细菌快速检测与传统培养方法结果比较

[目的]比较细菌快速检测试纸片与传统方法在细菌检测结果上的差异。[方法]检测同一样品的细菌总数和大肠菌群2个指标。细菌总数检测分别以平板计数法和细菌总数试纸片进行,大肠菌群分别以多管发酵法和大肠菌群快速检测纸片法进行。[结果]以平板计数法检测细菌总数,37℃培养48h能观察出结果; 而同一样品用市售的2种细菌总数试纸片37℃培养48h显示不出结果,需要延长培养时间至72h以上; 多管发酵法检测大肠菌群24h能观察到结果,延长时间培养阳性结果不变; 用大肠菌群快速检测试纸片,36h才能观察到结果,延长培养时间,阳性结果随之变化; 传统培养方法与试纸片法的结果经统计处理差异有显著性。[结论]细菌快速检测试纸片能简化操作,但成本高,培养时间长,灵敏度低。     

PCR方法检测志贺氏菌的研究

建立一种快速检测志贺氏菌PCR检测方法.根据志贺氏菌的侵袭性质粒抗原(ipaH)基因序列,设计引物,建立PCR检测方法.本方法特异性高,均能检测出志贺氏菌属的4个种,整个实验过程8～10h完成.建立的方法可用与实际检测中.     

生活饮用水中总大肠菌群多管发酵法与纸片法检测方法比较

为快速检测生活饮用水中总大肠菌群,对多管发酵法与纸片法两种方法进行比较.采用生活饮用水国家标准(GB/T5750.12-2006)中的多管发酵法与国家环境保护标准(HJ755-2015)中的纸片法2种方法同时检测水中的总大肠菌群,比较二者的适用性,检测结果的差异性.2种方法在适用性上无差异;对64份样品进行检测,多管发...     

应用荧光PCR方法检测食品中的单核细胞增生李斯特氏菌

[目的]发展一种快速、敏感、特异的荧光PCR方法检测食品中单核细胞增生李斯特氏菌.[方法]针对单增李斯特氏菌溶血素基因(hly A),设计特异的引物和TaqMan探针,优化体系,建立荧光PCR检测方法,对该方法的特异性和敏感性进行评价,并且在对188个进出口食品样本的检测中与传统方法进行对比.[结果]经对20株不同菌属的标准菌株和30株野生李斯特氏菌菌株检测,结果显示该方法具有良好的特异性.灵敏度检测结果表明,经过24h增菌,该方法的检测低限为1cfu/g,整个流程只需27h.在实际样本的检测中,检测结果与传统方法结果一致.[结论]该方法能快速、简便和准确地检出单核细胞增生李斯氏菌,具有良好的应用前景.     

酚试剂法测定甲醛含量中吸收液保存条件及稳定性探讨

研究不同保存温度和形式下甲醛溶液吸光度的变化情况。结果表明,在吸光度相对偏差不超过±10%时,避光条件下,采样前酚试剂吸收液,常温(25℃)下可保存8天,低温(4℃)下可稳定11天以上。采样后甲醛溶液,常温可稳定4天,低温(4℃)至少可稳定6天。在实际应用中,采样前后可将溶液低温保存不超过5天,既能满足测试要求,又能兼顾时效。     

针对hly基因快速筛检食品中霍乱弧菌实时荧光PCR方法的研究

[目的]研制一种供基层疾病控制和口岸检疫单位日常疫情监测使用的对水产品、食品、外环境水中的O1群、O139群和非O1群、非O139群霍乱弧菌都可进行筛检的实时荧光PCR快速检测方法及其通用试剂体系.以早期进行流行株的鉴定,分析外环境疫情变化.[方法]针对霍乱弧菌溶血素基因(hly)设计引物和探针,取标准O1、O139、非O1非O139群霍乱菌种各10株,其他肠道菌种21株同时做荧光PCR测试其特异性;用标准菌株系列稀释敏感度测试、实际样品稀释染菌敏感度测试、实际样品不经增菌直接检测低限实验、实际样品经过夜培养增菌检测低限实验等测试其敏感性;通过日常实际样品对方法的应用和实验室间验证考察其符合性.[结果]实验与对照菌株51株只有霍乱弧菌产生S型扩增荧光曲线,其它同源和非同源菌株均未产生S型荧光扩增曲线,设计的引物探针具有强特异性;通用霍乱弧菌实时荧光PCR试剂体系直接检测染菌样本的检测低限为103cfu/mL;对染菌样本经过夜培养增菌检测低限分别在霍乱弧菌O1群为2.1cfu/g、霍乱弧菌O139群为1.4cfu/g、霍乱弧菌非O1非O139群为3.4cfu/g;实际样本检测252例阳性检出情况与常规方法一致.实验室间验证结果同实验一致.[结论]研制的通用霍乱弧菌实时荧光PCR试剂体系具有快速、准确、实用、敏感性强的优点,值得在各检测部门推广应用.     

用FQ-PCR方法快速检测水产品中副溶血弧菌

[目的]采用荧光定量PCR技术,研制适合各层次实验室使用的,快速、准确地检测与鉴定食品中副溶血弧菌污染的定性、定量检测试剂盒.[方法]根据副溶血弧菌gyrase基因序列,设计并合成特异性引物和荧光标记探针,将扩增后的特异片断制成阳性模板,绘制标准曲线.以副溶血弧菌菌株8株及同源及非同源参考菌株24株,做特异性检测;将阳性污染菌按梯度加入阴性样品为模拟样本,做敏感性检测.同时使用PE7000型定量PCR仪和国产DA620微量荧光检测仪检测.[结果]该方法有良好的特异性8株副溶血弧菌结果均为阳性,而其他24株菌株均为阴性(其中8株是弧菌科,其它15株分别来自不同的菌属);该方法有良好的敏感性阳性模板浓度与定量曲线循环阈值之间具有良好的线性关系,相关系数达到0.9871.直接进行定量检测,则检测低限在102cfu/g;经过24小时增菌培养,检测低限可达2cfu/g.[结论]该方法特异性强、敏感性高,操作简便快速,能避免常规PCR方法易污染的缺陷,在国产仪器上测试同样取得较好的敏感性和特异性,便于基层实验室使用,具有很好的推广应用前景.     

某市包装饮用水微生物污染状况分析

目的:检测某市市售包装饮用水中大肠菌群和铜绿假单胞菌的污染情况,为市场监管和国家制定相应标准提供科学依据。方法:按照2017年国家食品安全监督抽检实施细则中的标准要求,对该市市场上抽取的包装饮用水中大肠菌群和铜绿假单胞菌进行检测,对检测数据使用Excel软件对检测结果进行差异显著性分析。结果:抽检的57份样品中有3份检出大肠菌群,检出率为5.26%,12份检出铜绿假单胞菌,检出率为21.05%。大肠菌群的检出率与铜绿假单胞菌检出率之间存在显著差异(x2=6.22,P=0.013,P0.05)。结论:该市包装饮用水微生物污染状况存在安全隐患,建议食品监管部门应加强生产卫生监察,保障消费者身体健康。     

结核菌快速检测方法用于口岸检疫的研究

[目的]评价两种结核菌快速检测方法在口岸卫生检疫中的应用价值。[方法]以＂中华人民共和国行业标准-肺结核诊断标准WS288-2008＂选取结核病人100例,有呼吸道症状的疑似病人50例,以罗氏L-J固体培养结果为标准,考核荧光实时定量PCR（RT-PCR）、分枝杆菌直接检测（MDT）在结核病诊断的敏感性、特异性。[结果]100例结核病人标本培养后均为阳性,50例可疑者标本培养后均为阴性;100例培养阳性的标本,荧光实时定量PCR检测出98例阳性,MDT检测出100例阳性;50例培养阴性标本,荧光实时定量PCR检测出1例阳性,MDT未检测阳性。RT-PCR的敏感性、特异性、阳性预期值、阴性预期值为98.04%、98.04%、99.01%、96.15%;MTD检测敏感性、特异性、阳性预期值、阴性预期值均为100%。[结论]与传统培养方法相比较,两种方法有着很高的敏感性和特异性,但检测时间大大缩短,适合应用于口岸卫生检疫中。     

生活饮用水中总大肠菌群检测方法探讨

本文概述了总大肠菌群的定义及将其作为饮用水污染指示菌的原因,并阐述了其与耐热大肠菌群和大肠埃希氏菌的关系,然后重点介绍了饮用水中总大肠菌群的3种检测方法,并对这3种检测方法进行了详细的对比分析。     

黑麦草腥黑穗病菌的快速鉴定

从进境美国黑麦草种子中发现一种类似小麦印度腥黑穗病菌(Tilletia indica)的冬孢子.选取小麦印度腥黑穗病菌的特异性引物Tin3/Tin4和黑麦草腥黑穗病菌(T.ualkeri)的特异性引物Tin11/Tin4以及两者的通用引物H4/H7、H11/H12对样品中的冬孢子进行套式PCR扩增,检出该批样品中含有黑麦草腥黑穗病菌(T.ualkeri).检测灵敏度为3个冬孢子,检测时间约为6h.与常规检测方法相比,工作效率至少提高了6倍.     

气袋法-热解析气相色谱法测定涂料中总挥发性有机化合物释放量方法研究

涂料中的总挥发性有机化合物（TVOC）是造成室内空气污染的重要因素之一,当前多采用环境舱法测定TVOC释放量,该方法实验周期长、设备昂贵且测试结果再现性差。本研究使用薄膜气袋法代替环境舱法对样品试板进行检测,通过对气袋材料、采样时间、采样温度等条件的选择,建立了气袋法-热解析气相色谱法测定涂料中TVOC释放量的方法。制备15种VOC物质的标准吸附管,以甲苯为例,在质量范围0.05～20μg内,组分质量与色谱峰面积线性关系良好（r=0.998）,检出限为0.008 mg/m3。同一人员每个样品2次平行测定的相对偏差≤2.1%,人员间相对偏差<7.1%。该方法所需设备简单,操作便捷、重复性好、再现性高,满足对涂料及相关材料中TVOC释放量的检测。     

纺织品防紫外线性能测试方法及仪器研制

[目的]设计出满足GB/T17032-1997基本要求,软硬软件互补、操作简便、便于数据处理、显示、保存,人机对话功能良好,能准确、快速检测纺织品防紫外线性能的仪器.[方法]该项目运用系统分析、有效控制方法,采用先进技术,研究完成了我国首台自行设计、自行研究、自行制造的织物紫外线透过率的检测仪器.[结果]该仪器各项技术指标达到了以下要求紫外线相对强度精度≤1%;标准样片测试结果CV值≤3%;每份样品测试时间不超过10min;测试窗口尺寸小于10mm.[结论]经以中国工程院院士姚穆为首的审定委员会审定认为该仪器设计科学合理、结构严谨、自动化程度高,检测快速,结果准确,关键技术达到国际先进水平.     

食品中金黄色葡萄球菌定量检测方法比较研究

采用Baird-Parker平板涂布法、Baird-Parker倾注法及Petrifilm测试纸片法,对含一定浓度的金黄色葡萄球菌标准菌液进行计数,并对食品中的金黄色葡萄球菌进行检验。结果表明,三种方法的检测结果有较好的一致性,且倾注法和纸片法操作简单、结果稳定、再现性好;此外,纸片法在检测简便性、准确性和检测时间等方面的比较中优于倾注法,综合多方面因素考虑,纸片法在相关行业的日常检测中值得推广应用。     

前增菌时间对生禽肉中沙门菌检验的影响研究

目的:研究不同前增菌时间对沙门菌检验的影响,对沙门菌检验方法进行优化,为国家标准的修订提供科学数据。方法:按照沙门菌国家标准方法检验20份生禽肉,每个样品分别采用8h和18h两个时间前增菌,对检验结果进行比较分析。结果:当前增菌时间为8 h时,检出沙门菌阳性样品8份,阴性样品12份;当将样品继续前增菌至18 h时,其中4份阳性样品中沙门菌未检出,5份阴性样品则检测为沙门菌阳性。结论:不同前增菌时间对沙门菌的检验影响显著,同时采用8h和18h两个前增菌时间检验生禽肉,可以大大提高阳性检出率。     

建立及应用高通量液相芯片方法检测鉴别四种动物源性成分

根据GenBank中反刍动物、禽、猪和鱼线粒体DNA序列,分别设计特异性引物和探针,建立同时检测反刍动物、禽、鱼三大类物种和猪成分的四重液相芯片方法,并对其特异性、敏感性和重复试验稳定性进行验证评估.结果 显示该方法能够准确检出鉴别4种目标物种,与非目标物种无交叉反应;对DNA模板检测低限可达到0.01～0.05 ng...     

应用PCR技术同步检测动物产品中的4种致病菌

本研究根据沙门氏菌、单增李斯特菌、大肠杆菌O157H7及空肠弯曲菌的不同培养特性,将单一PCR及复合PCR的方法相结合,设计合成了4种针对性的引物,通过检测4种菌不同的特异性基因片段,建立了一种同步检测的PCR方法,具有简便、快速、准确的特点.对95份实物样品检测,结果与经典方法一致,有较好的应用价值.     

凝固型发酵豆乳工艺研究

以市售豆浆为原料,本文研究了豆浆蛋白浓度、豆浆灭菌方式、菌种比例在发酵过程中对产品风味与状态的影响。结果表明,在豆浆蛋白浓度为4%时发酵状态最好,豆浆的灭菌方式最好是采用85℃蒸汽灭菌30 min;发酵过程中采用了保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌、乳酸乳球菌和乳酸乳脂链球菌4种菌,这4种菌最佳的配比为1∶1∶1∶1,蔗糖添加量为7%,接种量为5%,发酵温度42℃,发酵时间5～6 h。在此条件下发酵的凝固型豆乳发酵质地光滑细腻,有浓郁的豆香味和丰富的发酵酸香味。     

4种检测猪繁殖与呼吸综合征抗体间接ELISA试剂盒的比较

为评估猪繁殖与呼吸综合征抗体ELISA检测试剂盒的性能差异。采用传染病诊断方法的验证原则,用203份临床样品、PRRS标准阳性血清,比较4种ELISA试剂盒的分析敏感性、分析特异性、诊断敏感性、诊断特异性、批内重复性等的差异。结果表明4种ELISA试剂盒的精密度良好,kappa值均大于0.90,适用于猪繁殖与呼吸综合征抗体水平监测和免疫效果评估。但不同试剂盒的检测时长有差异,在实际应用中应根据具体情况合理选用。     

利用PCR方法快速检测食品中的沙门氏菌

本文介绍了一种快速检测食品中沙门氏菌的方法.操作步骤为,在缓冲蛋白胨水(BPW)中增菌18-24h,生理盐水洗菌2次后煮沸裂解细胞,以invA为目的基因进行PCR,琼脂糖凝胶电泳检测,两天时间即能得到明确结果.以全脂奶粉、生牛肉和加工过的鸡肉为实验对象,人为添加沙门氏菌,检测结果与传统培养方法和BAX(r)系统检测结果一致.实验检出限为100cfu/25g,准确性达100%.