食源性致病微生物中应用于PCR检测的靶基因

介绍了8种常见食源性微生物致病性大肠埃希菌、沙门菌、金黄色葡萄球菌、副溶血弧菌、霍乱弧菌、单核细胞增生李斯特菌、肉毒梭菌、产气荚膜梭菌的PCR法检测中常用的靶基因,主要是一些编码特征毒素和其他的毒力因子的基因.     

法国食品微生物实验室能力测试

食品微生物的实验室能力测试计划(简称RAEMA),始创于1988年,至今有440个实验室参加.涉及检测范围包括沙门氏菌、单增李斯特菌的定性检测及需氧微生物、肠道菌、类大肠菌、大肠埃希氏菌、产气荚膜梭菌、革兰氏阳性葡萄球菌、单增李斯特菌的定量检测.该计划每年实施2次,每次5个样品分发给各参加实验室,以验证各实验室对微生物检测、计数的准确度和精密度方面的能力.结果显示食品微生物实验室无论在质量保证体系方面还是在标准及确证分析方法的使用方面均有很大提高,而且获得有问题和不满意结果的实验室的百分率却保持相对恒定.     

对GB 8538-216《食品安全国家标准饮用天然矿泉水检验方法》中产气荚膜梭菌检验的研究与改进

以中国检科院测试评价中心(ACAS)组织的矿泉水中产气荚膜梭菌的检测能力验证、测量审核为例,实验检验使用标准GB 8538-2016《食品安全国家标准饮用天然矿泉水检验方法》,实验过程滤膜上的菌落在亚硫酸盐-多粘菌素-磺胺嘧啶琼脂(SPS)经24 h厌氧环境培养后黑色菌落不明显,甚至不生长黑色菌落影响后续确认性实验,以及确证性实验中含铁牛乳培养基"暴烈发酵"实验现象不明显,针对此现象进行研究与改进。     

冷冻与检验程序对碎牛肉中细菌的影响

为了测定冷冻对碎牛肉中细菌的影响,曾对55个样品经干冰冻结(-70℃)2天(TR_2),随后移到实验室冰箱内(-20℃)继续冻结4天(TR_3)和11天(TR_4)。然后通过平板计数培养(APC,35℃),检测大肠杆菌(Coiform)、埃希氏大肠杆菌(E.Coli)、血清凝固酶阳性金黄色葡萄球菌(S.aureus)和产气荚膜梭状芽胞杆菌(C.perfingrens)的存活菌数。产气荚膜梭状芽胞杆菌在使用干冰冷冻(-70℃)2天后就有明显的减少,移置冰箱内继续冷冻(-20℃)4天和11天后持续下降。金黄色葡萄球菌在同样冷冻程序中,在第11天(TR_4)才有明显减少。冷冻处理后需氧菌总数(APC值)的减少没有实践意义。对35个相同的样品进行了统计学分析,减少了实验误差、估计标准误差和样品误差的值,指出了计数过程中满意的精确度。     

青岛市售酸奶中乳酸菌的分离鉴定及耐药性研究

采用平板涂布、划线及革兰氏染色法,从青岛市售酸奶中分离到4种乳酸菌,对其进行了生物学特性研究及生理生化试验。结果表明,4种菌均能利用葡萄糖及乳糖产酸不产气,过氧化氢酶试验阴性,不液化明胶,不水解淀粉;结合《伯杰细菌鉴定手册》初步鉴定4种菌分别是保加利亚乳杆菌、双歧杆菌、嗜热链球菌、乳酸乳球菌。对4种乳酸菌进行抗生素耐药性试验,抑菌圈直径测量结果表明4种乳酸菌对氨苄西林、四环素、氯霉素、头孢唑啉普遍敏感,对青霉素、庆大霉素、链霉素部分敏感,对环丙沙星、万古霉素、卡那霉素存在普遍耐药性。     

苏云金芽孢杆菌的鉴定

为了探索苏云金芽孢杆菌的鉴定方法,可利用传统的生化试验结合全自动生化分析仪和基因指纹分析系统来检测,并简单分析每种方法的优劣性。传统的生化试验耗时比较长,利用VITECK-2-compact或者Ribo Printer系统进行鉴定,耗时较短,需要补充革兰氏染色镜检和蛋白毒素结晶试验才可以鉴定。     

镇远陈年道菜的制作工艺及乳酸菌的分离与鉴定

镇远陈年道菜是黔菜中著名的腌菜制品,使用食用盐和棒菜作为原料进行发酵。本文通过对发酵前期样品中乳酸菌进行分离和鉴定,共分离得到2株菌株,通过对菌落形态、微生物个体形态、生化特性的鉴定,所得菌株分别为坚强芽孢杆菌(Bacillus firmus)和凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)。     

甲鱼嗜水气单胞菌的分离与鉴定

从广西凭祥市浦寨边贸点截获偷运入境的东南亚某国甲鱼发现以甲部出血糜烂,继而脱落而呈火山口样病变.经实验室检验分离出一株细菌,生理生化符合气单胞菌特性,能发酵葡萄糖产酸产气并水解七叶苷,定为嗜水气单胞菌.该菌株对小白鼠有很强的毒力,能在24小时内将其致死,将该菌回归甲鱼可复制出类似于上述病变的疾病.该菌对氯霉素、痢特灵等多种抗生素敏感.     

菌落粗糙型大肠杆菌的分离与鉴定

[目的]从内蒙古某地区的大豆蛋白中分离到了一株菌落粗糙型大肠杆菌,对该菌进行鉴定.[方法]通过生理生化试验.[结果]与常见的典型大肠杆菌相比,该菌有其独特之处在固体培养基中,菌落干燥、扁平、表面粗糙;在液体培养基中,上清液清亮并有颗粒状沉淀,摇动沉淀不能完全散开.除此之外,该菌的其它特性均符合典型大肠杆菌的特征.[结论]该菌为菌落变异(由光滑型转变为粗糙型)的大肠杆菌.     

化妆品中铜绿假单胞菌检验方法探讨

[目的]对4种鉴定方法进行比较分析,以找出适合于化妆品绿脓杆菌检验的准确快速的鉴定方法。[方法]同时采用微量生化管、API 20NE试验条、VITEK-32和VITEK2 COMPACT微生物鉴定仪4种方法对不同类型的出口化妆品进行铜绿假单胞菌的检验、鉴定。[结果]5株可疑绿脓杆菌中有1株经手工鉴定为非绿脓杆菌,经API 20NE试验条鉴定得出结果是恶臭假单胞菌,而VITEK-32和VITEK2 COMPACT微生物仪器鉴定是铜绿假单胞菌;其余4株用4种方法鉴定,结果均为绿脓杆菌。[结论]在鉴定可疑绿脓杆菌时,手工生化方法只能得出是或否的结论;API 20NE试验条可得出具体的种属名称及鉴定分析;VITEK微生物仪器则可能出现误判。     

连续泡沫排水采气在大牛地气田东区气井生产中的应用

大牛地气田东区气并具有低渗、低产气,普遍产水的特点,在138口生产井中,产气量低于1万方/天的井占总井数的76%,气井渗透率低于0.5×10-3μ㎡,单井平均产水高于1.0m3/d.由于气井产量低,携液能力弱,造成井筒积液严重,气井油套压差在3-8MPa之间,部分气井因井口压力低于进站压力而无法生产.通过11口井连续泡排的试验,有效解决了东区气井井筒积液严重的问题.     

FEPAS水平测试中两种致病菌的分离与鉴定

[目的]通过积极参加国际实验室间的技术交流,提高食品微生物检测水平、验证实验室检测能力.[方法]本文对2002年5月至2003年6月广州检验检疫局食品检测中心参加的英国中心科学实验室(CSL)食品微生物学能力验证计划(FEPAS),采用传统生化鉴定与API20E细菌编码鉴定系统相结合的鉴定方法,对沙门氏菌、副溶性弧菌进行分离鉴定.[结果]采用本文方法能准确鉴定出测试样品中的沙门氏菌、副溶性弧菌,水平测试取得满意结果.[结论]通过参加水平测试,表明广州检验检疫局食品检测中心食品微生物检测能力满足FEPAS要求,达到国家水平.     

Excel在细菌生化筛选和鉴定系统中的应用

使用Excel编制了细菌筛选和鉴定系统（Bacterial Screening and Identification System,BaSIS）,该系统以《伯杰氏细菌鉴定手册》、《伯杰氏细菌系统手册》和其他商业化鉴定系统等为参考基础,确定了58个属288个分类单元,是目前包括细菌种类最多的手工生化鉴定系统,所选用的20项生化项目可任意组合,在缺失某些项目的情况下,也可进行初步判别。该系统可方便实验室日常检测,节约成本,简化工作,并为细菌鉴定和筛选系统的进一步的完善奠定了基础。     

枸橼酸杆菌属的一个新种及其研究

从待出口冻兔肉中检出一株疑似枸橼酸杆菌新种的细菌,对其进行相关种属的鉴定研究,以确定该菌分类地位.采用伯杰氏系统细菌学手册细菌分类鉴定方法及分子生物学手段,对该菌进行培养特性、生化反应、血清凝集、噬菌体裂解、PCR鉴定和16SrRNA基因测序等研究.结果显示该菌与沙门氏菌O65诊断血清有单边交叉凝集,其O和H抗血清效价高,但与所有沙门氏菌代表株不凝集.噬菌体裂解试验证实该菌为枸橼酸杆菌,PCR阴性试验证实该菌非沙门氏菌.该菌生化反应符合枸橼酸杆菌属定义,但与已知¨种枸橼酸杆菌均有明显不同.同时,16S rRNA基因测序结果表明该菌与已知枸橼酸杆菌基因种(genomospecies)不同.所以,该菌为枸橼酸杆菌属的新种,暂名为滨州枸橼酸杆菌(Citrobacterbinzhou)简写为C.binzhou.     

蜡样芽胞杆菌鉴定方法研究

本文研究蜡样芽胞杆菌的鉴定方法,以降低假阳性率和假阴性率。通过GB4789.14、VITEK2Compact、API 50 CHB检测法及Riboprinter核糖体分型方法进行鉴定实验。结果显示只有根状实验和蛋白质毒素结晶实验能有效鉴别实验中的4种菌。可以从4种方法选取一种结合有效的生化实验鉴定蜡样芽胞杆菌。     

鳄鱼肠中一株乳酸菌分离鉴定及活性物质的初步分析

利用含有0.3%CaCO_3的MRS分离培养基,从鳄鱼肠道分离得到1株产酸能力强的菌株,命名E02,通过形态观察,并进行生理生化特征分析,初步鉴定为乳杆菌。以大肠杆菌、副溶血性弧菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、单核细胞增生李斯特菌和黑曲霉作为指示菌,采用牛津杯双层平板法测其发酵产物抑菌活性。通过用乳酸调节与原发酵液相同pH的MRS液体培养基,并与原发酵液作抑菌活性对比,进行抑菌活性物质初步分析。实验结果表明,菌株E02发酵产物的抑菌物质主要是酸,只有少部分是其他活性物质。     

陕北传统米酒曲中优势菌种的分离、纯化及鉴定

为进一步提高陕北传统米酒的质量,保持或改善其风味,本研究对陕北传统米酒酒曲中的微生物进行分离、纯化、鉴定,并分析了微生物的数量分布。根据培养特性、菌体形态及生理生化检测进行菌种鉴定,得到24个不同属、种的微生物菌株;活菌计数结果显示霉菌和酵母菌为酒曲中的优势菌种,分别占总菌数的57%和38%。将分离所得微生物中17个种的优势菌株进行纯种培养,其中霉菌8株,酵母菌9株。并对8株霉菌所产生的α-淀粉酶和糖化酶活力进行比较研究,结果显示米根霉（Rhizopus oryzae）,华根霉（Rhizopus chinensis）,米曲霉（Aspergillus oryzae）相比另外5株霉菌表现出较高的酶活力,其α-淀粉酶活力分别为798U/g,672U/g,701U/g;糖化酶活力分别为2641U/g,2321U/g,2538U/g,可作为生产米酒的理想菌种。     

小议杂交育种的方式及方法

杂交通常指不同树种或同一树种不同品种或类型间的交配.根据杂交亲本双方亲缘关系的远近,可分为种内杂交、种间杂交和属间杂交.种内杂交,即同一树种不同品种、类型间的杂交,称近缘杂交;种间和属间杂交,称远缘杂交.在林木育种中常指后者.杂交育种是通过杂交,取得杂种,对杂种鉴定和选择,以获得优良品种的过程.为达到杂交育种的预期目的,取得杂种只是工作的第一步.因此,杂种实质上只是选择的原始材料.原始材料必须经过鉴定和选择,最后才有可能选育出有价值的新品种.     

运用收益法评估机器设备探讨

依据<外商投资财产鉴定管理办法>,结合具体实际通过分析,选择收益现值法,对某企业的一项机器设备进行了评估和验证.     

家用电热器具火灾现场勘验及物证鉴定方法

近年来,因家用电热器具使用不当而造成人员伤亡和财产损失的火灾数目有所增加,为了提高广大群众的防火意识,并对于消防部门人员进行此类火灾原因的调查以及制定有效的防火安全措施提供依据,本文对我国近几年家用电热器具火灾现场勘验和物证鉴定方法等方面所取得的成果进行概括和总结.从家用电热器具的概念、种类入手,结合具体案例指出其引起火灾的原因,在此基础上进一步总结研究家用电热器具火灾现场勘验的步骤、内容及方法,然后对其物证鉴定方法进行概括.通过对家用电热器具火灾的现场勘验和物证鉴定方法进行分析整理,使其形成系统体系,为实际调查此类火灾提供参考.