岩沙海葵毒素直接酶联免疫吸附检测方法的研究 |
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作者姓名: | 焦红 刘必勇 王家骥 林峰 |
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作者单位: | 广州出入境检验检疫局,广东,广州,510623 |
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基金项目: | 本项目为国家攻关计划课题,项目编号为2001BA804A20-2-4 |
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摘 要: | [目的]制备岩沙海葵毒素(PTX)多抗血清,纯化并标记辣根过氧化物酶,建立PTX多克隆直接酶联免疫吸附检测方法.[方法]将纯品毒素PTX与大分子蛋白质匙眼血蓝蛋白(KLH)分别巯基化,用化学法偶联二者成为半抗原,以其诱导BALB/c小鼠产生多价抗血清;以辣根过氧化物酶(HRP)标记PTX多抗血清;以PTX纯毒素作为包被抗原,HRP标记的多价抗血清为酶标抗体,建立PTX多抗直接ELISA检测方法.[结果]制备的抗PTX多价抗血清,经纯化后与HRP标记成功;建立的PTX多抗直接ELISA检测法,其最佳工作浓度为180.[结论]本研究制备的PTX人工免疫抗原具有较高的特异性和免疫原性,多克隆抗体为特异性抗PTX抗体,PTX多抗直接ELISA检测法对PTX的检测可达到5~10ug水平,该法应用于海产品中PTX快速检测的结果,待进一步研究.
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关 键 词: | 岩沙海葵毒素 多克隆抗体 酶联免疫吸附实验 |
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