝炎表面抗原结果的比较

为分析酶联免疫吸附试验和电化学发光免疫法,检测孕妇乙型肝炎表面抗原结果.本文选取在2018年5月—2020年5月期间于我院产前健康保健3600例活产儿分娩孕妇,收集孕妇人口学特征,采集血清标本进行酶联免疫吸附试验和电化学发光免疫法检测乙型肝炎表面抗原标志物,分析其检出率.结果显示酶联免疫吸附法检测乙型肝炎表面抗原阳性率...