hTNF β、h1FN γ融合基因(h γ TNF β)的重组与其表达产物的纯化和功能研究

rhTNF β和rhIFN γ均为多效性细胞因子,因TNF β N端和IFN γ C端的缺失体,不仅可增加其抗癌的细胞毒效应并可降低对机体的副作用,而两者对瘤细胞的杀伤又有一定的协同作用.据此,应用高效表达质粒pBV220、pREST和pET等分别构建成hlFN γ突变体表达质粒及其与hTNF β N端缺失体相融合的h γ TNF β表达质粒,并获得表达量分别为18%和45%的工程菌株(表达产物均以IB存在于菌体),与此同时还构建了表达量为15%左右的His6-hTNF β的质粒及其工程菌,并对产物纯化和保持其活性等方法进行了研究.……     

hTNFβ、h1FNγ融合基因(hγTNFβ)的重组与其表达产物的纯化和功能研究

rhTNFβ和rhIFNγ均为多效性细胞因子,因TNFβN端和IFNγC端的缺失体,不仅可增加其抗癌的细胞毒效应并可降低对机体的副作用,而两者对瘤细胞的杀伤又有一定的协同作用。据此,应用高效表达质粒pBV220、pREST和pET等分别构建成hlFNγ突变体表达质粒及其与hTNFβN端缺失体相融合的hγTNFβ表达质粒,并获得表达量分别为18％和45％的工程菌株(表达产物均以IB存在于菌体),与此同时还构建了表达量为15％左右的His6-hTNFβ的质粒及其工程菌,并对产物纯化和保     

嗜水气单胞菌穿梭质粒载体pBKPU01的构建、表达和鉴定

为构建嗜水气单胞菌穿梭质粒载体,试验根据质粒pBK760基因序列设计特异性引物,对质粒pBK760进行PCR扩增,并将纯化后的PCR产物连接到pMD20载体中,构建嗜水气单胞菌穿梭质粒载体pBKPU01,提取重组质粒载体进行鉴定,转化大肠杆菌感受态细胞,筛选阳性转化子,最后将阳性转化子转入嗜水气单胞菌,获得具有标记抗性基因的嗜水气单胞菌。结果显示,构建的嗜水气单胞菌穿梭质粒载体pBKPU01经PCR和酶切鉴定正确,并且能在大肠杆菌中表达,表明质粒pBK760成功插入pMD20载体中,嗜水气单胞菌穿梭质粒pBKPU01构建成功。     

禽多杀性巴氏杆菌ompa DNA疫苗在小鼠体内免疫效果试验

应用PCR技术扩增获得禽多杀性巴氏杆菌的ompa基因片段,克隆到pUCm-T载体,再亚克隆到真核表达质粒载体pCDNA3.1(+)上,构建重组质粒pcA,体外转染Vero细胞,RT-PCR和间接免疫荧光试验检测其转录表达情况.动物免疫分为3组:pCDNA3.1(+)组、PBS对照组和pcA组,每组16只BALB/c小鼠,pCDNA3.1(+)组和pcA组以100μg/只的剂量肌注免疫,PBS组每只小鼠肌注100μL 1×PBS,各组均免疫3次,每次间隔2周.间接ELISA检测免疫后小鼠血清特异性抗体水平,MTT法检测免疫小鼠脾淋巴细胞增殖情况,三免2周后检测脾淋巴细胞IFN-γ分泌情况.强毒攻击,计算小鼠存活数目及保护率.结果显示,间接免疫荧光试验和RT-PCR检测结果均表明pcA可在体外培养的Vero细胞中表达目的蛋白.动物免疫后,pcA组免疫小鼠血清抗体水平持续上升,与pCDNA3.1(+)组和PBS组相比差异极为显著(P＜0.01).经提取的禽多杀性巴氏杆菌总外膜蛋白(Omps)刺激后,pcA组的刺激值(SI值)与pCDNA3.1(+)组及PBS免疫组相比均差异显著(P＜0.05).脾细胞产生的IFN-γ极显著高于两对照组(P＜0.01).强毒攻击后pcA组保护率明显高于两对照组,可达60%.结果表明,成功构建了禽多杀性巴氏杆菌ompa DNA疫苗,该疫苗可诱导免疫小鼠产生较强的体液和细胞免疫应答及一定的保护效果.     

黄素单加氧酶在大肠杆菌中的表达及靛蓝的生物合成

为实现生物转化法合成靛蓝,构建了携带黄素单加氧酶基因的工程菌E.coli BL21(pET28a/fmo)。工程菌经诱导表达后,加入吲哚进行转化,薄层分析确定产物即靛蓝。文章也对培养基中底物浓度、诱导剂、转化温度、转化时间等影响靛蓝合成的因子进行了初步探讨。结果表明,在合适的条件下,工程菌转化吲哚合成靛蓝产物浓度最高达到48.28mg/L,转化率到达64.4%。     

家庭教育缺失对大学生的影响及对策研究

家庭教育缺失对大学生成长成才有较大的负面作用.本文结合家庭教育缺失的现状及原因分析,提出了积极培育良好的家庭美德、努力构建和谐的亲子关系和注重家校间的信息沟通等建议,以期构建和谐的家庭教育.     

农村空心化与社区建设创新

伴随着中国改革开放和城镇化进程的加快,农村剩余劳动力大规模迁移流动,导致空心化现象产生并严重阻滞着农村经济、社会的可持续发展。农村社区作为我国新时期乡村社会转型需求的产物,是弥补政府公共管理缺失的重要主体,通过其利益聚合、服务提供、关系协调、诉求表达以及文化引导等多项治理功能的发挥,为农村空心化问题的攻克提供了科学的路径选择。     

高校国家助学贷款诚信机制的构建

在社会信用缺失和相关法律、法规不健全的背景下,国家助学贷款违约风险问题成为制约其健康发展的巨大挑战.传统的助学贷款诚信教育只是从道德层面对大学生的诚信行为进行规范,并以此唤醒他们的诚信意识,缺乏法律、制度等方面的约束.通过分析助学贷款失信的原因,提出构建高校国家助学贷款诚信机制的对策.     

863计划成果

表达狂犬病毒不同蛋白的重组痘苗 病霉的构建及其生物学特征的研究 用狂犬病毒CVS株的糖蛋白(G)和核蛋白(N)基因,先后构建了6株重组痘苗病毒,其中4株表达G的,以G基因插入应苗病毒天坛株的不同部位(TK区或Hind Ⅲ M区),并在痘苗病毒P11或P7.5K启动子控制下,以及控不同的DNA转染方式在细胞内重组(用TK拯救技术或避开     

图书馆教育公平对构建和谐社会的价值

在阐述和谐社会的内涵和图书馆教育公平含义的基础上,探讨了图书馆教育公平与构建和谐社会的关系.从公民的平等权利和图书馆自身建设两方面,阐述了图书馆教育公平缺失的现状.通过探讨图书馆教育公平缺失对构建和谐社会的影响,体现出图书馆教育公平对构建和谐社会的价值.最后从图书馆制度建设、政府的财政支持及图书馆工作人员的服务三方面,对如何在构建和谐社会中维护图书馆教育公平进行了思考.     

浅析新农村文化建设面临的主要问题及解决途径

建设先进的农村文化在构建和谐的社会主义新农村中具有重要作用,构建和谐的社会主义新农村必须推进农村先进文化建设.在当前的时代背景下,本文分析了现今农村文化建设中文化主体空心化,文化体制落后.文化设施缺失和文化平台狭隘等问题,并针对这些问题提出了解决途径.     

基于ASP.net的ECharts动态多组曲线图表的实现

ECharts作为数据时代直观、生动、可交互、可个性化定制的数据可视化图表,其显示的数据仍然从数据库获取。文章从数据获取角度出发,阐述了数据库访问类的构建及应用、AJAX页面异步通信、响应页面处理等ASP.net服务器端及页面处理过程,最后描述了ECharts组件的构建、数据序列的设置及显示方法,实践了从原始数据获取到曲线图表展现的通用过程,为IT人士的应用开发提供参考。     

双汇"瘦肉精"事件引发的企业信用缺失的思考

随着我国市场的不断发展和市场竟争的日益激烈,一些企业在市场营销工作中,利用我国市场经济发展中的不完善之处,采取各种不正当手段进行营销活动,严重影响到国家、企业和消费者利益.认真研究企业营销中的信用缺失行为及其危害并采取行之有效的策略加以矫正,对于净化我国企业的营销环境,推动企业营销工作的健康发展具有重要意义.文章由双汇"瘦肉精"事件引发对企业营销信用缺失的思考,对企业在市场营销中信用缺失的表现与影响进行了分析,探寻信用缺失的原因,最后提出了治理企业信用缺失的对策.     

跨文化视角下部分大学生中国文化缺失现象析

目前部分大学生出现传统文化缺失与大学生道德素质弱化问题,在传统文化缺失问题上表现为传统文化传承功能失调,西方文化甚嚣尘上;漠视传统文化与道德,功利主义思想抬头.在部分大学生道德素质弱化问题上表现为对传统文化中"立志"与"志向"认识的缺乏,导致部分大学生出现较普遍的精神空虚与颓废现象;对传统文化中"谦让"和"宽恕"知识的缺乏,导致部分大学生出现较普遍的"以自我为中心"和人际紧张现象.治理传统文化缺失与大学生道德素质弱化的基本对策,政府及其主流媒体要重视与引导,发挥其主导作用;媒介组织应将社会利益始终置于首位,强化使命担当;将中华传统文化有益营养融入校园文化,构建认知平台.     

秸秆覆盖量对小麦出苗及生长的影响

文章研究了山东半干旱地区秸秆覆盖对小麦出苗及其前期生长发育情况的影响,通过室内室外试验表明:秸秆覆盖量和细碎程度均会影响小麦出苗率,秸秆覆盖量会影响小麦出苗后的生长性状:选择适当的覆盖量和细碎程度可以明显提高小麦的出苗率,改善其生长状态.     

公正视角下和谐社会的构建

目前我国的经济领域、政治领域、社会领域中存在着社会产品分配不均、弱势群体权利缺失、社会保障体制不完善等问题,对和谐社会的构建造成极大的障碍.实现社会公正已成为构建良性运行和谐社会的一项重要内容.     

论P2P网贷平台下的消费金融发展新模式

P2P平台与消费金融融合是金融创新的必然产物,是促进资本与商品交换的有效手段,是在金融资源配置中实现公平与效率的有机统一。文章通过分析P2P消费金融优势与不足,从现实角度出发提出要从资金端、平台端、项目端和全流程监管进行改造与升级,构建符合包容性金融体系的P2P消费金融生态体系。     

西安城市标识系统设计中的文化性研究

本文在对城市标识系统的内涵及其文化性分析的基础上，采用了文献研究和调查研究相结合的研究方法，指出了西安城市标识系统设计中文化缺失的现象，并提出了西安城市标识系统设计中文化功能构建的方法和意义。     

静电纺丝制备竹纤维素/PAN超细纤维的工艺技术与过滤实验

在研制超细纤维的实验初始阶段,借助于氯化锂/N,N-二甲基乙酰胺(LiCl/DMAc)化学试剂有效处理竹纤维素和聚丙烯腈(PAN),直至完全溶解。将所得到的反应产物按照一定的配比制备成为纺丝液,之后经过静电纺丝工艺手段得到竹纤维素/PAN超细纤维,其直径尺寸维持在130-450nm的区间范围内。对产物直径数值和影响因素深入探讨可以得出,纤维直径数值与制备环节所使用竹纤维含量之间呈现出显著的正比关联,与纺丝间隔尺寸呈现反比,由实验测定数据可得,纺丝制备系数最优解是质量分数在0.8%节点,处理电压在16kV,在14cm的间隔位置。使用该制备材料并通过综合过滤实验得知,过滤水平和纤维膜密度以及初始试剂含量有正相关联系,从数据得出过滤极值可稳定在99.5%。     

关于电子商务下的网络会计发展的研究

网络会计是传统会计与网络相结合的产物,它使企业或使用者能够更加准确地了解会计以及其他与企业有关的信息,也能够使企业运用网络工具分析企业的现状及其财务指标等。目前,我国网络会计的发展还处于起步阶段,很多环节和细节方面的运作及处理有待完善,必须构建涵盖技术、管理、法律及人才等措施的保障体系,从而增加网络会计的可实施和可发展性。