白蛋白的纯化及鉴定

摘要：通过对白蛋白的表达上清进行纯化,得到高纯度的白蛋白,并对其浓度、纯度和特异性等进行鉴定。通过盐析使表达上清浓缩,透析脱盐后,经过强阳离子交换层析（SP Sepharose Fast Flow）,使用不同浓度的NaCl对表达上清进行梯度洗脱,得到的目的蛋白用BCA法测定其浓度,再用SDS—PAGE确定1／1的蛋白的分子量大小和洗脱浓度并使用Bandscan软件对其纯度进行分析,最后用Western blot鉴定目的蛋白的特异性。盐析使其表达上清10倍浓缩,经过SP Sepharose Fas tFlow介质纯化,在0．3M NaCl洗脱出目的蛋白,浓度为262．36μg／ml,纯度为96．9％,收率为31．54％。通过使用盐析和强阳离子交换层析的方法能够纯化出浓度和纯度都很高的白蛋白,并有较高的收率,为今后白蛋白的大规模生产奠定了基础,也为白蛋白的进一步研究开拓了更为广阔的前景。