2009年中俄满洲里-后贝加尔斯克口岸地区蚤类调查

本文报告了2009年8月在满洲里-后贝加尔斯克口岸地区进行鼠传疾病联合监测时的蚤类调查结果。在中俄双方口岸地区分别捕获蚤类5种285匹和8种160匹,中方蚤类的宿主多,鼠体染蚤率和总蚤指数均高于俄方。     

表面活性剂处理炭疽杆菌的原子力显微镜研究

利用AFM观察经表面活性剂处理的炭疽杆菌繁殖体形态,研究不同表面活性剂对细菌的作用。用同一浓度的非离子型表面活性剂NP-40、Span-20、Span-80、Igepal CA-210、Igepal CA-520、Igepal CA-630,对完整的炭疽杆菌菌株进行处理,经AFM成像,观察不同表面活性剂对菌体形态的破坏程度。结果不同的表面活性剂对菌体破坏程度不一,但菌体形态均被破坏,表面形态变得不规则,菌体内部物质不均匀分布。表面活性剂作用后的炭疽杆菌微观形貌与正常菌体相比,因表面活性剂亲水亲油平衡值（HLB）不同而不同,随着HLB值的增加,菌体的破坏程度和表面粗糙度也在增加。本实验为研究炭疽杆菌对不同试剂的抗性提供了形态学方面的基础,也为不同表面活性剂作为消毒剂方面的研究提供了形态学基础,可提供一种较为温和的细菌裂解条件。     

快速检测西尼罗病毒胶体金免疫层析试纸条方法的建立

[目的]建立一种能快速区分、简便诊断西尼罗病毒感染的胶体金免疫层析试纸条方法。[方法]采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记西尼罗病毒NS1蛋白,采用双抗原夹心法制备胶体金免疫层析试纸条,对试纸条进行特异性和敏感性评价。[结果]该试纸条可在15min之内完成检测;在敏感性上,该试纸条对阳性血清的检测较美国Focus公司商品化的ELISA试剂盒检测低1个滴度;对89份阴性血清进行检测,试纸条检出9份阳性,ELISA试剂盒检出3份阳性,两种检测的符合率为86.52%,特异性为89.89%。[结论]初步建立了一种可以用于现场快速检测西尼罗病毒的胶体金免疫层析方法,为进一步大规模应用奠定了基础。     

新布尼亚病毒流行病学及检测方法的研究进展

着重对近期关于新布尼亚病毒基本特性、国内外流行病学特点、检测方法等方面的研究进展进行综述。应用原子力显微镜观测病毒的基本形貌获得相关数据;流行病学方面SFTS病例也陆续在日本、韩国等国家有发现和报道;检测方面除针对病毒不同基因组的荧光定量方法外,还有反转录环介导的等温扩增技术,以及通过将反转录交叉启动扩增和垂直流偶联快速准确的检测该病毒。     

西尼罗病毒NS1蛋白的原核表达及其免疫原性研究

[目的]采用大肠杆菌表达系统表达西尼罗病毒NS1蛋白,并对表达产物进行免疫原性分析。[方法]将WNV NS1基因克隆入pET30a载体,获得重组表达质粒pET30a-WNV-NS1,并转化入BL21感受态细胞,将表达产物进行SDS-PAGE和W estern-blot分析,经N i＋亲和层析纯化、阴离子交换层析后获得纯化的WNV NS1蛋白;将纯化产物免疫新西兰兔,获得的免疫血清作ELISA检测。将重组蛋白包板,检测FOCUS公司商品化试剂盒中的阳性血清。[结果]（1）重组WNV NS1蛋白获得表达并纯化成功。（2）Western blot结果显示表达的蛋白是带有H is标签的目的蛋白。（3）兔免疫血清的间接ELISA结果显示血清效价达到1：50000以上。（4）检测商品化试剂盒中的阳性血清,其OD450吸光值与阴性血清吸光值之比大于2。[结论]重组NS1蛋白能在大肠杆菌系统中获得表达;纯化产物具有免疫原性,而且可以作为抗原检测西尼罗病毒感染的血清,为进一步研究NS1蛋白的生物学特性及西尼罗病毒的诊断试剂奠定了基础。     

原子力显微镜观察新布尼亚病毒HB29株结果的初步分析

[目的]利用原子力显微镜对新布尼亚病毒进行观察。[方法]超速离心制备新布尼亚病毒HB29株,采用磷钨酸负染透射电子显微镜进行观察;制备新布尼亚病毒的原子力显微镜样片,在此基础上对病毒进行原子力显微镜观察,采用轻敲模式在大气常温下进行扫描成像。[结果]透射电子显微镜观察到新布尼亚病毒球形病毒粒子,并提供病毒二维图像,可见刺突结构;原子力显微镜则呈现了新布尼亚病毒三维图像,且可见病毒表面有凹凸不平的特征和边缘不平滑,同时获得表面粗糙度等可量化指标。两种方法最终得到相似的形态学结果。[结论]利用原子力显微镜首次观察到新布尼亚病毒的三维形态结构,与透射电镜观察相比,原子力显微镜是一种制样简单,观察直观的新型病毒形态学研究工具。     

定量检测SARS-CoV N蛋白的悬浮芯片方法研究

利用悬浮芯片技术,建立定量检测SARS-CoV N蛋白的悬浮芯片方法。用抗体包被编码微球作为反应载体,双抗体夹心法为反应模式,建立了SARS冠状病毒悬浮芯片检测方法,通过盲样和实验室标准检测等评估,表明适用于现场样品的检测。检测SARS冠状病毒N蛋白的灵敏度为4.86 ng/mL,在4.86-25600 ng/mL浓度范围内具有良好的动力学响应特性,比ELISA方法有较高的灵敏度和较宽动态检测范围。在早期识别、快速诊断和应对生物恐怖威胁、传染病暴发中具有广阔的应用前景。