环媒恒温扩增技术及其在疫病检测中的应用

介绍环媒恒温扩增技术的基本原理、特点及其在疫病检测和诊断中的应用情况。环媒恒温扩增技术具有简便、快速、特异性和灵敏性强、扩增效率高等特点,被广泛应用于各种细菌性疾病、病毒性疾病、寄生虫病等很多方面的研究与检测。     

核酸扩增技术及其在动物检疫中的应用、挑战与对策

核酸扩增技术是一种在生物技术领域广泛使用的技术,可通过特定的方法将DNA或RNA片段扩增至百万倍甚至更高倍数,从而检测和识别这些片段。核酸扩增技术包括多种方法,如实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)、数字PCR技术（digital PCR,dPCR）、重组酶聚合酶扩增技术（recombinase polymerase amplification,RPA）等。在动物检疫方面,通过对动物体内特定病原体的核酸进行扩增,可以快速、准确地检测出该病原体,并采取相应的防控措施;通过对动物源性食品中的病原微生物进行核酸扩增,可以检测出食品中的细菌、病毒等有害物质,保证食品的安全性。随着技术的发展,核酸扩增技术将更加自动化、高通量和快速,灵敏度和特异性将进一步提高。随着微流控技术和纳米技术的发展,核酸扩增技术将变得更加便携,与人工智能、大数据等技术结合,实现智能化和信息化检测,多学科交叉将成为核酸扩增技术发展的重要趋势,有助于推动该技术的创新和应用。     

应用RT—PCR检测灭活疫苗中口蹄疫病毒（核酸）

应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测口蹄疫灭活疫苗中的病毒RNA.设计相应于病毒基因组VP1序列保守区段20mer长度的引物.分离出灭活疫苗水相,萃取总RNA,反转录合成cDNA,进行PCR扩增和电泳检测扩增产物,本引物对扩增片段长度483bp,并设计一个Marker作为对照.     

LAMP技术及其在水生动物疫病诊断中的应用

环媒恒温扩增技术（Loop-Mediated Isothermal Amplification，LAMP）是一种新颖的核酸扩增方法，其基本原理是采用4条特异引物及一种具有链置换活性的DNA聚合酶，在65℃左右对核酸进行扩增，短时间扩增效率可达到10^9～10^10个拷贝。LAMP具有高特异性、高效性、快速、简便、易检测等特点，目前已应用于人类及动植物细菌、病毒、寄生虫、真菌等病原体的检测，预计在动植物疫病检疫，尤其是水生动物疫病诊断领域有广阔的应用前景。     

环介导等温扩增技术及其在食品检测中的应用

环介导等温扩增技术是一种具有特异性强、操作简便、快速、高效扩增等优点的等温核酸扩增方法,可在数十分钟内完成,通过使用链替换核酸聚合酶。基于此,就环介导等温扩增技术的原理及其在食源性病原微生物的检测和食品的转基因成分检测方面做一综述。     

等温扩增技术在蚊媒传染性疾病检测方面的研究进展

蚊媒传染病是一类由蚊虫叮咬而进行病原体传播的自然疫源性疾病,预防和控制蚊媒传染病是极为困难的。等温扩增技术是一种可以在恒定温度下进行核酸扩增的技术,具有仪器依赖性低、检测效率高、灵敏性好、特异性强等特点,十分适合在野外环境或者疫病现场进行快速检测。本文就等温扩增技术中的环介导等温扩增（loop-mediated isothermal amplification,LAMP）、重组酶聚合酶扩增（recombinase-polymerase amplification,RPA）、重组酶介导等温扩增（recombinaseaid amplification ation,RAA）、依赖核酸序列的等温扩增（nucleic-acid sequence-based amplification,NASBA）、依赖解旋酶的等温扩增（helicase-dependent amplification,HDA）、交叉引物等温扩增（crossing-priming amplification,CPA）的原理、特点,以及其在寨卡病毒（ZIKV）、登革热病毒（DENV）、黄热病毒（YEV）、基孔肯雅病毒（CHIKV）...     

蛙病毒属PCR检测方法的建立及其在甲鱼“红脖子”病病原鉴定中的应用

在GenBank中搜寻EHNV相关序列并进行多重比较后,利用其中的保守序列设计引物,建立了聚合酶链式反应(PCR)的检测方法,扩增蛙病毒属主衣壳蛋白(MCP)410 bp的DNA片段.用该方法从患"红脖子"的甲鱼中分离的病毒毒株(9701株)中扩增出特异性的片段.对扩增产物进行基因克隆、序列测定和序列分析,结果表明该片段和蛙病毒属其他病毒MCP的编码基因同源性都在96%以上,和牛蛙虹彩病毒的基因序列相似性为100%,因此初步判定9701株属于蛙病毒属.     

SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测猪繁殖与呼吸综合征病毒

根据GenBank发表的猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）M基因核苷酸序列设计一对特异性引物,扩增位置在M基因的14744～14846位,片段长度为103bp。提取PRRS RNA,并反转录成cDNA,以此cDNA为模板建立了SYBR Green Ⅰ实时定量PCR检测PRRSV的方法。并用该方法检测送检的临床疑似病料,结果表明,本研究建立的PRRSV-SYBR Green I PCR特异性强,操作简单,耗时短,只需3h即可完成整个实验过程,可初步用于临床检测。     

原子力显微镜观察新布尼亚病毒HB29株结果的初步分析

[目的]利用原子力显微镜对新布尼亚病毒进行观察。[方法]超速离心制备新布尼亚病毒HB29株,采用磷钨酸负染透射电子显微镜进行观察;制备新布尼亚病毒的原子力显微镜样片,在此基础上对病毒进行原子力显微镜观察,采用轻敲模式在大气常温下进行扫描成像。[结果]透射电子显微镜观察到新布尼亚病毒球形病毒粒子,并提供病毒二维图像,可见刺突结构;原子力显微镜则呈现了新布尼亚病毒三维图像,且可见病毒表面有凹凸不平的特征和边缘不平滑,同时获得表面粗糙度等可量化指标。两种方法最终得到相似的形态学结果。[结论]利用原子力显微镜首次观察到新布尼亚病毒的三维形态结构,与透射电镜观察相比,原子力显微镜是一种制样简单,观察直观的新型病毒形态学研究工具。     

近三十年来人性研究综述

人性研究具有明显的时代特征。从文献检索看,国内近三十年来人性研究主题围绕党的指导思想而流变,依次为异化与人道主义（1978-1985）、主体性（1986-1990）、市场经济中人的价值（1991-1995）、人性的内涵与特征（1996-2000）、人性与制度（2001-2005）、人性与教育（2006-2009）。这对我们概览人性的时代特征和理论建构起到一定参考作用。     

鲤春病毒核酸检测方法研究进展

对鲤春病毒核酸检测方法的基本原理和应用情况进行了论述,主要包括RT-PCR、荧光定量RT-PCR、环介导等温扩增技术等,并总结了各方法的特点和发展前景。     

旋毛虫实时荧光PCR检测方法的建立与应用研究

根据旋毛虫隔离种线粒体Ls-rRNA基因序列,设计一对特异性引物及TaqMan MGB探针。以Ls-rRNA阳性重组质粒为模板,建立了旋毛虫实时荧光PCR检测方法。该检测方法对各旋毛虫隔离种具有良好的特异性,而对小鼠、狗和猪正常肌肉组织、猪鞭虫、猪蛔虫、猪钩虫、犬蛔虫等无交叉反应。最小检出量为1.32×10^2拷贝（10^-5条旋毛虫）,建立的标准曲线拟合良好,扩增方程Y=-3.43X＋19.70,相关系数R^2=0.9984,扩增效率为95%。平行检测组内变异系数为1.11%（n=20）,同一组不同浓度梯度样本（n=9）间隔30d重复检测,结果无显著性差异。人工感染不同剂量猪旋毛虫的小鼠,在攻虫14d后检出率100%。对经压片镜检、人工胃液消化、胶体金试纸条检测结果为阴性的63份送检狗肉样本中敏感地检出8个阳性。     

地方本科高校申报国家自然科学基金项目之思考——以福建地方本科高校为例

地方本科高校申报国家自然科学基金的获准率普遍偏低，究其原因既包括高校本身的“软硬件”条件的欠缺，更重要的是申请人在选题及申请书撰写过程中存在的问题所致。地方本科高校如何根据学校实际情况，在基金委“二十四字方针”的指导下，充分发挥地方优势学科和特色等有利条件，摸索行之有效的申报策略，以求在基金项目获批资助上有所突破，文章以福建地方本科高校的申报经验为例，从科研管理工作的角度出发，在总结基金申报中常见的落选原因的基础上，提出高校应加大基础条件的建设力度，科研人员应进行创新型、特色型选题并认真撰写申请书等建议。     

有利于穷人的经济增长之规范性分析

中国改革开放20多年虽然在经济上取得了巨大成就，但是随着经济发展与财富增长，国内民众利益再次出现分化。中国的实践再一次表明经济增长并不会自动、均等地惠及所有人。在2000年联合国提出“千年发展目标”以后，“有利于穷人的经济增长”（PPG）在国际范围引起经济研究者的广泛关注，而它对于中国广大的经济爱好者似乎还是一个新名词。基于国内研究现状，本文主要对PPG及其相关内容进行规范性分析，内容包括有利于穷人增长的类型、内涵、特点及其度量指标体系。     

PMA—PCR技术在植物病原细菌检疫中的应用前景

介绍了PMA-PCR技术检测活菌的方法,列举了该方法在食品、医疗和环境微生物检测领域的应用研究情况,并讨论了PMA．PCR技术在植物病原细菌检疫工作中的应用前景。     

大力发展4PL的重要意义分析

通过对现代物流发展趋势进行分析,以及对3PL(Third Party Logistics)和4PL(Fourth Party Logistics)的特点和区别进行探讨,提出在现代物流中3PL和4PL的发展关系,并分析其对现代物流发展的意义即解决现代物流发展的瓶颈,增强我国物流的国际竞争力等。