金黄色葡萄球菌胶体金免疫层析试纸条开发及性能评估

开发了一种检测金黄色葡萄球菌的胶体金免疫层析试纸条。采用柠檬酸钠还原法制备胶体金,用胶体金标记金黄色葡萄球菌SPA蛋白的单克隆抗体,另一株SPA蛋白单克隆抗体包被于硝酸纤维素膜,制备成双抗夹心法胶体金免疫层析试纸条。该试纸条检测灵敏度为1×106 CFU/m L,能够识别金黄色葡萄球菌的不同菌株,与肠炎沙门氏菌、大肠杆菌、单核细胞增生李斯特菌及空肠弯曲杆菌等无交叉反应。通过样品加标检测,在25 g牛奶、肉、糕点和蔬菜等样品中加入2.5 CFU和25 CFU细菌,增菌后检测,并与国标法对比,检测结果与国标法一致。     

胶体金免疫层析法快速定量检测糙米中重金属离子铅

本研究建立了快速定量检测糙米中重金属离子铅的胶体金免疫层析试纸条分析方法。通过一系列的实验研究了该方法的灵敏度、重复性和特异性。结果表明用免疫胶体金法测定糙米中铅的检出限为0.041mg/kg,定量限为0.097mg/kg,方法重现性较好,使用胶体金免疫层析法和原子吸收光谱法同时检测加标样品,结果一致。因此,该方法适用于糙米中重金属离子铅的快速定量检测。     

胶体金免疫层析法快速检测乳制品中重金属离子铅

本研究建立了快速检测乳制品中重金属离子铅的胶体金免疫层析试纸条分析方法。通过一系列的实验,研究了该方法的灵敏度、重复性和特异性,结果表明用免疫胶体金法测定乳制品中生鲜乳和酸奶的检出限为25μg/kg,成品奶的检出限为30μg/kg,奶粉和奶酪的检出限为300μg/kg,方法重现性较好。使用胶体金免疫层析法和原子吸收光谱法同时检测加标样品,结果一致。该方法适用于乳制品中重金属离子铅的快速检测。     

单增李斯特菌内化素A单克隆抗体制备及胶体金免疫层析试纸条的研制

将单增李斯特菌的内化素A(InlA)基因片段进行密码子优化后,合成基因并插入到质粒载体pET28a中,构建原核表达重组质粒。经过乳糖自诱导表达后,获得了大小为48 kD的重组蛋白。用Ni亲和层析方法纯化重组表达后的InlA蛋白片段。用该蛋白免疫BALB/C小鼠,筛选高效的InlA单克隆抗体细胞株,并制备单克隆抗体,共筛选出3株亲和力较高的单克隆抗体,筛选得到的InlA单克隆抗体经过Protein G亲和层析纯化。研制双抗夹心法胶体金免疫层析试纸条,并对其敏感性、特异性等指标进行评价。该试纸条灵敏度达到1×10~6CFU/m L,用实际样本加标后,对该胶体金试纸条进行验证,并用国标方法做了对比。结果表明,该试纸条能满足样本中单增李斯特菌的检测要求。     

重金属离子镉快速检测及监测分析系统的评价

本研究建立在快速定量检测大米中,重金属离子镉的胶体金免疫层析试纸条分析方法,通过一系列的实验研究了该方法的准确度和精密度。结果表明该检测方法准确度和精密度较高,并且重金属离子镉快速检测及监测分析,该系统小巧轻便、操作简单、检测结果可以追溯,适用于粮库筛查和监测。     

玉米赤霉烯酮胶体金检测试纸的研制及定量检测的应用

目的:合成玉米赤霉烯酮(ZEN)人工抗原,制备抗玉米赤霉烯酮单克隆抗体(mAb),并以此为基础建立胶体金免疫层析检测试纸,于胶体金读数仪配合使用,用于玉米和小麦样品中ZEN的快速定量检测.结果:检测玉米和小麦样品,玉米赤霉烯酮的检测限为4.7 μg/kg,定量限13.9 μg/kg,线性范围14.5～500 μg/kg,相关系数r=0.9964.以GB/T 23504-2009免疫亲和柱-高效液相色谱法检测样品的结果为认定值,胶体金法检测样品的准确度在80.1％～149.7％,变异系数范围7.3％～19.6％.采用配对t-检验分析,2种方法无显著性差异.     

小麦中呕吐毒素不同检测方法的对比研究

为了研究小麦中呕吐毒素不同检测方法的差异性与相关性,寻找小麦入库作业时快速检测法可靠性范围,对45份小麦样品进行胶体金试纸条、ELISA、HPLC的检测。结果显示:试纸条法(1 000μg/kg)结果呈阴性为合格样品,呈阳性需HPLC复检;ELISA结果小于1 000μg/kg时为合格样品,结果为1 000~1 300μg/kg时需HPLC复检,结果大于1 300μg/kg为不合格样品。     

时间分辨荧光免疫层析法测定粮食中的黄曲霉毒素B_1

采用时间分辨荧光免疫层析试纸条及配套的荧光定量分析仪,对粮食中黄曲霉毒素B_1的快速检测进行了研究。结果表明,该方法的检出限为0.8μg/kg,定量限为2.6μg/kg,不同水平的加标回收率在94%～108%。选取标准质控样品进行测试,液相色谱法检测结果与该方法结果基本一致。该方法准确可靠,操作简便,适用于粮食中黄曲霉毒素B_1的快速检测。     

粮食中重金属镉定量快速检测方法的建立

开发了一种重金属镉的胶体金快速检测方法。利用IEDTA螯合镉离子,并与匙孔血蓝蛋白KLH偶联,合成镉离子抗原。经过免疫小鼠及细胞融合后筛选到镉离子的单克隆抗体细胞株。通过亲和层析的方法制备得到镉单克隆抗体,并建立了粮食样本中竞争法原理的重金属镉胶体金免疫层析定量检测方法。该方法检测灵敏度为50μg/kg,定量检测范围为50~400μg/kg。检测特异性良好,与其他常见的5种重金属离子无交叉反应。利用该检测方法与原子吸收法进行了大米样本检测对比。在20个样本中除1个样本由于检测灵敏度问题结果不符外,其余样本的检测结果均与原子吸收法符合,无显著差异。该研究为粮食中重金属镉检测提供了一个有效的途径。     

瘦肉精免疫法检测的现状与发展研究

伴随着人们对食品安全问题的日益关注,瘦肉精的检测方法也得到了越来越高的重视.免疫法检测具有分析速度快、特异性好以及检测成本低的优点,因此在瘦肉精检测领域当中得到了广泛的应用.本文分析了胶体金免疫层析技术、酶联免疫吸附测定方法和电化学与压电生物传感器等瘦肉精免疫检测法,并在此基础上对免疫法检测瘦肉精的未来发展做出了展望.     

克罗诺杆菌属快速检测技术的研究进展

本文对克罗诺杆菌的特性进行了介绍,并围绕基于分子生物学快速检测技术(包含PCR技术、荧光定量PCR技术、等温扩增技术、其他技术)和免疫学快速检测技术(包含免疫磁珠检测技术、酶联免疫吸附检测技术、重组酶等温扩增试纸条检测技术、荧光脂质体免疫检测技术)展开分析,以供参考.     

呕吐毒素胶体金三线定量检测条性能研究

为验证呕吐毒素胶体金三线定量检测条的性能,采用胶体金三线定量检测条和HPLC法对多种谷物样品进行检测,并对检测结果进行分析研究。结果表明,该方法检出限为118μg/kg,定量限为316μg/kg,检测结果与HPLC法无显著差异且相关性非常好。为了验证该方法的重复性,6个参与测试人员在相同实验室,按照同一方法,采用不同设备,检测相同样品,变异系数为4.7%~19.6%,平均变异系数为11.8%。为了验证该方法的特异性,选择DON结构类似物和其他5种生物毒素的标准品在阴性玉米中进行添加,添加浓度为1 000μg/kg,结果表明,呕吐毒素胶体金检测条对伏马毒素、赭曲霉毒素、黄曲霉毒素、玉米赤霉烯酮无交叉反应。因此,呕吐毒素胶体金三线定量检测条能满足粮食中呕吐毒素测定的要求,易于推广应用。     

水产品中硝基呋喃类代谢物残留危害及其常用检测方法

本文介绍了水产品中硝基呋喃类代谢物的危害,对其残留量的常用检测方法即高效液相色谱串联质谱法、高效液相色谱法、酶联免疫法、胶体金免疫层析法等进行了简介,并作了总结比较,为水产品中硝基呋喃类代谢物残留检测提供参考.     

胶体金免疫层析法检测牛奶中的环丙沙星残留

环丙沙星是恩诺沙星的代谢产物,伴随恩诺沙星在畜牧养殖中广泛应用,从而导致奶牛生产出来的牛奶中可能存在环丙沙星残留。为保障人们的身体健康,监测牛奶环丙沙星残留情况十分必要。本研究试图借助胶体金免疫层析法实现对牛奶环丙沙星残留的检测,结果表明,胶体金免疫层析法可以用来快速检测牛奶中的环丙沙星残留,值得在现场快速筛查中推广使用。     

几种真菌毒素快速检测技术分析

简便、快速、灵敏、准确、经济的真菌毒素分析方法是预防真菌毒素污染,保障食品安全的重要工具。近年来,随着色谱技术、免疫化学以及光、电、声等领域的不断发展,真菌毒素的检测技术出现了新的进展,特别是快速筛选和现场检测方面。综述了这些方面的一些进展,并重点介绍了基于抗原-抗体反应的快速检测方法,如试纸法、横向流动免疫检测技术、免疫生物传感器,以及其他正在发展的快速检测方法如光谱筛选方法等。这些方法将有望在今后的真菌毒素分析中得到广泛的应用。     

胶体金免疫层析技术在食品检测中的应用研究

在全球一体化的背景下,社会各界针对食品质量和安全提出了更严格的要求.本文介绍了胶体金免疫层析技术的原理与特点,说明了该技术的应用策略,展望了该技术未来的发展趋势,旨在为该技术在食品检测方面的科学应用提供参考.     

胶体金快速测试卡检测粮食中真菌毒素的应用

采用国家标准方法对脱氧雪腐镰刀菌烯醇和玉米赤霉烯酮2种真菌毒素的胶体金快速测试卡进行了验证,从验证的准确性、重复性、稳定性方面看,真菌毒素胶体金快速测试卡能够满足快速筛选的技术要求,方法简便快捷,适合粮食收购环节现场快速筛选检测工作。     

胶体金测试条法对粮食中玉米赤霉烯酮快速定量测定的应用研究

利用胶体金测试条法对粮食中玉米赤霉烯酮（ZEN）进行快速定量检测,结果表明,ZEN检测限为5μg/kg,定量限为14 μg/kg,30～1 000 μg/kg浓度范围内,相关系数r为0.998.采用有证实物参考物质进行比较,正确度在86.3％～153.9％,变异系数在8.4％～32.6％.采用配对t-检验,与高效液相色谱法的测定结果相比较,二者无显著差异.     

胶体金测试条法对粮食中黄曲霉毒素B1快速定量测定的研究

利用胶体金测试条法对粮食中黄曲霉毒素B1（AFTB1）进行快速定量检测，结果表明，AFTB。的检测限为2μg/Kg，定量限为5μg／kg，5～100μg／kg浓度范围内，相关系数r为0．9993。采用有证实物参考物质进行比较，正确度在74．3％-139．0％，变异系数在15．7％～26．4％。采用配对t-检验，与高效液相色谱法的测定结果相比较，二者无显著差异。     

水产品中氯霉素药物残留检测技术研究进展

氯霉素作为一种高效广谱抗生素,广泛应用于水产动物疾病的防治,但残留的氯霉素药物会对人体健康造成威胁。笔者综述了目前氯霉素药物在水产品中的前处理技术和检测方法,包括微生物法、免疫分析法、色谱法等,并对其特点进行分析,以期为水产品质量安全提供技术支撑。