β-D-半乳糖苷酶活性测定方法的研究

应用分光光度计建立一种简便检测β D 半乳糖苷酶(GAL)活性的方法。酶反应条件研究表明,在总体积为1mL的0.1mol/L柠檬酸反应缓冲体系(pH值为4.5)中含0.8μmol的底物邻硝基苯β D 吡喃半乳糖(ONPG),含相当于2mg左右蛋白质的酶提取液,37℃孵育30min后用0.5mol/L碳酸钠1mL终止反应,用紫外分光光度计于405nm波长测定的吸光度值最能反映该酶活性。结果显示,该方法的批内变异系数在3.92%～4.89%之间,批间变异系数为3.8%,均小于5%;在所检测该酶质量浓度范围(1～2.5mg/mL)内线性关系良好,当反应体系的蛋白含量低于0.5mg/mL时,酶活性不能被检出;每组的平均回收率均在95%～105%之间,说明在所检测浓度范围内回收良好。因此,该方法具有稳定性好、灵敏度高、简便易行等特点,适合一般实验室应用。     

芒果苷对心肌缺血再灌注损伤TNF-a、MPO的影响

目的观察芒果苷对大鼠心肌缺血再灌注损伤（MI／R）TNF-α、MPO的影响。方法50只SD大鼠随机分为5组即假手术组、缺血再灌注模型组、芒果苷10mg/kg、20mg／kg、40mg／kg剂量组、假手术组给予等容量的生理盐水腹腔注射,完成模型全部操作只穿线不结扎。芒果苷10、20、40mg/kg剂量组分别给予相应剂量芒果苷腹腔注射21天,末次给药后一小时用于实验。采用左冠状动脉前降支结扎40min,再灌120min建立在体大鼠MIR模型。放免法检测心肌组织肿瘤坏死因子（TNF-α）含量;检测心肌组织髓过氧化酶（MPO）观察中性粒细胞（PMN）浸润、苏木素-伊红（HE）染色观察心肌组织病理改受,透射电镜观察心肌超微结构的改变。结果与模型组比较,芒果苷各剂量TNF-α和MPO含量显著降低（P〈0.01或P〈0．05）。结论芒果苷对MI／R有保护作用、芒果苷可减轻心肌细织中性粒细胞浸润,抑制炎症因子释放。     

环己酮七叶苷-β－Ｄ葡萄糖苷的研制及效果评价

[目的]研制李斯特菌显色培养基.[方法]合成环己酮七叶苷-β-D-葡萄糖苷(CHE-β-D-葡萄糖苷).通过22种菌对其检测效果进行验证.[结果]环己酮七叶苷-β-D-葡萄糖苷与七叶苷具有相同的检出效能;但其显色效果优于七叶苷,在环己酮七叶苷-β-D-葡萄糖苷琼脂培养基上,被分解的游离环己酮七叶苷不扩散,固定在细菌菌落上,形成黑色菌落,从而有利于准确地鉴别和计数.与此相反,七叶苷琼脂上的阳性菌落,其分解产生的黑色素向周围培养基扩散,难以分辨阳性和阴性菌落,影响鉴别和计数的准确性.[结论]与传统七叶苷显色培养基相比,环己酮七叶苷-β-D-葡萄糖苷显色培养基对分离和鉴定细菌存在很大优越性.