朊病毒灭菌技术研究进展

传染性海绵状脑病（TSE）或朊病毒病（Prion diseases）是一组人类和动物中枢神经致死性神经退化性脑病。可分为人类TSE疾病和动物TSE疾病。人类TSE疾病包括人类克雅氏病（CJD）、库鲁病（Kuru）、吉斯综合症（GSS）、致死性家族失眠症（FFI）等；动物TSE疾病包括羊瘙痒病（SCraPie）、疯牛病（BSE）、鹿萎缩病（CWD）等。     

牛朊病毒正常蛋白特异性片段的克隆表达和纯化

[目的] 表达重组牛朊病毒正常蛋白特异性片段.[方法] 用所设计引物以聚合酶链式反应扩增出牛朊病毒正常蛋白特异性片段基因,利用DNA重组技术,将牛朊病毒正常蛋白特异性片段基因插入表达载体pET30a,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,将表达产物(包涵体)用8mol/L尿素溶解,在变性条件下用Cu2+氧化复性纯化.[结果] 重组表达质粒在大肠杆菌中得到了高效表达,目的蛋白分子量约为15KD,Western blotting分析表明,目的蛋白具有朊病毒蛋白的抗原特性,变性条件下用Cu2+氧化复性纯化得到电泳纯的重组蛋白.[结论] 这一工作为下一步制备抗体和进行结构、功能的研究打下扎实基础.