青蒿素通过RAI14抑制脂多糖诱导的肺上皮细胞炎症效应

目的:研究青蒿素对脂多糖(LPS)诱导肺泡上皮细胞炎性损伤的保护作用及其相关分子机制。方法:采用LPS(100 mg·L~(-1))刺激,建立肺腺癌上皮细胞系A549炎性损伤模型,给予青蒿素(20μM)预处理,研究青蒿素的抗肺细胞炎症效应。实时定量RT-PCR技术检测炎性信号RAI14蛋白及炎性因子IL-1β,IL-6和TNF-α的mRNA表达变化;免疫印迹分析脂多糖对RAI14蛋白水平的影响,并结合RAI14的小干扰RNA处理,揭示RAI14分子在LPS诱导肺炎症反应中的作用。结果:LPS诱导了肺上皮细胞RAI14的mRNA水平和蛋白含量的显著增加(P0.05),且下调其表达能有效抑制LPS引起的炎症因子IL-1β,IL-6和TNF-α的mRNA水平升高(P0.05)。给予青蒿素预处理,能显著下调LPS诱导的肺细胞RAI14的mRNA和蛋白水平升高(P0.05),发挥抑制LPS诱导肺上皮细胞炎性反应的作用。结论:RAI14作为新识别的炎性信号分子,参与了LPS诱导的肺上皮细胞炎症反应。青蒿素能通过下调肺细胞RAI14基因表达,抑制LPS诱导的炎症反应。     

阿魏酸钠对抗结核药物致大鼠肝损伤的保护作用及其机制研究

为探讨阿魏酸钠(SF)对抗结核药物肝损伤的保护作用机制,文章将60只SD雄性大鼠随机分为6组,即对照组、模型组(异烟肼+利福平)、SF低、中、高剂量组(30g/kg,60g/kg,120g/kg)和硫普罗宁组(60mg/kg),给药8周。分别测定大鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、白介素-1β(IL-1β)、IL-6和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。采用Western Blotting方法测定大鼠肝脏TNF-α和核转录因子-κB(NF-κB)蛋白表达水平。与模型组比较,SF中高剂量组均显著降低血清ALT,AST,IL-1β,IL-6和TNF-α水平,并降低肝脏TNF-α和NF-κB蛋白表达水平。结果证明,SF对抗结核药物肝损伤的保护作用机制可能与抑制NF-κB表达有关。     

(E)-2-(4-氯苯基)-1-(2,4-2羟基苯)乙酰基肟改善大鼠急性痛风性关节炎的分子机制研究

目的:探讨(E)-2-(4-氯苯基)-1-(2,4-2羟基苯)乙酰基肟(EEO)对急性痛风性关节炎的改善作用及其分子机制。方法:随机将大鼠分为正常组、模型组、EEO各剂量组(低、中、高)、秋水仙碱组,各组分别用相应药物灌胃3 d。第3天给药1 h后向大鼠踝关节腔注入尿酸钠晶体(MSU),观察大鼠关节肿胀度变化。24 h后取滑膜组织,ELISA检测组织中白细胞介素1β和肿瘤坏死因子α的水平,蛋白质印迹检测组织中NLRP3炎性小体各组分和TLR4信号通路关键分子的蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组关节周径及滑膜组织中IL-1β和TNF-α的含量显著升高,滑膜组织NLRP3,ASC,Caspase-1,TLR4,MyD88的表达和p65 NF-κB的磷酸化水平显著上调,上述异常均能够被EEO和秋水仙碱逆转。结论:EEO通过调节NLRP3炎症小体和TLR4信号通路缓解MSU诱导的急性痛风性关节炎。     

miRNA-335通过抑制HDAC3改善帕金森病的炎症反应研究

帕金森病(PD)是一种神经退行性疾病,但关于PD的发病机制还有待研究。文章探索了microRNA-335(miRNA-335)在PD炎症反应中的作用和机制。将细胞分成4组,分别为空白组、模型组(100μmol/L 6-羟多巴胺(6-OHDA))、pre-miRNA-335组(100μmol/L 6-OHDA+30 nmol/L miRNA-335前体寡核苷酸)和anti-miRNA-335组(100μmol/L 6-OHDA+30 nmol/L miRNA-335抑制剂),分别测定每组细胞活力、上清液炎症因子及miRNA-335、组蛋白脱乙酰酶3(HDAC3)和核转录因子-κB(NF-κB)的表达。与空白组相比,6-OHDA处理后,细胞活力、miRNA-335水平显著下降,而白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、HDAC3和NF-κB蛋白水平显著升高,而当miRNA-335过表达时,可以显著改善上述异常表达的指标,而敲低miRNA-335表达时,可以加剧上述指标的异常。miRNA-335可能通过靶基因HDAC3调控NF-κB的表达,从而调控炎症因子的表达,进而改善...     

禽多杀性巴氏杆菌ompa DNA疫苗在小鼠体内免疫效果试验

应用PCR技术扩增获得禽多杀性巴氏杆菌的ompa基因片段,克隆到pUCm-T载体,再亚克隆到真核表达质粒载体pCDNA3.1(+)上,构建重组质粒pcA,体外转染Vero细胞,RT-PCR和间接免疫荧光试验检测其转录表达情况.动物免疫分为3组:pCDNA3.1(+)组、PBS对照组和pcA组,每组16只BALB/c小鼠,pCDNA3.1(+)组和pcA组以100μg/只的剂量肌注免疫,PBS组每只小鼠肌注100μL 1×PBS,各组均免疫3次,每次间隔2周.间接ELISA检测免疫后小鼠血清特异性抗体水平,MTT法检测免疫小鼠脾淋巴细胞增殖情况,三免2周后检测脾淋巴细胞IFN-γ分泌情况.强毒攻击,计算小鼠存活数目及保护率.结果显示,间接免疫荧光试验和RT-PCR检测结果均表明pcA可在体外培养的Vero细胞中表达目的蛋白.动物免疫后,pcA组免疫小鼠血清抗体水平持续上升,与pCDNA3.1(+)组和PBS组相比差异极为显著(P＜0.01).经提取的禽多杀性巴氏杆菌总外膜蛋白(Omps)刺激后,pcA组的刺激值(SI值)与pCDNA3.1(+)组及PBS免疫组相比均差异显著(P＜0.05).脾细胞产生的IFN-γ极显著高于两对照组(P＜0.01).强毒攻击后pcA组保护率明显高于两对照组,可达60%.结果表明,成功构建了禽多杀性巴氏杆菌ompa DNA疫苗,该疫苗可诱导免疫小鼠产生较强的体液和细胞免疫应答及一定的保护效果.     

二仙汤及其拆方对GT_(1-7)细胞株GnRH基因转录和表达的影响

目的:运用血清药理学方法,观察补肾方二仙汤及其温肾、滋阴两个拆方对 GT_(1-7)细胞 GnRH基因转录和表达的影响。方法:SD 大鼠连续4天灌服中药二仙汤及两个拆方,末次给药1 h 后取其血清作体外细胞培养实验;用放免法测定 GT_(1-7)细胞 GnRH 的分泌;用 Northern bolt 方法观察二仙汤及其拆方对 GT_(1-7)细胞 GnRH mRNA 的影响。结果:(1)二仙汤全方及其两个拆方均能促进 GnRH 释放,以全方效果最好。(2)孵育24 h 后全方组和温肾组 GnRH mRNA 水平有下降趋势。(3)孵育48 h 后滋阴组 GnRH mRNA 的表达明显增加。结论:中医“肾主生殖”的功能似涉及下丘脑 GnRH 神经元及其调控性腺轴的机能,二仙汤及其拆方能够直接调节 GT_(1-7)细胞 GnRH 的释放及基因表达。     

当归芍药散对药物性肝损伤小鼠的保护作用及其机制研究

观察当归芍药散对异烟肼(INH)和利福平(RFP)合用致小鼠药物性肝损伤的保护作用及其机制。将小鼠随机分为正常组、模型组、当归芍药散高、中、低剂量组(32,16,8mg/kg)和联苯双酯组(200mg/kg)。采用INH和RFP合用复制小鼠药物性肝损伤模型,测定血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST),同时测定肝匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和丙二醛(MDA)含量;HE染色法观察肝组织病理学变化,分析当归芍药散的保肝作用及其可能机制。结果表明当归芍药散可降低INH和RFP联用所致药物性肝损伤小鼠肝脏系数,显著降低小鼠血清中ALT(P0.01),降低AST(P0.05)含量;肝脏MDA含量明显降低(P0.05),SOD活力显著提高(P0.05),GSH-Px含量呈增高的趋势;病理学检查表明当归芍药散能显著减轻肝损伤程度。文章指出当归芍药散对药物性肝损伤小鼠具有一定的保护作用,其机制可能与其抗氧化作用有关。     

肠道铁吸收的分子机制研究

文章研究了不同铁状态下铁转运相关蛋白mRNA在肠道细胞中的表达,了解肠道铁吸收的相关机制。实验结果表明:缺铁细胞在铁补充剂的作用初期,DMT1、FTH和FPN1mRNA的基因表达会发生变化,细胞含铁量恢复后铁转运相关蛋白的基因表达逐渐恢复。DMT1、FTH和FPN1均参与了HT29细胞内的铁代谢过程。     

黄芪对高糖环境下肾间质成纤维细胞表达纤溶酶原激活物抑制剂的影响

目的:体外研究高糖刺激人肾间质成纤维细胞时纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)的表达,以及黄芪延缓糖尿病肾病与其相关性。方法:将人肾间质成纤维细胞培养于不同浓度葡萄糖中,24 h 后采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测 PAI-1 mRNA 转录水平,免疫组化方法检测 PAI-1蛋白的表达。随即用黄芪药物血清刺激细胞,观察 PAI-1表达情况。结果:高浓度葡萄糖培养的细胞 PAI-1表达升高,并呈现剂量和时间依赖性。说明 PAI-1表达与高糖作用存在相关性。同时等渗甘露醇也可以诱导 PAI-1表达。黄芪含药血清可以显著抑制细胞表达 PAI-1。结论:高糖可诱导 PAI-1表达,抑制细胞外基质成分降解。黄芪通过抑制 PAI-1的产生,起到抗纤维化作用,从而延缓糖尿病肾病的进展。     

白藜芦醇甙对大鼠腹腔巨噬细胞产生TNF-α、IL-6和IL-1及细胞内钙浓度的影响

目的:研究白藜芦醇甙(polydatin,pol)对大鼠腹腔巨噬细胞(peritoneal macrophage,PM)分泌TNF-α、IL-6和 IL-1的作用及其与[Ca~(2 )]_i 的关系,以了解 pol 的抗炎作用机制。方法:采用四甲基偶氮唑蓝[3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenylterazolium bromide,MTT]比色法检测 IL-1、TNF-α和 IL-6,采用荧光指示剂和荧光分光光度计检测 PM 的[Ca~(2 )]_i。结果:(1)pol 增加正常大鼠 PM 分泌 TNF-α和 IL-6,对 IL-1的分泌无明显作用。pol 可降低经脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激的大鼠 PM 分泌 TNF-α、IL-6和 IL-1。(2)pol 降低正常的和经 LPS 刺激后的大鼠 PM 静息[Ca~(2 )]_i 和外加 CaCl_2后[Ca~(2 )]_i 的升高。结论:pol 对PM 分泌细胞因子有双向调节作用。pol 可以抑制细胞内贮存钙释放和细胞外钙的进入。Pol 的抗炎机制可能与其抑制上述炎症介质有关,并可能通...     

油葵高产栽培技术

1、主要技术指标:1)产量指标200~220kg。2)产量构成指标每亩保苗5 000~5 500株,收获株数5 000株,株高160~180cm,花盘直径15~17cm,盘粒重50~55g,结实率85%,千粒重65g。3)土壤肥力指标土壤有机质含量12g/kg以上,速效氮100mg/kg,速效磷8mg/kg,速效钾>180mg/kg,土壤含盐量0.2%以下。4)施肥指标亩施优质有机肥1~1.5吨,化肥总量25~30kg,其中,尿素10~15kg,磷肥10kg,砂质土施钾     

丹参酮ⅡA对肝癌细胞增殖凋亡作用及相关机制的研究

目的:研究丹参酮ⅡA对肝癌HepG2细胞的增殖和凋亡的影响,并探讨相关的下游机制。方法:用梯度浓度(0μg/mL,12.5μg/mL,25μg/mL,50μg/mL,100μg/mL,200μg/mL)的丹参酮ⅡA作用于HepG2细胞,检测24 h,48 h对细胞的IC_(50)值。Tunel染色、流式细胞术检测不同加药组相对于HepG2细胞的凋亡情况,qPCR和WB实验检测p53相关基因m RNA和蛋白。结果:不同浓度的丹参酮ⅡA对HepG2细胞均有杀伤作用,并呈现剂量依赖性。在24 h和48 h的IC_(50)值分别为51.25μg/mL和47.36μg/mL。流式细胞术检测发现丹参酮ⅡA能诱导肝癌细胞的凋亡,并呈现一定的剂量依赖性。qPCR和WB实验则证实,丹参酮ⅡA作用细胞后,p53的表达量明显增加。结论:丹参酮ⅡA可以提高HepG2细胞中p53的表达,诱导细胞凋亡。     

昆明小鼠特应性皮炎模型的建立

文章对昆明小鼠特应性皮炎模型的建立进行了研究。目的:制备昆明小鼠的特应性皮炎模型。方法:模型组分别于第1、8、15天用2%DNCB(橄榄油配置)100μL涂于背部去毛区域,第18、19、20天用0.5%DNCB 10μL涂于模型右耳激发,对照组用橄榄油替代DNCB。观察各组小鼠皮损情况并进行动态分级,计算耳肿胀度、胸腺指数、脾指数,HE染色观察皮肤炎性改变。结果:模型组表皮红肿增厚,有脱屑和渗出。模型小鼠耳肿胀度、胸腺指数、脾指数明显高于对照组(P0.05)。HE染色模型小鼠局部皮肤肥厚,炎细胞浸润等炎性改变明显,对照组未发现异常。结论:2%DNCB(橄榄油配置)可用于昆明小鼠特应性皮炎的制备。     

环己烷二甲酸二辛酯急性经口毒性的研究

邻苯类增塑剂使用广泛,但是由于其毒性,在食品及医疗器械领域的应用受到限制。本文研究了一种新型绿色增塑剂环己烷二甲酸二辛酯(DEHCH)的急性经口毒性。通过对小鼠服喂邻苯二甲酸二辛酯(DOP)和环己烷二甲酸二辛酯(DEHCH),按照每天LD50>5000mg/kg的剂量连续灌胃染毒15天,染毒后继续观察15天。实验结束后对小鼠体重及内脏组织器官进行记录分析,结果表明:服喂邻苯二甲酸二辛酯(DOP)的小鼠,体重增长缓慢,内脏器官有不同程度的损伤,精子有一定程度的畸形;服喂环己烷二甲酸二辛酯(DEHCH)的小鼠未见明显中毒表现,处死后解剖未见明显异常。     

多元统计学理论在矿区土壤重金属溯源分析中的应用

通过对万庄金矿区及其矿区周边表层土壤取样调查,本文测定了矿区土壤中八大重金属含量。结果表明,矿区土壤中As、Cd、Cr、Cu、Hg、Pb、Zn和Ni的重金属平均含量为0.345 mg/kg、26.858 mg/kg、0.321 mg/kg、68.055 mg/kg、30.879 mg/kg、59.040 ng/g、51.556 mg/kg,89.450 mg/kg和32.070mg/kg,由《土壤环境质量标准》(GB15618-1995)对比发现,该矿区土壤中研究的重金属含量超过了二级标准值,说明该地区的重金属积累比较严重。采用相关性分析、主成分分析及聚类分析多元统计学方法对土壤重金属进行溯源分析,结果表明:Cr、Ni可能源自后期人为因素和大气沉降;As、Pb、Cd及Zn的来源可能是矿石开采、开采后的堆积冶炼、矿产的运输以及冶炼后的残渣堆积物;对于Hg的来源,除了源于土壤的自然成土因素,主要原因是金矿选冶采用氰化法时需要加入汞。     

国内项目标讯

广东省机电设备招标局招标通告(招标编号:GDA99001)广东省机电设备招标局受用户委托,对江苏大厦项目电梯进行国际竞争性招标。欢迎对本项目感兴趣的具有制造能力或供货能力的国内外厂商、供应商参加密封投标。1、招标货物名称、数量及主要技术规格:(1)消防梯2台(L1,L10)L1速度:3.0m/s,载重:1350kg,停层/停站:48/51L10速度:1.5m/s,载重:1350kg,停层/停站:15/18(2)客梯10台(L2～L9,L11,L12)L2速度:4.0m/s,载重:1350kg,停层/停站:47/17L3速度:4.0m/s,载重:1350kg,停层/停站:48/18L4速度:4.0m/s,载重:1350kg,停层/停站:48/19L5,L6速度:2.5m/s,载重:1350kg,停层/停站:30/15     

右美托咪定对小儿七氟烷麻醉后苏醒期躁动的影响

目的:探讨右美托咪定对小儿七氟烷麻醉后苏醒期躁动的影响。方法:选择2~9岁择期行气管内插管全麻的患儿90例,随机分为对照组、右美托咪定0.15μg/kg组(观察1组)、右美托咪定0.30μg/kg组(观察2组),每组30例。对照组患儿术中吸入七氟烷和空氧混合气体。观察1组和观察2组在此基础上复合静脉连续输注右美托咪定负荷剂量0.15μg/kg,0.30μg/kg。观察各组患儿麻醉前(T_0)、插管前(T_1)、插管后5 min(T_2)和送出PACU时(T3)的收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、心率(HR)和血氧饱和度(SPO_2)。记录3组患者手术时间、苏醒时间、PACU停留时间。比较3组患儿的躁动发生率。结果:3组间T_0时间点SPO_2,HR,SBP,DBP差异无统计学意义,3组T_1~T_3期间HR,SBP,DBP差异有统计学意义(P0.05)。3组患儿在诱导期间各时间点血流动力学变化趋势基本一致。组间比较T_1~T_3时间点观察2组HR,SBP,DBP低于观察1组和对照组,观察1组上述指标低于对照组,差异均有统计学意义(P0.05),3组各时间点SPO_2值PACU停留时间差异无统计学意义(P0.05)。3组在不同时间点躁动发生率差异有统计学意义(P0.05);观察1组和观察2组躁动发生率均明显低于对照组(χ~2分别为:29.39,637.630,P0.05),但观察1组和观察2组两组比较差异无统计学意义(P0.05)。3组苏醒时间差异有统计学意义(F=105.610,P=0.000),观察1组、2组苏醒时间明显低于观察组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:静脉连续输注右美托咪定不会显著延长小儿的苏醒时间,且苏醒过程中躁动的发生率明显降低,右美托咪定能预防小儿七氟烷麻醉后苏醒期的躁动反应。     

基于CRISPR/Cas9技术构建原位敲入亨廷顿病(HD)小鼠模型

目的:探究CRISPR/Cas9技术在建立亨廷顿病(Huntington’s Disease,HD)原位敲入小鼠模型中的运用。方法:首先,设计gRNA靶点序列(Htt gRNA)并检测其体外Cas9酶切活性,选择活性较好的一对备用。其次,利用全基因合成具有150Q(150个CAG重复)的Donor序列。然后将Cas9 mRNA,Htt-L3 gRNA,Htt-R3 gRNA和Donor DNA混合均匀进行胚胎显微注射,再将胚胎移植到受体小鼠中备孕。待小鼠出生后,鉴定F0代及其子代F1,F2,F3代的基因型。结果:F0,F1,F2及F3代小鼠基因组上均出现150Q的准确敲入,且子代稳定遗传。结论:在不改变小鼠HD基因表达调控的基础上,仅改变其特定致病基因的长度,利用CRISPR/Cas9技术成功构建HD原位敲入小鼠模型,为进一步模拟人类HD缓慢且迟发的发病过程及后续临床治疗研究拓展了HD模型。     

不同扶正药物及其配伍对SMMC-7721人肝癌细胞p53、N-ras基因的影响

目的:探讨不同扶正药物及其配伍对 SMMC-7721人肝癌细胞 p53、N-ras 基因的调控作用。方法:选取临床肝癌治疗常用的益气、温阳、补肾、养阴等扶正治法的代表药物,并根据阴阳治则理论将其分别配伍为益气养阴、温阳养阴及补肾(阳)养阴等复合方治法,分别煎成汤液,采取大鼠灌胃给药后分离药物血清的方法制备药物血清,作用于体外培养的 SMMC-7721人肝癌细胞,以正常大鼠血清和维甲酸作对照。流式细胞仪分析 p53、p21~(ras)基因蛋白表达,RT-PCR 半定量观察 p53及 N-ras 基因转录情况。结果:养阴、益气养阴、温阳养阴、补肾养阴组细胞 p53蛋白表达增强,p21~(ras)蛋白表达降低,其中,又以益气养阴组的作用最为明显;益气养阴组 p53转录增强,N-ras 转录减弱。结论:养阴药北沙参、麦门冬及其与益气、温阳、补肾配伍后的药物血清具有显著的调控 SMMC-7721人肝癌细胞 p53、N-ras 基因表达的作用。     

水利区周边土壤重金属含量特征及污染评价 —以宿州市新汴河为例

以宿州市新汴河流域内水利区的土壤重金属为研究对象,共采集深、表层(5～15cm)土壤55份并测定其重金属含量。运用多元统计分析、单因子污染指数法、内梅罗综合污染指数法和综合潜在生态危害指数法,对研究区内土壤重金属含量特征、来源和污染现状进行了分析与评价。结果表明:Cr、Co、Ni、Cu、Zn和Pb的含量均值分别为44.60 mg/kg、10.62 mg/kg、22.65 mg/kg、20.36 mg/kg、53.59 mg/kg和23.51mg/kg。除局部采样点的Ni、Cu超过安徽省土壤背景值外,其余重金属平均含量均低于安徽省土壤背景值。单因子污染指数评价中Ni、Cu显示为轻污染,内梅罗综合污染指数中Ni、Cu处于低污染,综合潜在生态危害指数变化范围为13.7～23.7,其平均值为18.7,均处于低风险。多元统计分析(相关性分析、因子分析及聚类分析)来源表明,Ni、Cu来源于农业活动和土壤母质,Zn、Pb、Co和Cr来源于周边的工业及交通运输。