食品中小肠结肠炎耶尔森氏菌检测技术研究

小肠结肠炎耶尔森氏菌是重要的食源性致病菌,如何有效地检测该菌是预防和减少食品安全问题的关键环节。本文较为系统地介绍了利用常规分离鉴定、免疫学、分子生物学和生物质谱等技术手段检测小肠结肠炎耶尔森氏菌的方法,最后对小肠结肠炎耶尔森氏菌检测技术的现状进行分析,并对发展趋势进行了预测。     

嗜热链球菌与保加利亚乳杆菌德氏亚种计数方法的比对研究

为研究嗜热链球菌、保加利亚乳杆菌德氏亚种准确计数方法,本文采用MRS琼脂和酸化MRS琼脂厌氧培养,MC琼脂有氧培养的方法,分别对含嗜热链球菌、保加利亚乳杆菌德氏亚种的菌粉和市售发酵乳进行乳酸菌计数.结果显示,对于只含嗜热链球菌的S菌粉,MRS琼脂厌氧培养的计数结果远高于MC琼脂有氧培养、酸化MRS琼脂厌氧培养的计数结果...     

化妆品中细菌总数、粪大肠菌群、绿脓杆菌和金黄色葡萄球菌的快速检验方法

化妆品中的细菌在卵磷脂、吐温80-营养琼脂上经过孵育培养,成为肉眼可见的菌落,通过菌落计数求得化妆品中的细菌总数,同时化妆品中的细菌经过改良的LETHEEN氏肉汤增菌后,在卵磷脂、吐温80-营养琼脂上进行分离培养,结合菌落形态和显微镜观察,可疑菌再进行分类鉴定.     

冰箱如何用?

冰箱的使用关乎食品安全,因此我们要学会按照正确的方法放置食物. 目前常见的冰箱一般分为“零度以上”、“零度”和“零度以下”三个温度层. 在“零度以上”层应该放置蔬菜水果和一些剩饭熟食.冰箱保存食物的常用冷藏温度是4至8度,在这种环境下,绝大多数的细菌生长速度会放慢.但有些细菌却嗜冷,如耶尔森菌、李斯持氏菌等在这种温度下反而能迅速增长繁殖,因此,食物必须在当天或三天内处理.     

食品中单增李斯特菌国内外控制要求有哪些

<正>李斯特菌广泛分布在自然界中,在腐烂的植物、土壤、动物粪便、污水、青贮饲料和水中均可找到其踪迹。目前发现的李斯特菌菌株包括单核细胞增生李斯特菌（以下简称“单增李斯特菌”）、绵羊李斯特菌、英诺克李斯特菌、威尔斯李斯特菌、西尔李斯特菌、格氏李斯特菌、默氏李斯特菌等。其中,单增李斯特菌是唯一能引起人类疾病的李斯特菌。     

检测单增李斯特氏菌的几种选择性固体培养基的效果比较

[目的]选择更加适合单增李斯特氏菌检测的固体选择性培养基.[方法]参见ISO/TS11133-2中的培养基验证方法并有所改进,对国际上常用的3种选择性固体培养基进行比较选择.[结果]OXA和李斯特氏;显色培养基的增菌效果相近,且单增李斯特氏菌和绵羊李斯特氏菌在李斯特氏菌显色培养基上具有特征性菌落形态,易于与其他李斯特氏菌相区别.[结论]OXA和李斯特氏菌显色培养基效果较好,比较适合单增李斯特氏菌的检测,两种培养基联合使用可以提高单增李斯特氏菌的检出率.     

奶粉中单增李斯特氏菌热抵制特性的研究

[目的]对奶粉中单增李斯特氏菌的热抵制特性进行研究.[方法]通过人工方法将单增李斯特氏菌按107cfu/mL的浓度分别添加于提前预热的60℃的灭菌蒸馏水、复水的原料粉和复水的高糖高脂奶粉中,在此温度下分别作用5min和10min,通过菌落计数分析单增李斯特氏茵的热抵制特性.[结果]在灭菌蒸馏水中单增李斯特氏菌衰减得最快,在复水的原料奶粉中单增李斯特氏菌衰减得较慢,而在复水的高糖高脂奶粉中单增李斯特氏菌衰减得最幔.[结论]奶粉中的单增李斯特氏菌具有热抵制特性,而且高糖高脂成分可提高单增李斯特氏菌的热抵制能力.     

马尾口岸蝇类生物多样性和携带病原微生物情况的研究

目的全面掌握马尾口岸蝇类的种群分布及季节消长变化,分析不同生境和地点蝇类携带病原微生物的差别,对相关疾病的流行风险进行评估。方法根据马尾口岸地理分布和港口类型,2007年7月至2008年6月间,抽取8个监测点7个不同生境实施为期1年的蝇类本底调查,按生境分类对携带病原微生物进行检测。结果捕获蝇类49579只,年平均密度74.67只/笼.日,隶属4科22属36种,比2004年多19种,其中4种未见在福州分布记录,大头金蝇为优势种群。垃圾堆蝇密度最高,高于荒地、居民室外和食堂。大裕堆场和中钢码头蝇密度较高,高于居委会、青州堆场、局本部和闽鑫物流。5至10月份捕获的蝇数占总数的94.57%,出现了9月和5月的双峰。蝇类体内、外均虽未检出痢疾杆菌、伤寒杆菌和霍乱弧菌等强致病菌,但普遍检出了变形杆菌、铜绿假单胞菌和肺炎克雷伯菌等,以及可引起食物中毒的病原菌如金黄色葡萄球菌、变形杆菌等,个别样本检出气单胞菌和小肠耶尔森氏菌。部分蝇体内检出柯萨奇病毒和轮状病毒（A组）。结论马尾口岸蝇种丰富,比4年前有了较大增长,出现了4种输入性蝇种,蝇类体表和体内携带的病毒,可能引起食物中毒及其他肠道传染病传播的风险。     

十二种食源性致病菌可见光基因芯片检测方法的建立

[目的]利用可见光基因芯片技术,针对12种常见食源性致病菌,建立快速、准确、高通量的诊断方法。[方法]设计靶细菌16S rDNA和23S rDNA的通用引物,反向引物5’端标记生物素;特异寡核苷酸探针设计在两对引物之间的可变区,5’端标记氨基基团。将探针点样于固相载体制备基因芯片,优化PCR反应体系后,PCR产物与芯片点制探针区域进行杂交,然后通过化学显色直接观察结果,并评价反应体系的特异性、灵敏度、重复性等指标。收集临床样本28例,同时制备双盲模拟污染样本10例,对检测方法进一步评价。[结果]：本试验所建立的基因芯片方法可同时检测志贺菌、耶尔森氏菌、沙门菌、腊样芽孢杆菌、空肠弯曲菌、金黄色葡萄球菌、霍乱弧菌、副溶血性弧菌、单增李氏菌、布鲁氏菌、变形杆菌、肠出血性大肠杆菌O157：H7等12种食源性致病菌,特异性高,操作简便;针对纯培养食源性致病菌反应体系的灵敏度为10^3cfu/mL,模拟样本的灵敏度为10^4cfu/mL;重复性好;采用可见光基因芯片方法检测28例临床样本,26例与常规培养方法结果完全一致,符合率达到92.9%;双盲模拟样本的检测符合率达到100%。     

干奶粉中单增李斯特氏菌的生存评估

[目的]对不同水活度干奶粉中的单增李斯特氏菌在不同温度条件下的生存特性进行评估.[方法]通过人工方法将单增李斯特氏菌按103cfu/g的浓度添加于不同水活度的干奶粉样品中,在不同温度(冰箱温度4℃和室温25℃)下贮存,通过菌落计数来分析单增李斯特氏菌的生存特性.[结果]在低温条件下,单增李斯特氏菌可在较低水活度的干奶粉中长期保持生长活力,并且当水活度较高时,会有增长趋势.在较高的环境温度中,干奶粉中的单增李斯特氏菌的生长活力很快减退,细菌处于亚损伤状态,但在适宜的营养环境条件下,这种亚损伤状态可以得到修复.细菌仍然可以恢复活力.[结论]高温条件更易使干奶粉中单增李斯特氏菌生长活力减退,干奶粉中如果污染了单增李斯特氏菌.于室温(25℃)条件下贮存会抑制单增李斯特氏菌的生长.     

应用荧光PCR方法检测食品中的单核细胞增生李斯特氏菌

[目的]发展一种快速、敏感、特异的荧光PCR方法检测食品中单核细胞增生李斯特氏菌.[方法]针对单增李斯特氏菌溶血素基因(hly A),设计特异的引物和TaqMan探针,优化体系,建立荧光PCR检测方法,对该方法的特异性和敏感性进行评价,并且在对188个进出口食品样本的检测中与传统方法进行对比.[结果]经对20株不同菌属的标准菌株和30株野生李斯特氏菌菌株检测,结果显示该方法具有良好的特异性.灵敏度检测结果表明,经过24h增菌,该方法的检测低限为1cfu/g,整个流程只需27h.在实际样本的检测中,检测结果与传统方法结果一致.[结论]该方法能快速、简便和准确地检出单核细胞增生李斯氏菌,具有良好的应用前景.     

PCR方法检测志贺氏菌的研究

建立一种快速检测志贺氏菌PCR检测方法.根据志贺氏菌的侵袭性质粒抗原(ipaH)基因序列,设计引物,建立PCR检测方法.本方法特异性高,均能检测出志贺氏菌属的4个种,整个实验过程8～10h完成.建立的方法可用与实际检测中.     

包装饮用水中铜绿假单胞菌的检测方法

该文同时使用乙酰胺琼脂平板和CN琼脂平板,用GB/T8538-2008中的方法检测包装饮用水中的铜绿假单胞菌。结果显示,增加使用乙酰胺琼脂平板,可以减少或避免检测结果出现假阴性。     

食品中单增李斯特氏菌PCR检测方法所用引物的特异性比较

[目的]对食品中单增李斯特氏菌PCR检测方法目前常用的引物进行特异性比较.[方法]用36株单增李斯特氏菌、非单增李斯特氏菌以及其他菌属的细菌,将我室的2对引物与其他作者设计的5对引物进行特异性比较.[结果]我室采用的引物FM1/FM2只对单增李斯特氏菌扩增出特异性片段,引物LI1/U1只对所有李斯特氏菌属的细菌扩增出特异性片段.其他引物除了对单增李斯特氏菌扩增出特异性片段外,对其他细菌也会扩增出与特异性片段大小一致的片段.[结论]单增李斯特氏菌的特异引物FM1/FM2与李斯特氏菌属的特异引物U1/LI1组合应用,可以成为检测单增李斯特氏菌的最佳方法.     

复水奶粉中单增李斯特氏菌的生存评估

[目的]对复水奶粉中单增李斯特氏菌的生长与存活进行评估.[方法]通过人工方法以102cfu/mL的浓度添加单增李斯特氏菌于复水奶粉样品中,在不同温度和pH值条件下贮存,通过菌落计数分析单增李斯特氏菌的生存特性.[结果]在-1.5～37℃之间,单增李斯特氏菌能够生长,在-1.5℃时生长速率最慢,随温度升高生长速率也随之加快,在37℃时生长最快,在45℃时不能生长.在接近中性pH值范围内的复水奶粉中,单增李斯特氏菌在高温条件下(30℃)比在低温条件下(4℃)生长快,但在低温条件下(4℃),单增李斯特氏菌对酸和碱的耐受程度比在高温条件下(30℃)的耐受程度大.[结论]由于复水奶粉的pH值接近中性,比较适合单增李斯特氏菌的生长,如果污染了单增李斯特氏菌,在低温条件下贮存能够控制单增李斯特氏菌的生长.     

检测致病性李斯特氏菌的培养基

要检出单核增生李斯特氏菌,前增菌和分离是非常重要的步骤。本文概述了李斯特氏菌选择性增菌肉汤和选择性显色培养基的种类和设计原理,对它们的应用效果进行了讨论。     

食品中单核细胞增生李斯特氏菌的检验探讨

本文概述了食品中单核细胞增生李斯特氏菌的检验方法,并对增菌、二次增菌、分离培养和生化实验的注意事项提出见解,为准确地检验食品中单核细胞增生李斯特氏菌提供参考。     

大肠埃希氏菌的两种标准检验方法的准确性比较

按照大肠埃希氏菌的生化性状,对国家标准《致泻大肠埃希氏菌检验》(GB4789.6-94)和行业标准《出口食品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌检验方法》(SN0169-92)进行分析比较.得出国家标准对大肠埃希氏菌的检验准确性更高,而行业标准的检验存在着漏检问题,所以,在选用标准时应引起注意.     

食品中阪崎肠杆菌和单增李斯特氏菌检测能力验证结果与分析

目的:验证本实验室对食品中阪崎肠杆菌和单增李斯特氏菌的检出能力。方法:按照能力验证作业指导书、《食品安全国家标准食品微生物学检验阪崎肠杆菌检验》(GB 4789.40-2010)和《食品安全国家标准食品微生物学检验单核细胞增生李斯特氏菌检验》(GB 4789.30-2010)进行检验。结果:样品14-P346检出阪崎肠杆菌,样品14-T795检出单核细胞增生李斯特氏菌。结论:组织者对本实验室此次能力验证实验结果评价满意,说明本实验室同时具有阪崎肠杆菌和单核细胞增生李斯特氏菌的检测能力。     

乳粉中单增李斯特氏菌的污染情况调查

为保证乳粉食品的安全,采用本室建立的奶粉中单增李斯特菌的传统检验方法.对国内外生产的82份不同品牌的奶粉进行了单增李斯特氏菌的调查研究.结果未检出单增李斯特氏菌.