CHO细胞表达的乙肝疫苗纯化生产用离子介质清洗新方法研究

中华仓鼠卵巢细胞(CHO)表达的重组乙肝病毒表面抗原(HBs Ag)为糖基化蛋白。上游主要使用细胞贴壁培养工艺,下游主要使用疏水、离子交换、凝胶过滤层析。但由于培养后期,部分细胞脱落死亡,细胞中杂蛋白释放到上清液中,在纯化中影响离子介质载量、抗原收率和介质寿命,普通清洗方法不能有效恢复。本研究分别用70%乙醇+0.5M氢氧化钠、1M、2M氢氧化钠[1],与原有清洗方法0.5M氢氧化钠和新介质对比,对到达使用寿命的旧离子介质进行清洗,后相同条件进行层析。最终发现,2.0M氢氧化钠清洗后的介质,载量和收率均恢复,且原液质量符合标准要求。这不仅提高了收率、保证了原液质量,而且延长了介质寿命。