水苏碱对肾纤维化大鼠肾组织 CHOP、caspase-3作用

研究水苏碱对肾纤维化大鼠肾组织CHOP、caspase -3作用的研究．采用单侧输尿管梗阻（ UUO）诱导大鼠肾间质纤维化动物模型,以依那普利为阳性对照药,将大鼠随机分为假手术组、模型组、依那普利组、水苏碱高、中、低剂量组．术后第14 d处死大鼠,收集血清测定血肌酐（ Scr ）、尿素氮（ BUN）;采用HE染色检测肾小管损伤指数,Masson染色对肾间质胶原相对面积进行半定量分析;采用免疫组织化学方法检测肾组织中内质网应激特异转录因子（ CHOP ）、细胞凋亡因子天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3（caspase-3）的表达．各治疗组与模型组比较大鼠肾小管间质损伤指数、肾间质纤维化程度、血清Scr、BUN水平及肾组织CHOP、caspase-3蛋白表达有差异（P＜0．05; P＜0．01）．水苏碱与依那普利组比较,大鼠肾组织CHOP、caspase-3表达降低（P＜0．05）,肾小管间质损伤及肾间质纤维化程度明显降低（P＜0．05）,肾功能Scr、Bun明显降低（P＜0．05）．水苏碱可能通过下调内质网应激相关凋亡途径CHOP、caspase-3表达,干扰内质网应激特异转录因子的传导通路,抑制细胞凋亡的表达,从而减缓肾间质纤维化的发生和发展．     

LPS烟雾干预下的大鼠COPD膈肌细胞凋亡模型研究

使用雄性SPF级Wistar大鼠45只,随机分为A、B、C3组,每组各15只,各组再各分为造模前、造模2周、造模4周3个亚组,每亚组5只．A组正常喂养,B组采用低氧法,C组采用气管注入LPS联合烟雾法造模．采用TUNEL及免疫组织化学法,检测各组膈肌细胞凋亡率及Caspase-3的表达,4周后,经肺HE切片光镜下分析,造模组均符合典型COPD大鼠肺部表现．并计算平均肺泡数（MAN）、肺泡腔与肺总面积比（PAA）,A、B、C组膈肌细胞凋亡率及Caspase-3的表达：A组随时间推移,各亚组间无显著差异;B、C组随时间推移,造模2周、4周亚组细胞阳性率显著高于A组,同期亚组（P〈0．01）,B、c组内各2周、4周亚组间差异显著（P〈0．05）;B、C造模组间各2周、4周亚组间无统计学差异（P〉0．05）。结果是低氧、烟雾、LPS3种因素都能使大鼠膈肌细胞凋亡,LPS联合烟雾造模组,形成了具有鲜明的COPD大鼠模型特征,更符合COPD大鼠发病机制,为大鼠膈肌细胞凋亡的造模提供了一个选择。     

新型吡啶氮唑氮芥化合物与线粒体的作用及其抗肿瘤活性

线粒体是抗肿瘤药物的重要靶点,研究药物分子与线粒体之间的作用有助于明确药物作用机制。设计并合成了靶向线粒体类抗肿瘤药物新型吡啶氮唑氮芥化合物N,N'-(1,1'-(吡啶-2,6-二取代双(亚甲基))双(1H-1,2,3-三唑-4,1-二基))双(亚甲基)双(2-氯-N-(2-氯乙基)乙胺),探究了其抗肿瘤作用机制,用MTT法检测了该化合物的细胞毒性作用,发现其对A549细胞表现出良好的抑制作用。该化合物作用于A549细胞引起细胞凋亡,DCFH-DA及JC-1染色表明该化合物通过引发细胞内ROS水平升高,继而引发线粒体功能障碍,途径诱导A549细胞凋亡。WB结果表明细胞凋亡的线粒体途径中凋亡促进蛋白Bax表达水平升高,凋亡抑制蛋白Bcl-2表达水平降低,进一步证实了该化合物通过线粒体途径引发A549细胞凋亡。     

灵芝酸G诱导Vβ3~+CD8~+T细胞抗肿瘤活性的研究

为探讨SEA(Staphylococcus Enterotoxin A,SEA)存在下的灵芝酸G(Licochalcone-G,LG)对小鼠CD8+细胞活化及杀伤肿瘤细胞的作用,采用流式细胞技术分别检测CD8+细胞表面分子表达及活化后细胞内的颗粒酶B(Granzyme B,Gr B)和穿孔素(Perforin,Pf)的水平、Caspase-3酶的活性分析肿瘤细胞凋亡。结果为:SEA组和SEA+LG组经过3 d刺激能激活小鼠CD8+细胞Vβ3和Vβ11分别为7.4±0.45,11.5±0.72。体外实验显示,SEA组和SEA+LG组的Vβ3+CD8+T细胞内Gr B%的水平分别为70.2±8.04,91.6±8.16;Pf%的水平分别为67.3±6.86,86.4±7.17,与对照组相比有显著性差异(t=5.24,t=6.43;t=4.31,t=5.47,P0.01);SEA组和SEA+LG组的HL-60肿瘤细胞内Caspase-3酶的活性分别为37.6±4.81,68.8±6.82,与对照组相比有显著性差异(t=3.18,t=5.27,P0.01);SEA组和SEA+LG组的A20肿瘤细胞内Caspase-3酶的活性分别为23.7±3.58,54.1±5.71,与对照组相比有显著性差异(t=4.23,t=4.88,P0.01)。SEA依赖的LG能促使小鼠CD8+T细胞Vβ3和Vβ11分子活化,活化的Vβ3+CD8+T细胞内分泌大量的Gr B和Pf,并通过Caspase-3的信号途径诱导肿瘤细胞凋亡。     

菊米提取物总黄酮对自发性高血压大鼠的降血压效果观察

在对大鼠建立高血压模型的基础上,进行菊米提取物总黄酮干预,分为SHR对照组、硝苯地平对照组（7.5mg/kg.d）、高剂量组（3.15g/kg.d）、中剂量组（1.575g/kg.d）和低剂量组（0.639g/kg.d）,利用无创血压测量仪检测不同时间段大鼠尾动脉血压及心率变化。结果显示：单次给药时,总黄酮各剂量组在给药后3h显著降低血压和心率,持续时间短;连续给药时,总黄酮各剂量组维持降压水平达到4h,总黄酮降血压和心率的能力较硝苯地平起效慢,各剂量组间降血压心率能力无显著性统计学差异。由此得出：菊米提取物总黄酮能有效降低自发性高血压大鼠（SHR）的血压和心率,对轻中度高血压有较好的远期疗效。     

鼠神经生长因子对糖尿病大鼠皮肤损伤的促愈合作用

为研究鼠神经生长因子(mouse nerve growth factor,m NGF)对糖尿病大鼠皮肤损伤的愈合促进作用,将雄性SD大鼠,连续2 d,每天1次腹腔注射70 mg/kg链脲霉素建立糖尿病模型,以血糖≥11.1 mmol/L为糖尿病合格模型。糖尿病大鼠随机分成2组,建立皮肤缺损模型和皮肤烫伤模型。m NGF(3,6,12μg/kg)肌肉注射,每天1次,连续21 d。于治疗第0,3,7,10,14和第21 d拍创面照片,测量创面面积。给药结束后处死动物取创面组织,采用苏木精-伊红染色(henatoxylin-eosin staining)法观察创面中成纤维细胞、纤维细胞、胶原纤维和毛细血管生长情况。结果为:与模型组相比,m NGF各剂量对大鼠皮肤切割性损伤创面面积的促愈合速率无显著性差异;HE染色结果显示,m NGF能显著性促进创面纤维细胞和毛细血管的形成。m NGF各剂量对大鼠皮肤烫伤创面的促愈合速率显著高于模型组,且各剂量之间有显著的量效关系;HE染色结果显示,m NGF能显著性促进受损皮肤纤维细胞和毛细血管的增生。m NGF能明显促进糖尿病大鼠皮肤损伤的愈合。     

体外诱导大鼠骨髓干细胞向肝细胞样细胞的分化

以贴壁细胞分离法分离大鼠骨髓干细胞，体外扩增，采用细胞因子诱导骨髓干细胞定向分化为肝细胞。大鼠骨髓干细胞（MSCs）体外扩增后数量剧增，各诱导组细胞胞浆内可见红染的糖原颗粒；诱导培养4周，细胞上清尿素合成、ALT、AST水平随诱导时间的延长而增加，于第28天达到高峰。Westem—blot检测表明，诱导4d的细胞开始表达AFP蛋白，7d后达到高峰。以FGF-4联合HGF因子组诱导后肝细胞特征最显著。以细胞因子FGF-4、HGF、EGF为主的诱导培养体系能促使骨髓干细胞定向分化为肝细胞，其中FGF-4联合HGF细胞因子的应用更能提高骨髓干细胞定向分化为肝细胞的转化效率。     

热休克蛋白110的研究进展

热休克蛋白是一种由应激环境引起的合成量增加的高度保守的蛋白质．人们按分子量大小将热休克蛋白分为以下几个家族：小分子热休克蛋白、HSP40、HSP60、HSP70、HSP90、HSP110等．热休克蛋白110是热休克蛋白70家族的一个分支,在一系列细胞活动中有重要作用,是一个由不同种类蛋白构成的分子伴侣家族,主要被发现在真核细胞的细胞质中．HSP110家族成员是有效的分子伴侣,可以防止蛋白质聚集,在HSP70存在的情况下,帮助热变性的蛋白质再折叠．随着A．,ff3对HSP110研究的不断深入,其在肿瘤治疗和预防中的意义已经引起广泛关注,成为近年来研究热点之一．     

肌肤相亲对新生儿窒息患儿生长发育和免疫功能的影响

为观察肌肤相亲对新生儿窒息患儿生长发育和免疫功能的影响,将72例新生儿窒息患儿随机分为肌肤相亲组A组和传统治疗组B组各36例,2组患儿喂养方法相同并给予综合治疗方案。B组实施常规护理;A组在常规护理基础上,住院期间和出院后增加肌肤相亲(抚触和被动运动)进行干预。2组患儿于3个月、6个月时进行体检,观察体重、身长、头围、智能、运动发育指标及30 d时免疫指标IgG、IgA、IgM的变化。结果为:3个月及6个月时A组体重、身长、智能发育指数和运动发育指数均明显优于B组;30 d时A组体液免疫学指标IgG、IgA、IgM含量与B组比较也存在显著性差异。肌肤相亲早期干预能促进新生儿窒息患儿生长发育,并能增强其免疫功能。