奶粉中单增李斯特氏菌热抵制特性的研究

[目的]对奶粉中单增李斯特氏菌的热抵制特性进行研究.[方法]通过人工方法将单增李斯特氏菌按107cfu/mL的浓度分别添加于提前预热的60℃的灭菌蒸馏水、复水的原料粉和复水的高糖高脂奶粉中,在此温度下分别作用5min和10min,通过菌落计数分析单增李斯特氏茵的热抵制特性.[结果]在灭菌蒸馏水中单增李斯特氏菌衰减得最快,在复水的原料奶粉中单增李斯特氏菌衰减得较慢,而在复水的高糖高脂奶粉中单增李斯特氏菌衰减得最幔.[结论]奶粉中的单增李斯特氏菌具有热抵制特性,而且高糖高脂成分可提高单增李斯特氏菌的热抵制能力.     

干奶粉中单增李斯特氏菌的生存评估

[目的]对不同水活度干奶粉中的单增李斯特氏菌在不同温度条件下的生存特性进行评估.[方法]通过人工方法将单增李斯特氏菌按103cfu/g的浓度添加于不同水活度的干奶粉样品中,在不同温度(冰箱温度4℃和室温25℃)下贮存,通过菌落计数来分析单增李斯特氏菌的生存特性.[结果]在低温条件下,单增李斯特氏菌可在较低水活度的干奶粉中长期保持生长活力,并且当水活度较高时,会有增长趋势.在较高的环境温度中,干奶粉中的单增李斯特氏菌的生长活力很快减退,细菌处于亚损伤状态,但在适宜的营养环境条件下,这种亚损伤状态可以得到修复.细菌仍然可以恢复活力.[结论]高温条件更易使干奶粉中单增李斯特氏菌生长活力减退,干奶粉中如果污染了单增李斯特氏菌.于室温(25℃)条件下贮存会抑制单增李斯特氏菌的生长.     

复水奶粉中单增李斯特氏菌的生存评估

[目的]对复水奶粉中单增李斯特氏菌的生长与存活进行评估.[方法]通过人工方法以102cfu/mL的浓度添加单增李斯特氏菌于复水奶粉样品中,在不同温度和pH值条件下贮存,通过菌落计数分析单增李斯特氏菌的生存特性.[结果]在-1.5～37℃之间,单增李斯特氏菌能够生长,在-1.5℃时生长速率最慢,随温度升高生长速率也随之加快,在37℃时生长最快,在45℃时不能生长.在接近中性pH值范围内的复水奶粉中,单增李斯特氏菌在高温条件下(30℃)比在低温条件下(4℃)生长快,但在低温条件下(4℃),单增李斯特氏菌对酸和碱的耐受程度比在高温条件下(30℃)的耐受程度大.[结论]由于复水奶粉的pH值接近中性,比较适合单增李斯特氏菌的生长,如果污染了单增李斯特氏菌,在低温条件下贮存能够控制单增李斯特氏菌的生长.     

几种液体培养基对奶粉中单增李斯特氏菌富集效果的比较

[目的]选择适合奶粉中单增李斯特氏菌富集的液体培养基.[方法]参考ISO/TS11133-2中的培养基验证方法并有所改进,对国际上常用的5种液体培养基进行比较选择.[结果]5种液体培养基对奶粉中单增李斯特菌的增菌效果差异不显著.[结论]5种液体培养基的增菌效果基本相同.但由于BLEB的增菌过程是先用无添加剂的肉汤预增菌后再加入添加剂,Fraser肉汤的增菌过程是用含有半量添加剂的肉汤预增菌后再转入含有全量添加剂的肉汤中,这两种方法有利于使损伤的细菌得以恢复活力.对奶粉中单增李斯特氏菌进行富集,如果采用一步增菌法建议使用BLEB,如果采用两步增菌法建议采用Fraser肉汤.     

检测单增李斯特氏菌的几种选择性固体培养基的效果比较

[目的]选择更加适合单增李斯特氏菌检测的固体选择性培养基.[方法]参见ISO/TS11133-2中的培养基验证方法并有所改进,对国际上常用的3种选择性固体培养基进行比较选择.[结果]OXA和李斯特氏;显色培养基的增菌效果相近,且单增李斯特氏菌和绵羊李斯特氏菌在李斯特氏菌显色培养基上具有特征性菌落形态,易于与其他李斯特氏菌相区别.[结论]OXA和李斯特氏菌显色培养基效果较好,比较适合单增李斯特氏菌的检测,两种培养基联合使用可以提高单增李斯特氏菌的检出率.     

食品中单增李斯特氏菌PCR检测方法所用引物的特异性比较

[目的]对食品中单增李斯特氏菌PCR检测方法目前常用的引物进行特异性比较.[方法]用36株单增李斯特氏菌、非单增李斯特氏菌以及其他菌属的细菌,将我室的2对引物与其他作者设计的5对引物进行特异性比较.[结果]我室采用的引物FM1/FM2只对单增李斯特氏菌扩增出特异性片段,引物LI1/U1只对所有李斯特氏菌属的细菌扩增出特异性片段.其他引物除了对单增李斯特氏菌扩增出特异性片段外,对其他细菌也会扩增出与特异性片段大小一致的片段.[结论]单增李斯特氏菌的特异引物FM1/FM2与李斯特氏菌属的特异引物U1/LI1组合应用,可以成为检测单增李斯特氏菌的最佳方法.     

食品中单增李斯特菌国内外控制要求有哪些

<正>李斯特菌广泛分布在自然界中,在腐烂的植物、土壤、动物粪便、污水、青贮饲料和水中均可找到其踪迹。目前发现的李斯特菌菌株包括单核细胞增生李斯特菌（以下简称“单增李斯特菌”）、绵羊李斯特菌、英诺克李斯特菌、威尔斯李斯特菌、西尔李斯特菌、格氏李斯特菌、默氏李斯特菌等。其中,单增李斯特菌是唯一能引起人类疾病的李斯特菌。     

食品中阪崎肠杆菌和单增李斯特氏菌检测能力验证结果与分析

目的:验证本实验室对食品中阪崎肠杆菌和单增李斯特氏菌的检出能力。方法:按照能力验证作业指导书、《食品安全国家标准食品微生物学检验阪崎肠杆菌检验》(GB 4789.40-2010)和《食品安全国家标准食品微生物学检验单核细胞增生李斯特氏菌检验》(GB 4789.30-2010)进行检验。结果:样品14-P346检出阪崎肠杆菌,样品14-T795检出单核细胞增生李斯特氏菌。结论:组织者对本实验室此次能力验证实验结果评价满意,说明本实验室同时具有阪崎肠杆菌和单核细胞增生李斯特氏菌的检测能力。     

单增李斯特菌及其表面蛋白的研究进展

单增李斯特菌是条件致病菌，由其引起的疾病称为李斯特菌病。单增李斯特菌的致病性由几个毒力因子所决定，这些毒力因子包括李斯特细胞溶菌酶O、蛋白ActA、磷酸脂酶C、内化素（InlA和InlB）、蛋白CwhA和金属蛋白酶。该菌能够侵染多种真核细胞并在其中复制、增殖，也能够穿越宿主的三个主要屏障——肠屏障、血脑屏障和胎盘屏障。与其他G^＋菌不同，单增李斯特菌的大量蛋白是共价结合到其胞壁质上的。实际上，由于单增李斯特菌存在大量表面蛋白，所以它能够在许多环境下复制增殖，并且能够侵染多种真核细胞。     

单增李斯特菌选择性增菌培养和分离方法的比较研究

首先对改良的FDA法、NGFIS法、SN法和国标法4种李斯特菌选择性增菌和分离方法进行比较,结果表明对于人工污染的样品(生猪肉、虾、牛奶),各种增菌方法的检测灵敏度都较高,均能检出样品中<10CFU/g的单增李斯特菌;但对于不同自然样品(生猪肉、调理食品、虾和牛奶)的李斯特菌检出,则以改良的FDA法最佳.本项目设计了英诺克李斯特菌和单增李斯特菌的竞争性试验,明确当样品中含有英诺克李斯特菌时,增菌时间应缩短.     

应用荧光PCR方法检测食品中的单核细胞增生李斯特氏菌

[目的]发展一种快速、敏感、特异的荧光PCR方法检测食品中单核细胞增生李斯特氏菌.[方法]针对单增李斯特氏菌溶血素基因(hly A),设计特异的引物和TaqMan探针,优化体系,建立荧光PCR检测方法,对该方法的特异性和敏感性进行评价,并且在对188个进出口食品样本的检测中与传统方法进行对比.[结果]经对20株不同菌属的标准菌株和30株野生李斯特氏菌菌株检测,结果显示该方法具有良好的特异性.灵敏度检测结果表明,经过24h增菌,该方法的检测低限为1cfu/g,整个流程只需27h.在实际样本的检测中,检测结果与传统方法结果一致.[结论]该方法能快速、简便和准确地检出单核细胞增生李斯氏菌,具有良好的应用前景.     

法国食品微生物实验室能力测试

食品微生物的实验室能力测试计划(简称RAEMA),始创于1988年,至今有440个实验室参加.涉及检测范围包括沙门氏菌、单增李斯特菌的定性检测及需氧微生物、肠道菌、类大肠菌、大肠埃希氏菌、产气荚膜梭菌、革兰氏阳性葡萄球菌、单增李斯特菌的定量检测.该计划每年实施2次,每次5个样品分发给各参加实验室,以验证各实验室对微生物检测、计数的准确度和精密度方面的能力.结果显示食品微生物实验室无论在质量保证体系方面还是在标准及确证分析方法的使用方面均有很大提高,而且获得有问题和不满意结果的实验室的百分率却保持相对恒定.     

食品中单增李斯特菌快速、敏感、特异PCR检测方法的建立

[目的]建立食品中单增李斯特菌的PCR检测方法.[方法]根据单增李斯特菌的hlyA基因和李斯特菌属的16sRNA基因各设计了一对引物,两对引物组合建立PCR方法,用人工污染食品对该方法进行验证,于37℃经24h预增菌和24h增菌后直接进行PCR分析.[结果]在消毒奶、冰淇淋、酸奶、奶酪、熟肉和香肠等即食食品中单增李斯特菌的检出限为1cfu/25g(mL),在原奶和生肉中的检出限分别为1～10 cfu/25mL和25 cfu/25g.[结论]该方法快速、敏感、特异,适合不同类型食品的常规检测分析,可用于食品工业中单增李斯特菌的检测.     

单增李斯特菌比对试验结果与分析

1 前言 单核细胞增生李斯特菌（Listeria monocytogenes．L．M）（以下简称单增李斯特菌）是一种人畜共患病的病原菌，它广泛存在于自然界中，猪、牛、羊、禽类等动物都可感染发病。人们食用的肉、奶、蛋、水产品和蔬菜等容易受到该菌污染。世界卫生组织（WHO）指出：30％以上肉制品，15％以上的禽产品，5％～10％的奶及奶制品，4％～8％的水产品受到该菌不同程度的污染。国外常有由单增李斯特菌引起的群发性食物中毒，因此不少国家和地区将其与沙门氏菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌共列为主要的食源性致病菌，并作为食品卫生微生物检验中的常规检验项目。     

用免疫磁珠捕集法快速检测食品中的单核细胞增生李斯特菌

本文研究了用免疫磁珠捕集法(ListerTest)检测食品中单增李氏菌的可行性.结果显示ListerTest对25株李斯特菌和9株于扰菌的检测结果与实际相符;对增菌液和样品中单增李氏菌1/2a、1/2b、英诺克李斯特菌、绵羊李斯特菌的检测低限均达到甚至超过了传统方法;检测结果基本不受干扰菌影响.用ListerTest和SN方法同时检测了自然样品200份,分别检出阳性样品16份和13份,经X2检验,两者无显著性差异.用ListerTest检测食品中的单增李氏菌特异性好、灵敏度高、简便快速、方法便于灵活掌握.     

食品中单核细胞增生李斯特氏菌检出能力验证结果与分析

为了提升单核细胞增生李斯特氏菌检测能力,本实验室参加了弗帕斯(FAPAS)分析实验室能力验证机构组织的实验室能力验证。结果表明,编号为M228d02A的样品检出单核细胞增生李斯特氏菌,M228d02B未检出单核细胞增生李斯特氏菌。2个样品检验结果均取得优秀等级。     

检测致病性李斯特氏菌的培养基

要检出单核增生李斯特氏菌,前增菌和分离是非常重要的步骤。本文概述了李斯特氏菌选择性增菌肉汤和选择性显色培养基的种类和设计原理,对它们的应用效果进行了讨论。     

食品中单核细胞增生李斯特氏菌的检验探讨

本文概述了食品中单核细胞增生李斯特氏菌的检验方法,并对增菌、二次增菌、分离培养和生化实验的注意事项提出见解,为准确地检验食品中单核细胞增生李斯特氏菌提供参考。     

应用PCR技术同步检测动物产品中的4种致病菌

本研究根据沙门氏菌、单增李斯特菌、大肠杆菌O157H7及空肠弯曲菌的不同培养特性,将单一PCR及复合PCR的方法相结合,设计合成了4种针对性的引物,通过检测4种菌不同的特异性基因片段,建立了一种同步检测的PCR方法,具有简便、快速、准确的特点.对95份实物样品检测,结果与经典方法一致,有较好的应用价值.     

利用IMS／PCR方法快速检测食品中单增李斯特菌

研究用免疫磁珠(1mmunomagnetic separation,IMS)和复合PCR(multiplex-PCR)联用方法,从样品中直接浓缩获取单增李斯特菌(Listeria monocytogenes).针对L.monocytogenes的Listeriolysin O基因和李斯特菌属的23S rRNA设计两对特异性引物,作为Polymerase Chain Reaction(PCR)的靶基因,经PCR反应分别得到700bp和240bp.用IMS/PCR方法和SN方法同时检测了样品162份,结果通过API方法确证,符合率达到100%.结果表明,本文建立的IMS/PCR方法较常规方法简便、快速、灵敏度高,灵敏度可达1.5CFU/mL,在24h可快速检出L.monocytogenes,有很好的应用前景和研究价值.