进出口食品中沙门氏菌PFGE分型及耐药研究

目的：研究进出口食品中分离的沙门氏菌（SA）分子型别和耐药情况。方法：用限制性内切酶XbaⅠ酶切SA染色体DNA进行脉冲场凝胶电泳（PFGE）实验,用BioNumerics软件分析菌株之间的相似度。用Vitek 2进行药敏实验,分析SA耐药情况。结果：24株SA分成22个PFGE型。SA2和SA11之间相似度100%,鼠伤寒SA之间的相似度62.1%～90.3%。药敏实验结果显示5株鼠伤寒SA共有4种耐药谱,部分菌株对青霉素类、呋喃类、氨基糖苷类、磺胺类耐药。结论：进出口食品中分离的SA表现出较大的遗传多样性,但部分菌株有相关性。     

水产品中沙门氏菌的分离与血清学鉴定

[目的]探索如何准确并快速地进行水产品中沙门氏菌的血清学鉴定。[方法]将经过VIDAS SLM初筛、API鉴定为沙门氏菌阳性的菌株按照国标方法进行血清学分型鉴定。[结果]从9个水产品样品中分离出9株沙门氏菌,其中沙门氏菌B群3株、C1群4株、D群1株、其他群1株。[结论]用沙门氏菌阳性菌株的营养肉汤增菌液的菌苔沉淀来进行血清学分型鉴定是一种很好的辅助方法,有助于提高沙门氏菌血清学鉴定的效率和准确性。     

多重PCR检测食品中霍乱弧菌和副溶血性弧菌的研究

建立快速检测食品中霍乱弧菌和副溶血性弧菌的多重PCR(MPCR)方法.针对古典型霍乱弧菌(CVC)和埃尔托型霍乱弧菌(EVC)的共有序列霍乱肠毒素基因(ctxB)、CVC的毒力协调A亚单位基因(C-tcpA)、EVC的毒力协调A亚单位基因(E-tcpA)、副溶血性弧菌的热稳定性直接溶血素基因(tdh)为靶序列设计引物,建立多重PCR检测方法,相应扩增片段依次为564bp、617bp、471bp和202bp.用该方法检测EVC、CVC、副溶血性弧菌、非O1群霍乱弧菌、沙门氏菌等35株菌株表现出极好的特异性,对人工污染的罗非鱼、小虾、牡蛎、鱼鳃和鱼肠混合物的检出限EVC为2.2 cfu/mL、CVC为2.8 cfu/mL、副溶血性弧菌为6.5 cfu/mL,扩增片段表现出极好的特异性,整个实验过程8～10h完成.实验结果表明该方法是特异性强、省时、省力的检测方法.     

用FQ-PCR方法快速检测水产品中副溶血弧菌

[目的]采用荧光定量PCR技术,研制适合各层次实验室使用的,快速、准确地检测与鉴定食品中副溶血弧菌污染的定性、定量检测试剂盒.[方法]根据副溶血弧菌gyrase基因序列,设计并合成特异性引物和荧光标记探针,将扩增后的特异片断制成阳性模板,绘制标准曲线.以副溶血弧菌菌株8株及同源及非同源参考菌株24株,做特异性检测;将阳性污染菌按梯度加入阴性样品为模拟样本,做敏感性检测.同时使用PE7000型定量PCR仪和国产DA620微量荧光检测仪检测.[结果]该方法有良好的特异性8株副溶血弧菌结果均为阳性,而其他24株菌株均为阴性(其中8株是弧菌科,其它15株分别来自不同的菌属);该方法有良好的敏感性阳性模板浓度与定量曲线循环阈值之间具有良好的线性关系,相关系数达到0.9871.直接进行定量检测,则检测低限在102cfu/g;经过24小时增菌培养,检测低限可达2cfu/g.[结论]该方法特异性强、敏感性高,操作简便快速,能避免常规PCR方法易污染的缺陷,在国产仪器上测试同样取得较好的敏感性和特异性,便于基层实验室使用,具有很好的推广应用前景.     

荧光分析法快速检测水产品中副溶血性弧菌

[目的] 提出一种新颖、简便、快速检测水产品中副溶血性弧菌的方法.[方法] 本方法用阿拉伯糖-葡萄糖醛酸盐培养基(AG)在37℃下对副溶血性弧菌进行增菌,以苯甲基-L-精氨酸-7-氨甲基-香豆素(Bz-Arg-7AMC)作荧光底物,用荧光分析法检测该菌的胰蛋白酶样活性,通过判读胰蛋白酶样活性,确定水产品中是否污染有副溶血性弧菌.[结果] 该方法的灵敏度为20个/g,相关分析表明荧光分析法与5管MPN计数法呈正相关,相关系数为0.86.[结论] 用本方法只需8个小时就可完成水产品中的副溶血性弧菌的检验,操作简便,灵敏度较高,适于快速检测需要.     

盐度对副溶血性弧菌生物特性的影响

目的:研究副溶血性弧菌耐低盐或耐高盐菌株在不同盐度下的生物学特性。方法:通过测定副溶血性弧菌分离株的耐低盐和耐高盐能力,筛选出耐低盐和(或)耐高盐菌株和盐的含量,分别测定其在低盐、最适盐度和高盐APW中的生物被膜生成力、溶血素活力、产胞外蛋白酶能力。结果:在最适盐度(3%Na Cl)生长条件下,菌株生物被膜生成能力和溶血素活力最强,在低盐(0.6%Na Cl)或高盐(8%Na Cl)条件下能力明显减弱,而其产胞外蛋白酶能力在不同盐度培养条件下没有明显差异。     

食源性疾病监测中副溶血性弧菌现场快速检测方法的建立与应用

目的:建立多种食源性疾病监测中副溶血性弧菌现场快速检测方法并观察应用效果。方法:选取高密市疾病预防控制中心1年内收集的211份肠道门诊腹泻患者样本,以及以海水产品为主的150份食品样本作为研究材料,应用多种快速检测方法对研究材料进行检测并观察检测情况。结果:20株副溶血性弧菌中有1株为PCR阴性,19株3种检测方法均为阳性;3种检测方法中,海水产品的检出率最高,均为18.7%。结论:典型生化联合筛检法、实时荧光定量PCR法、恒温扩增-核酸试纸条法在快速检测副溶血性弧菌方面具有重大应用价值。     

FEPAS水平测试中两种致病菌的分离与鉴定

[目的]通过积极参加国际实验室间的技术交流,提高食品微生物检测水平、验证实验室检测能力.[方法]本文对2002年5月至2003年6月广州检验检疫局食品检测中心参加的英国中心科学实验室(CSL)食品微生物学能力验证计划(FEPAS),采用传统生化鉴定与API20E细菌编码鉴定系统相结合的鉴定方法,对沙门氏菌、副溶性弧菌进行分离鉴定.[结果]采用本文方法能准确鉴定出测试样品中的沙门氏菌、副溶性弧菌,水平测试取得满意结果.[结论]通过参加水平测试,表明广州检验检疫局食品检测中心食品微生物检测能力满足FEPAS要求,达到国家水平.     

鳄鱼肠中一株乳酸菌分离鉴定及活性物质的初步分析

利用含有0.3%CaCO_3的MRS分离培养基,从鳄鱼肠道分离得到1株产酸能力强的菌株,命名E02,通过形态观察,并进行生理生化特征分析,初步鉴定为乳杆菌。以大肠杆菌、副溶血性弧菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、单核细胞增生李斯特菌和黑曲霉作为指示菌,采用牛津杯双层平板法测其发酵产物抑菌活性。通过用乳酸调节与原发酵液相同pH的MRS液体培养基,并与原发酵液作抑菌活性对比,进行抑菌活性物质初步分析。实验结果表明,菌株E02发酵产物的抑菌物质主要是酸,只有少部分是其他活性物质。     

应用PCR技术快速检测水产品中副溶血弧菌的研究

1前言 副溶血弧菌(Vibrin Parahemolyicus)是海洋和盐湖中微生物区系的重要成员,食品卫生上的重要病原菌.由于水产品自身携带该菌,给该菌在水产品加工中的预防带来难度.近年来,我国出口的水产品曾有多起因副溶血弧菌超标引起的退货、销毁、取消注册代号的恶性事件发生.欧盟3 6 8决议(97/368EC)和587号决议(97/587/EC)更是要求对原产于中国的水产品批批检验副溶血弧菌.流行的副溶血弧菌检测方法-培养法检验周期较长,往往需7天以上才能报告结果,从食品的特定货架期、高额储藏费用和适应食品贸易的角度,我们探索了用PCR技术检测食品中副溶血弧菌的方法.该类研究已有报道,但多集中在实验室方法探索上[1-9],真正从应用的角度对食品中副溶血弧菌的PCR检测方法研究鲜有报道.     

酶联免疫分析法测定猪肠衣中磺胺二甲基嘧啶残留量

建立测定猪肠衣中磺胺二甲基嘧啶残留量的ELISA分析法。方法检测低限为5μg/kg;在5μg/kg、20μg/kg和100μg/kg三个添加水平进行加标回收试验,回收率分别为82.0%-96.0%、87.5%-102.0%和83.9%-105%;重复性试验：CV%分别为5.3%、5.3%和8.2%;重现性试验：CV%分别为8.0%、7.9%和7.5%。本方法灵敏度、准确度和精密度均符合残留分析质量控制的要求,适用于猪肠衣中磺胺二甲基嘧啶残留量的快速检测。     

Vendor Hygienic Practices and Consumer Perception of Food Safety during the Carnival festival on the island of Tobago,West Indies

Local festivals are usually the highlights on the small island, Tobago, West Indies. The street vendors capitalized on the Carnival season where they provide a variety of foods and beverages on‐demand for masqueraders and spectators. Therefore, this study examined food safety and hygienic practices by vendors and consumer perception of such practices at the Carnival festivals in Tobago. Standard structured questionnaires and observational checklists were compiled and administered to 50 vendors and 150 consumers at five Carnival events. Each vendor was observed for frequency of practices for 15–20 min. Consumers were sampled systematically (every fifth person encountered) at each event. The vendors examined were generally female (70.0%), 41–50 years old (34.0%), possessed less than primary education (36.0%), acquired more than 5 years of experience (44.0%) and were stationary (78.0%). The most common food prepared and sold was hot dog (36.0% of all sold foods). Educated vendors practised good personal hygiene and on‐site food handling, whereas the others performed improper practices such as absence of aprons and hair covering, wearing of jewellery and handling money while serving. Also, vendors displaying valid food badges generally practised more proper personal hygiene and food handling than those without badges. The majority of the consumers examined were residents of Tobago (80.0%), female (74.7%), 21–30 years old (39.3%) and possessed secondary education (53.3%). More than half of the consumers purchased foods at Carnival events (57.3%). Most (82.7%) who did not purchase stored foods in coolers. More than half (58.0%) had seen or read Carnival food safety articles in the local newspapers and most (96.0%) were aware that illnesses can be transmitted via consumption of food. Additionally, 42 out of 74 respondents (56.8%), who indicated that they were affected by foodborne illness, sought medical help when foodborne illness was suspected. However, a mere 13 out of 74 consumers (17.6%), who indicated that they were affected by foodborne illness, lodged reports of suspected foodborne illness with the local health authority. Younger consumers (21–30 years old) mostly read food safety articles and were conscious of illness being transmitted via consumption of food. In addition, the more educated consumers (tertiary education) indicated awareness as well as formal reporting of foodborne illness. Some gaps in vendor practices included handling of money while serving (78.0%), failure to clean utensils (68.0%) and access to water (48.0%). Noteworthy, only visual observation and interviews were utilized in the study.     

医用手套表面残余矿物粉末快速鉴别技术研究

[目的]建立了一种采用XRD粉末衍射快速鉴别医用手套表面残余矿物粉末的方法。[方法]乳胶手套表面残余粉末通过水洗、过滤收集后,采用XRD方法测定了三种不同生产厂家的医用手套表面残余粉末。[结果]三种医用有粉手套的表面残余粉末均为矿物混合物粉末,含有滑石、白云石、菱镁矿、绿泥石、石英和方解石等几种矿物质,从XRD谱图中很容易辨别出矿物粉末和玉米淀粉。[结论]XRD是一种快速、准确的鉴别一次性医用有粉手套表面残余矿物粉末的方法。     

石墨炉原子吸收分光光度法测定水样中铬的不确定度

[目的]通过对影响测定结果的不确定度因素的分析和量化,评价石墨炉原子吸收光谱法测定水样中铬的不确定度。[方法]调节仪器最佳测定条件,测定铬标准工作溶液系列并依据工作软件自动建立工作曲线和数学模型;连续测量10次水样,根据标准曲线获得未知样品铬浓度;分析石墨炉原子吸收分光光度法测定水样中铬的误差性质和来源,确定不确定度的主要因素,计算水样中铬的测量不确定度。[结果]扩展不确定度U95=0.016mg/L（Veff=20）。[结论]根据分析仪器的测定数据输出方式建立数学模型,进行不确定度评定,方法直观简明,与实际工作相符合。     

MALDI Biotyper高通量微生物鉴定系统在台湾进口鳖蛋检疫中的初步应用

[目的]应用MALDI-TOF-MS和Biotyper分析软件对台湾进口的鳖蛋进行携带病原菌的检测。[方法]按照病原菌检测标准进行培养,选取可疑菌株,肉汤培养后,按照MALDI-TOF-MS要求进行样品制备、点靶以及样品质谱图的获取,并运用Biotyper分析软件对所获取的质谱图进行分析。[结论]应用MALDI-TOF-MS方法从进口鳖蛋中分离出绿脓杆菌、奇异变形杆菌、肺炎克雷伯氏菌等致病菌,为进出口商、检验机构及其他相关部门敲响警钟。此鉴定方法简单快速,能够加快鳖蛋的通关速度,为两岸建设作贡献。     

弧菌显色培养基（ChromID Vibrio）对霍乱弧菌检测效果的探讨

[目的]探讨梅里埃弧菌显色培养基（简称ChromID Vibrio）对霍乱弧菌的检测效果。[方法]通过ChromID Vibrio弧菌显色培养基同硫代硫酸盐-柠檬酸盐-胆盐-蔗糖（简称TCBS）琼脂培养基进行比对,采用阳性菌株直接平板计数、人工污染样品和实际样品检测的方法,对ChromID Vibrio的灵敏性、特异性和检测效果进行了评价。[结果]ChromID Vibrio弧菌显色培养基上霍乱弧菌典型菌落是蓝绿色。阳性菌株直接平板计数及人工污染试验均表明ChromID Vibrio平板的敏感性均比TCBS平板高。对采集的300份实际样品进行检测,都未检出霍乱弧菌。[结论]ChromID Vibrio具有较好的灵敏性、特异性,能提高霍乱弧菌检测效率。     

Leaving home: Food choice behavior of young German adults

Like other western countries, Germany too reports record numbers of overweight and obese individuals with young German adults in a particularly high-risk position. As such, this study sought to investigate if food choice varied by the place of residence (dependent or independent) of these young adults. Using a self-administered questionnaire, analyses of quantitative data from 305 German students between the ages of 18 to 24 years indicate that students living in the family home consume more serves of both fruit and vegetables each day in comparison to young adults living independently. Further, higher proportions of dependent students eat more serves of every food group each day in comparison to their independent counterparts. The study finds a significant difference in mood, weight concern, and attitudes towards healthy eating between students under 21 years old and those above 21 years old. This study demonstrates clear implications for a number of stakeholders. The individuals themselves must better develop skills in both food choice and food management, including budgeting. Parents can facilitate this development whilst the children are in the family home and then encouraging empowerment once the student makes the transition to college or university. The article includes implications for marketers and social marketers; the former must offer more information and guidance on food choice, for example, through better food labelling, the latter must address these message issues for future attitude and behavioural change campaigns.     

中国口岸输入性医学媒介生物防控体系的建立

[目的]探讨建立科学的口岸输入性医学媒介生物防控体系的必要性,降低虫媒传染病传入风险。[方法]通过总结我国口岸输入性医学媒介生物监测及携带病原体检测研究成果,结合我国口岸卫生检疫工作需要,研究建立口岸输入性医学媒介生物防控体系的结构功能和运行模式。[结果]建立口岸局—直属局—国家质检总局输入性医学媒介生物三级专家风险评估体系模式和国家质检总局—直属局—口岸局输入性医学媒介生物三级防控处置体系模式,可分别为科学防控提供技术支持和组织保障。[讨论]建立上述三级防控体系,并保障其有效运行,对提高我国口岸输入性医学媒介生物防控工作科学水平,保障口岸卫生安全具有积极的指导意义。     

抗草甘膦转基因大豆DNA标准分子构建及多重荧光PCR检测体系的建立

[目的]将抗草甘膦转基因大豆中的CaMV35S、NOS和CP4 EPSPS 3种外源基因融合在PMD-18T载体并建立三重实时荧光PCR检测方法,实现通过一次PCR反应就能完成抗草甘膦转基因大豆的转基因成分检测。[方法]通过PCR扩增和基因克隆的方法构建含有CaMV35S、NOS和CP4 EPSPS外源基因的质粒,设计TaqMan探针建立三重荧光PCR检测体系。[结果]成功构建融合抗草甘膦转基因大豆3种外源基因质粒PMD18T/SOY,并建立三重荧光PCR检测体系,检测限值为10-3 ng/μL,线性关系良好r,2在0.998以上。[结论]构建同时含有多种外源基因的质粒作为转基因检测的阳性参照物并建立多重PCR检测体系,不仅可降低试剂成本、节省时间和人力,而且可以减少PCR反应次数和加样环节,降低PCR污染的几率。