酶解液相色谱法检测硫酸软骨素含量及物种来源鉴定

本文建立了硫酸软骨素含量测定方法及不同物种来源的硫酸软骨素的鉴定方法。用酶解法将硫酸软骨素A、C、B酶解成二糖组分Di-4S,Di-6S和Di-0S,以去离子水和氯化钠溶液为流动相,在波长232 nm处采用阴离子交换柱Hypersil-SAX（ID 4.6 mm×250 mm）的高效液相色谱法同时检测硫酸软骨素A、B、C对应的二糖组分,硫酸软骨素的总量由3者含量相加而得。比较硫酸软骨素A、C的二糖组分Di-4S,Di-6S的峰面积比值,可确定硫酸软骨素的来源。硫酸软骨素在5000~15000μg/mL浓度范围内线性关系良好（r=0.9992）,平均回收率为99.98%,RSD为1.86%。本方法能够较好地实现对鲨鱼、牛、鸡或者猪来源的硫酸软骨素溯源问题。     

菲律宾蛤仔蛋白酶解物的抗氧化活性研究

本文研究了5种酶解方式制备的菲律宾蛤仔蛋白酶解液的抗氧化活性,结果表明风味蛋白酶和复合蛋白酶两种酶组合的酶解方式抗氧化活性最高,其羟自由基和[DPPH·]自由基清除率分别为(73.08±1.17)%和(35.18±1.10)%;进一步对该双酶酶解方式进行工艺优化,得到最优酶解工艺条件为:底物浓度1∶3、加酶量1%、酶解时间4 h,在此条件下,蛤蛋白酶解液DPPH自由基清除率为42.68±2.90%。     

中性蛋白酶酶解红岛蛤蜊工艺研究

以红岛蛤蜊为研究对象,以酶解液中氨基态氮含量为指标,比较了3种蛋白酶的酶解效果,结果表明中性蛋白酶的酶解效果最佳。在此基础上,研究了中性蛋白酶添加量、酶解温度、酶解时间3因素对红岛蛤蜊酶解程度的影响。通过单因素试验及正交试验确定了中性蛋白酶酶解红岛蛤蜊的最优条件为:加酶量1.25%,酶解温度为55℃,酶解时间为3 h。在此条件下,酶解液中氨基态氮含量为1.094 g/100 g。感官评定结果表明:此酶解液透明度高,腥味较小,风味良好。     

槲叶中膳食纤维的提取

以槲叶为原料,采用超声辅助酶碱法提取槲叶可溶性膳食纤维,通过超声酶解过程的单因素及正交试验,确定其最佳提取工艺;在超声酶解过程最佳提取条件下,通过碱解过程的单因素及正交试验,得到碱解过程的最佳提取条件。结果表明,超声酶解过程最佳提取工艺为料液比1∶20、超声时间6 min、酶添加量1.5%、酶解时间60 min;碱解过程最佳提取条件为料液比1∶35、碱液浓度0.5%、碱解温度70℃、碱解时间90 min。在此条件下,槲叶可溶性膳食纤维提取率可达27.93%。     

酶法制备番茄速溶纤维粉的工艺研究

以番茄皮为原料,对番茄纤维粉的制备工艺进行研究。利用生物酶法及超微粉碎技术制备速溶番茄粉,通过单因素实验和正交实验确定了番茄粉提取的最佳工艺。最佳工艺条件为:蛋白酶添加量0.7%,料液比1∶20,酶解温度70℃,pH 7,酶解时间2 h,在此条件下,番茄粉提取率可达74.32%。制得的番茄粉持水力和膨胀性分别为1.307 8 g·g-1和4.467 5 mL·g-1,速溶性较好,色泽呈微红色,符合国家标准。     

鱼骨中提取硫酸软骨素的研究

本文选用鱼骨为原料,通过酶法提取工艺对硫酸软骨素进行分离和提取,主要分析了酶质量浓度、pH值和乙醇体积分数对硫酸软骨素提取率的影响。     

新型抗氧化乳清发酵饮料的研制

本实验以干酪副产物——乳清为原材料,加入保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌、干酪乳杆菌三种菌进行发酵,添加调味料后调制成具有抗氧化作用的发酵饮料。对原料进行处理后,以DPPH.清除率为指标,对干酪乳杆菌浓度、发酵时间、发酵温度、乳清浓度进行单因素实验,再通过正交试验获得抗氧化活性最高的发酵乳清的最佳工艺条件,实验结果得到最佳发酵条件：干酪乳杆菌浓度为4%,发酵时间为8h,乳清底物浓度为10%,发酵温度为41℃。获得具有抗氧化功能的发酵乳清饮料,其口感、色泽和组织状态好,营养价值高。     

罗非鱼下脚料酶解制备降血糖肽的工艺研究

研究以罗非鱼加工下脚料为原料制备降血糖肽的工艺。从5种常用蛋白酶(胃蛋白酶、胰蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶和木瓜蛋白酶)中筛选出了碱性蛋白酶作为目标酶;之后通过单因素试验和正交试验对碱性蛋白酶水解工艺进行优化,得到最适酶解条件:温度50℃、加酶量1 000 U·g~(-1)、pH9.5、底物浓度6%,此工艺条件下水解度和α-葡萄糖苷酶抑制率分别达到28.19%和30.12%。     

负载硫酸软素的海藻酸钠纳米颗粒的制备

本文采用静电喷射法制备负载硫酸软骨素的海藻酸钠纳米颗粒。通过场发射扫描电子显微镜(ESEM)、傅立叶红外光谱仪和马尔文纳米粒度电位仪(Zetasizer Nano ZS),分别对所制得的颗粒的形态、结构和粒径进行了表征。用紫外-可见分光光度仪表征了负载硫酸软骨素的海藻酸钠纳米颗粒的缓释情况。结果表明:海藻酸钠与硫酸软骨素的质量比、海藻酸钠的浓度、搅拌速度和CaCl_2的浓度等对海藻酸钠纳米颗粒的粒径有显著影响。当转速为900 r·min~(-1),氯化钙溶液浓度为0.9%,海藻酸钠水溶液浓度为2%,流速为0.6 mL·h~(-1),电压为27 kV时,可得到粒径为262.3 nm的海藻酸钠/硫酸软骨素微粒,该微粒中的硫酸软骨素具有很好的缓释性能。     

酶处理对野生猕猴桃出汁率影响

目的:探讨酶处理对猕猴桃出汁率和总糖含量的影响。方法:在单因素试验基础上,采用正交试验设计,优化酶解工艺参数,分析了酶解前后出汁率和总糖含量的变化。结果:最佳酶处理条件为纤维素酶添加量0.3 g·L~(-1),果胶酶添加量0.15%,酶解温度45℃,酶解时间1.5 h。此条件下野生猕猴桃出汁率为80.39%,总糖含量为7.84%。结论:通过试验获得了适合生产果汁、果酒、果醋的野生猕猴桃汁。     

响应面法优化柚皮苷酶对橘红的脱苦工艺

采用柚苷酶对橘红进行脱苦研究。以橘红脱苦率为指标,在单因素试验的基础上,采用响应面法优化柚皮苷酶对橘红的脱苦工艺,确定最佳脱苦条件为:酶解温度60℃、酶解时间2 h、酶用量为0.8%、pH值为4～5,在此条件下脱苦率可达25.1%。     

酶解法制备巴旦木蛋白肽及蛋白肽米粉的开发

以巴旦木粕为原料,采用六号溶剂脱脂并用碱提酸沉法得到巴旦木蛋白短肽,并研究蛋白肽米粉的最佳工艺条件。利用酶解法以酶在不同温度、p H值、酶解时间、添加酶量等为考察指标通过单因素和正交实验确定最佳提取工艺为:酶解温度为40℃,p H值为8,酶的添加量为0.4%,时间3 h。通过感官评分标准确定蛋白肽米粉的最佳配方为:蛋白肽粉加量40%,酶解米粉30%,糖10%,乳清蛋白粉20%。     

鳄鱼肉多肽的抗氧化性研究

鳄鱼肉中含有丰富的蛋白质资源,充分利用,形成富含羟脯氨酸的鳄鱼肉多肽。采用8%的碱性蛋白酶对鳄鱼肉进行酶解制备鳄鱼肉多肽,考察酶解时间和相对分子质量对其抗氧化活性的影响。结果显示,酶解2 h、鳄鱼肽相对分子质量为2 200时,鳄鱼肽对自由基DPPH、OH和超氧阴离子自由基的清除能力最强,可达到85.4%。这说明,对相对分子质量的范围和酶解时间的有效控制,不仅提高了鳄鱼肉多肽的抗氧化性,还有效保持鳄鱼肉多肽的生物活性和功能性成分(8.86%羟脯氨酸,多肽∶鳄鱼肉蛋白含量为4∶5),为鳄鱼肉多肽功能性产品开发提供理论基础。     

外源氨基酸酶促修饰对波纹巴非蛤酶解肽抗氧化活性的影响

本研究以波纹巴非蛤酶解液为研究对象,利用类蛋白反应的机理,通过添加外源氨基酸,以游离氨基酸减少量、DPPH自由基清除率、羟自由基清除率为指标,进行工艺条件优化,得到如下结果:(1)酶促修饰反应的最优蛋白酶为木瓜蛋白酶,最佳外源氨基酸为混合比为3∶7的半胱氨酸与赖氨酸。(2)底物浓度40%、p H 5.0、反应时间3 h、加酶量3 800 U/g、混合氨基酸添加总量0.56 g/g、反应温度34℃为最优反应条件。(3)以优化后的条件进行验证实验,得到游离氨基酸减少量为(24.05±0.24)mg/m L,DPPH自由基清除率为(90.24±0.46)%,羟自由基清除率为(50.44±0.07)%,与预测值基本吻合。(4)酶促胁迫修饰反应后产物的抗氧化活性显著提高,而HPSEC结果显示反应前后产物Mr5 000 Da的占比并没有明显提升。研究结果表明,外源氨基酸酶促修饰可提高波纹巴非蛤酶解肽的抗氧化活性,具有一定的开发利用价值。     

硫酸软骨素裂解酶产生菌的筛选及特性研究

分离硫酸软骨素裂解酶产生菌及克隆其编码基因是研究其酶学性质及最终实现低分子量硫酸软骨素高质高效生产的重要研究基础。本文利用透明圈法从白鲢鱼鱼腹中分离筛选出产硫酸软骨素裂解酶的S6菌株,经16srRNA序列分析,初步鉴定为气单胞菌,同时研究了该菌株的生长曲线和对抗生素的耐药性,为后续针对S_6菌株次级代谢产物的研究奠定基础。     

浒苔蛋白酶法改性提高原料抗氧化性能工艺优化

以浒苔粉为原料制成浒苔蛋白溶液,采用定向酶解技术改性浒苔蛋白,通过碱性蛋白酶处理的方式,基于单因素,浒苔蛋白酶解产物的还原力为指标,采用二次通用旋转组合试验设计方案,优化碱性蛋白酶酶解改性浒苔蛋白关键工艺条件。结果表明,控制浒苔粉溶液的料液比为1:30,经优化后的碱性蛋白酶酶解改性浒苔蛋白关键工艺参数组合为:碱性蛋白酶使用量为600 U/g浒苔粉,调节酶解液pH为8.0,在50℃下水浴提取时间为90 min,以此工艺条件组合结合其他单因素条件进行验证性扩大试验,改性后的酶解液中的浒苔蛋白酶解液的还原力最高,为0.792。     

双酶分段水解制备芸豆肽方法研究

本文主要研究以芸豆蛋白为底物,分别用木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、复合蛋白酶、胰蛋白酶和碱性蛋白酶在一定条件下进行酶解,以蛋白的水解度、抗氧化能力、对超氧阴离子的捕获能力为指标,选出3种最优酶。对3种酶进行复配,得到6种双酶组合,通过试验确定最佳的双酶水解组合。结果表明:碱性蛋白酶、胰蛋白酶和木瓜蛋白酶的酶解液具有较高的水解度、超氧阴离子清除率、抑制脂质过氧化的能力。双酶最佳组合为胰蛋白酶+碱性蛋白酶,水解度、超氧根清除率、抑制脂质过氧化的能力依次可达43.28%、37.27%、38.63%。可为后续的水解因素及水解工艺参数研究提供依据。     

南瓜籽壳纳米纤维素制备工艺研究

以南瓜籽壳为原料,采用硫酸水解法制备南瓜籽壳纳米纤维素。以南瓜籽壳纤维素提取率为指标,以酸解温度、硫酸质量分数、酸解时间和料液比为单因素,考察各因素对南瓜籽可纳米纤维素提取的影响条件,在此基础上设计正交试验优化南瓜籽壳纳米纤维素提取的最佳工艺。结果表明:酸解温度45℃,硫酸质量分数62%,酸解时间110 min,料液比12∶1时,南瓜籽壳纳米纤维素提取率为30.10%。     

多菌种混合发酵制备活菌型荸荠汁的关键技术

以荸荠为原料,利用保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌混合菌种对荸荠汁进行乳酸菌发酵,制备活菌型荸荠汁饮料。通过单因素实验和正交实验对荸荠护色、糖化、发酵工艺和配方进行了优化。研究表明:荸荠漂烫最佳工艺为时间80 s、温度70℃、柠檬酸浓度0.5%;荸荠糖化最佳工艺为时间80 min、温度70℃、酶量30 U/m L、pH7;荸荠发酵最佳工艺为时间30 h、温度42℃、接种量5%、乳清粉添加量6%;配方为每100 g荸荠汁乳酸菌发酵液添加8 g白砂糖、0.5 g柠檬酸钠、0.02 g黄原胶。     

响应面法优化超声波-酶法提取紫色花椰菜原花青素

以紫色花椰菜为原料,利用响应面法优化纤维素酶辅助超声波法提取原花青素工艺。考察加酶量、超声波功率、超声波时间对紫色花椰菜原花青素提取率为响应值。通过建立紫色花椰菜原花青素提取率的二次回归方程,得出最佳提取工艺为加酶量2.08%、酶解温度50℃、超声波功率316.63 W、酶解时间40 min、超声波时间25.86 min条件下,紫色花椰菜原花青素提取率最大,最大值14.36%。超声波辅助酶法提取紫色花椰菜原花青素具有耗时短、提取物纯度高,对原花青素破坏小等特点,为进一步综合利用紫色花椰菜提供了更好的依据。