磺胺-5-甲氧嘧啶酶联免疫分析试剂盒的研制与应用 |
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作者姓名: | 郑志高 王捍东 刘学忠 |
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作者单位: | 太仓出入境检验检疫局,江苏太仓,215400 扬州大学兽医学院,江苏扬州,225009 扬州大学兽医学院,江苏扬州,225009 |
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摘 要: | [目的]建立动物食品中残留磺胺-5-甲嘧啶的检测方法.[方法]用戊二醛法将磺胺-5-甲嘧啶(SMD)与牛血清白蛋白(BSA)或卵清蛋白OVA)偶联.用紫外分光光度计进行扫描鉴定.以制备的SMD-BSA人工抗原免疫BALB/C小鼠,取脾细胞与骨髓细胞(SP2/0-Ag14)融合,制备腹水,获得高效价的抗体.[结果]建立了间接竞争ELISA的测定方法,检测限为1.766ng/mL,定量限为11.274ng/mL.用SD、SMM、SQ等8种药物作为竞争抗原,做ELISA实验,结果显示抗体与这8种磺胺药没有交叉反应.制备了检测试剂盒,在肌肉、肝脏的样本中加入50ng/mL,100ng/mL做添加回收实验,回收率为87.45%~97.6%,变异系数为3.35%.[结论]本方法的检测限能够满足动物源性食品中SMD残留检测的要求,试剂盒灵敏度高,稳定性好,使用方便,适于基层大规模筛选.
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关 键 词: | 单克隆抗体 磺胺-5-甲氧嘧啶 间接竞争ELISA |
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