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| 人源RAD9A基因真核表达载体的构建及其在肾癌细胞中的表达 | |
| 作者单位： | ;1.湖北理工学院肾脏疾病发生与干预湖北省重点实验室 |
| 摘 要： | 构建人源细胞周期检测点蛋白RAD9A基因真核细胞表达载体,转染至肾癌细胞786-0中,使EGFP-RAD9A融合蛋白得到高效表达。通过PCR法从293T细胞c DNA中扩增RAD9A基因编码区,经双酶切后连接入表达载体p EGFP-N1多克隆位点,并对阳性重组子进行鉴定。将p EGFPRAD9A转染至肾癌细胞786-0中,荧光显微镜观察GFP-RAD9A融合蛋白的表达及亚细胞定位,Western blot免疫印记法检测转染p EGFP-RAD9A后的肾癌细胞786-0中的融合蛋白。通过定向克隆的方法获得了含有RAD9A基因编码区的真核表达载体p EGFP-RAD9A。与对照组相比,转染p EGFP-RAD9A的肾癌786-0细胞中高效表达了EGFP-RAD9A融合蛋白,后者定位在786-0的细胞核。构建的RAD9A基因重组真核表达载体能够在肾癌细胞786-0中高效表达,为研究RAD9A在肾癌发生发展中的作用奠定了基础。 |
| 关 键 词： | 周期检测点蛋白RAD9A 定向克隆 真核细胞表达载体 肾癌 |
Construction of Eukaryotic Expression Vector of Human RAD9A Gene and Its Expression in Renal Carcinoma Cell |
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| Abstract: | |
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