日本和牛肉真实性鉴别技术研究

建立了鉴别日本神户牛肉真实性的分子生物学检测技术。通过对来源于10个品种的牛的样品的分析,发现了牛生长激素基因第五外显子的品种间多态性位点,并通过比较分析,确定了日本和牛在这些多态性位点的特异核苷酸组合,建立起了日本神户牛肉的分子生物学识别技术。采取了47份市售牛肉对方法进行了验证,证明该方法在应用于国内市场的神户牛肉的真实性鉴别上,具有很好的特异性,可以用于区分日本神户牛肉和国产牛肉以及国内生产的所谓日本黑牛肉。     

一种真鲷虹彩病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立

真鲷虹彩病毒一直被世界动物卫生组织列入必报疫病病原目录,该病毒与传染性脾肾坏死病毒在基因序列上没有区别。为了快速检测病原,本文根据传染性脾肾坏死病毒主要衣壳蛋白序列中一段基因保守区设计引物和TaqMan探针,建立了真鲷虹彩病毒特异性实时荧光定量PCR检测方法,并利用PCR反应扩增出的衣壳蛋白基因制备了pGEM-T/真鲷虹彩病毒重组质粒作为标准阳性对照。经试验,反应在模板量102-106拷贝浓度范围内有较好的线性关系,检测限最低可达100拷贝数,而且与流行性造血器官坏死病毒、甲鱼虹彩病毒等6种水生动物病毒无交叉反应。结果证明该方法具有简便、快速、敏感、特异等特点,它的建立为该病诊断与病原检测提供了一个重要手段。     

生物技术在海产品检测中的应用

现代生物技术的迅猛发展使食品检测手段更加的多样化,也更加准确、快速和安全,海产品以味道鲜美、营养成分高、高蛋白低脂肪和含有大量人体必需氨基酸等特点越来越受到大家的青睐,海产品的安全问题也越来越受到重视。本文概述了以核算探针、PCR技术和生物芯片为代表的现代生物技术在食品安全检验中的作用和优点。     

基于PCR的区域旅游国际竞争力影响因素

利用主成分回归方法(PCR),对区域旅游国际竞争力的影响因素进行了定量研究。区域旅游国际竞争力的影响因素分为8个定量因素和1个定性因素。以中国31个省级区域的横截面数据为样本,利用主成分回归分析方法得到了各个影响因素的相对贡献率。得出结论:①区域旅游竞争力受到区域旅游产业因素、区域环境因素和区域与客源地的联系因素三方面的共同影响;②区位条件对于区域旅游竞争力具有显著影响;③当前影响我国各区域旅游国际竞争力的五个最重要的因素是可进入性、旅游企业竞争能力、旅游资源、经济环境、基础设施。     

DNA探针和PCR技术在食品检测中的应用

DNA探针和PCR(Polymerase Chain Reaction聚合酶链式反应)技术是近年来发展起来的两种高新生物技术,并以其敏感性、特异性、简便、快速的优点,在食品科学领域得到了广泛的应用.该文着重介绍了这两种技术的基本原理及其在食品检测中的应用概况,并对其在食品检测领域里应用存在的问题进行了分析和阐述.     

4种常见食源性病原菌多重PCR检测技术研究

为了解决常规方法检测食源性病原菌存在操作繁琐、周期长的问题,基于4种常见食源性病原菌特异基因序列扩增提出了一种快速、高效的多重PCR（multiplex polymerase chain reaction,MPCR）检测方法。根据单增李斯特菌iap基因、蜡样芽孢杆菌gyrB基因、产志贺毒素大肠埃希氏菌stx Ⅰ 基因、肠炎沙门氏菌invA基因的特异序列分别设计引物后建立MPCR反应体系,测试其特异性、敏感性和可行性,并与国标培养法进行比较。结果表明：MPCR扩增出4个目标基因的特异性条带大小依次为371、221、432、171 bp;在58 ℃的退火温度下,MPCR扩增表现出良好的特异性,无非特异性扩增,4种病原菌最低检出限达到10² CFU/mL;MPCR方法和国标培养法对多种食源性病原菌感染的牛奶样品的检测结果完全一致,检测周期由原来的5～7 d缩减到8～9 h。所建立的MPCR技术作为一种快速、高效的检测方法,可为食品安全生产提供保障。     

犬钩端螺旋体PCR检测方法的应用

采用荷兰皇家热带病研究院WHO钩体病参考中心设计的一对引物进行普通PCR检测。经反应条件与体系优化,对犬钩端螺旋体与霍乱弧菌,伤寒杆菌,沙门氏菌,产毒性大肠杆菌,致病性大肠杆菌,痢疾,溶藻菌,非O1、O139霍乱弧菌,副溶血性弧菌,O157菌进行检测,除犬钩端螺旋体以外均为阴性,表明钩端螺旋体PCR检测方法与以上菌株无交叉反应,证明了该钩端螺旋体PCR检测方法具有特异性;双链DNA灵敏度检测结果显示PCR方法可以检测到的核酸浓度最低为3×10³拷贝。此结果证明该犬钩端螺旋体PCR检测方法具有较好的特异性和灵敏度,可用于犬钩端螺旋体样品的检测。     

弗尼斯弧菌PCR检测方法的建立及应用

目的:弗尼斯弧菌(Vibrio fumissii)是引起世界范围内胃肠功能紊乱的致病菌之一,一般通过摄人生的或者未煮熟的水产品进行传播。本研究旨在建立高效、可靠的PCR检测方法应用于食品中弗尼斯弧菌的快速检测。方法和结果:根据弗尼斯弧菌的toxS基因分别设计普通PCR引物及实时PCR引物、探针,建立普通PCR和实时荧光PCR方法,分别对两种方法的特异性和灵敏度进行比较分析,同时应用于384份食品样品检测。结果表明,建立的普通PCR和实时荧光PCR方法特异性良好,检测灵敏度分别为:2.4×10^3 CFU/ml和24 CFU/ml,并于5 h内完成整个检测过程,同时对384份食品进行检测,共检出6株阳性菌株。结论:本研究建立的PCR检测技术灵敏度高、特异性好,可应用于食品中弗尼斯弧菌的快速检测。     

食品沙门氏菌检测中PCR技术的应用分析

沙门氏菌已经成为了导致人们食物中毒的重要病源之一,因此创建有效的、科学的检测方法十分重要。而PCR技术主要是一种体外核酸扩增技术,其主要的优点是特异性高、敏感性强、简单快速等,目前已经被广泛运用到了生物学、医学等领域。本文简单阐述了PCR技术在沙门氏菌快速检测中的应用,并对PCR技术在沙门氏菌检测中的应用前景进行总结与展望,旨在提升沙门氏菌检测的质量与效率。     

食源性致病微生物中应用于PCR检测的靶基因

介绍了8种常见食源性微生物致病性大肠埃希菌、沙门菌、金黄色葡萄球菌、副溶血弧菌、霍乱弧菌、单核细胞增生李斯特菌、肉毒梭菌、产气荚膜梭菌的PCR法检测中常用的靶基因,主要是一些编码特征毒素和其他的毒力因子的基因.