铁皮石斛RAPD反应体系的优化

采用改良SDS法提取铁皮石斛基因组DNA,A260/A280为1.8-2.0之间,经琼脂糖凝胶电泳证实其完整性较好,无降解。以此DNA为模板考察了dNTPs、MgCl2、引物、模板浓度四种因素在单独及组合条件下对RAPD-PCR扩增结果的影响,结果表明在25μlPCR反应体系中四种因素的浓度分别为0.25mmol/L、1.50mmol/L、0.32μmol/L、0.40ng/μl时,所扩增出的指纹丰富,条带清晰且无拖尾现象。