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人胶质瘤抑制候选基因2-GLTSCR2稳定表达HEK293细胞株的构建
作者单位:;1.湖北理工学院蛋白质修饰与肿瘤重点实验室
摘    要:为构建人GLTSCR2基因HEK293细胞稳定表达株,在HEK293细胞中获取c DNA,以c DNA为模板扩增GLTSCR2基因蛋白质编码区,经双酶切后连接入pBABE-GFP载体的多克隆位点,测序鉴定后将pBABE-GFP-GLTSCR2稳定转染至HEK293细胞,之后采用荧光显微镜观察与Western blot免疫印迹鉴定表达情况。结果为:扩增得到GLTSCR2基因蛋白质编码序列长度1 437 bp,与NCBI提供的序列信息100%匹配;GLTSCR2定位于HEK293的核仁;Western显示外源GLTSCR2正常表达。pBABE载体稳定表达体系可在HEK293中稳定表达flag-GFP-GLTSCR2,为后续的实验奠定了基础。

关 键 词:胶质瘤抑制候选基因2  稳定转染  逆转录表达载体  人胚肾细胞

Construction of Stable Expression Human Glioma Tumor-suppressor Candidate Region Gene 2 GLTSCR2 HEK293 Cells Strains
Abstract:
Keywords:
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